Roscovitine同期化供核细胞对猴—猪异种核移植胚胎发育的影响     

许常龙  秦祖兴  梁明明  胡林林  罗茜  崔静辉  罗军  左二伟  许惠艳 《广西农业科学》2013,(10):1722-1726

[目的]探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础.[方法]活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后用流式细胞仪分析细胞周期分布.以不同同期化方法处理的食蟹猴耳纤维细胞为供体细胞,以体外成熟、去核的猪卵母细胞为受体细胞,利用电融合法构建食蟹猴—猪异种核移植胚胎,观察异种核移植重构胚胎的体外发育情况.[结果]以15 μmol/L Roscovitine处理食蟹猴耳成纤维细胞24、48、72 h获得的G0/G1期细胞比率分别为76.51％、89.69％和90.49％,其中处理48和72h的G0/G1期细胞比率显著高于对照组（P＜0.05）.血清饥饿、接触抑制72 h同期化获得的G0/G1期细胞比率分别为91.12％和90.46％.Roscovitine同期化处理食蟹猴耳成纤维细胞48 h可有效提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率（15.05％）,显著高于血清饥饿同期化处理和接触抑制同期化处理的效果（P＜0.05）.[结论]Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纤维细胞在G0/G1期,最终提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率.  相似文献   

黄颡鱼源嗜水气单胞菌对盐酸沙拉沙星耐药性获得与消失速率的测定     

黄新财  彭民毅  黄钧  胡大胜  彭亚  黄艳华  施金谷  温华成  韦贵花 《广西农业科学》2013,(10):1731-1734

[目的]测定黄颡鱼源嗜水气单胞菌对盐酸沙拉沙星的耐药性,为制定盐酸沙拉沙星在水产动物疾病防治中的用药程序提供参考依据.[方法]采用二倍稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）,以传代法测定菌株的耐药性获得和消失速率.[结果]盐酸沙拉沙星对WZAh-01、WZAh-02、WZAh-03和YFAh-04菌株的MIC分别为0.625、0.3125、0.3125和0.15625 μg/mL;在含有盐酸沙拉沙星的培养基中连续传代8次后,4株供试菌株的MIC上升了64～512倍;将获得的强耐药性诱变菌株于4℃中保存30 d,结果发现WZAh-02 、WZAh-03和YFAh-04菌株的MIC下降了50％,WZAh-01菌株的MIC保持不变.[结论]黄颡鱼源嗜水气单胞菌经连续8代的耐药性诱导后对盐酸沙拉沙星获得很强的耐药性,且产生耐药突变后的菌株具有相当稳定的遗传性,耐药性在短期内很难消除,因此在实际生产上不宜常用或滥用盐酸沙拉沙星.  相似文献   

不同栽培模式及施氮量对半旱地冬小麦氮素累积及分配的影响   总被引：6，自引：0，他引：6  

王春阳  周建斌  郑险峰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2008,36(1):101-108

【目的】研究不同栽培模式和施氮量对半旱地栽培条件下冬小麦-夏玉米轮作体系中冬小麦地上部氮素累积、分配及利用效率的影响。【方法】在陕西关中地区进行了田间试验,以常规栽培为对照,比较了补灌、覆草和垄沟等栽培模式及0,120,240 kg/hm2施氮水平,对冬小麦连续2年(2004和2005年)不同生长期各部位氮素累积量的影响。【结果】在补灌模式下,2004和2005年成熟期冬小麦叶片和茎秆的氮素累积量较其他模式低,氮素分配率也较低,而籽粒的氮素分配率较高;施用氮肥显著增加了各生长时期冬小麦叶片、茎秆、颖壳和穗轴以及籽粒的氮素累积量,当氮肥施用量由120增加到240 kg/hm2时,除籽粒外,成熟期冬小麦叶片、茎秆、颖壳和穗轴的氮素残留量均随之明显增加。与不同栽培模式相比,施用氮肥对冬小麦不同器官中氮素分配的影响较小。随着氮肥施用量的增加,氮肥利用效率、氮肥农学效率和氮肥生理效率均呈降低趋势。在不同栽培模式中,连续2年补灌栽培模式下冬小麦的氮肥利用效率、氮肥农学效率以及氮肥生理效率均较高,而其他栽培模式下这3个指标年际间的变化较大。【结论】施用氮肥可显著增加冬小麦各生长时期不同器官的氮素累积量,但对氮素在不同器官中分配比例的影响较小;与施用氮肥相比,不同栽培模式对冬小麦氮素的累积、分布无明显影响;冬季补灌有利于提高冬小麦的氮素效率。  相似文献   

蜜蜂磷酸丙糖异构酶基因(AmTpi)全长cDNA的电子克隆及其验证     

周君  徐剑  相入丽  陆小平 《福建农林大学学报(自然科学版)》2009,38(2)

用电子克隆的方法获得蜜蜂(Apis mellifera)磷酸丙糖异构酶基因(triosephosphate isomerase,Tpi),对该基因序列进行克隆及生物信息学分析.结果表明,该基因全长1768 bp,具有完整的开放阅读框架(ORF),编码247个氨基酸的蛋白;其编码的氨基酸序列与果蝇(Drosophila melanogaster)、家蚕(Bombyxmori)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、按蚊(Anopheles gambiae)、烟蚜夜蛾(Heliothis virescens)的磷酸丙糖异构酶的蛋白序列具有较高的保守性.  相似文献   

栝楼离体快繁的初步研究     

余慧琳  胡月华  李君 《湖北农业科学》2009,48(2)

对药用植物栝楼的离体快繁进行了研究.结果表明,MS培养基+BA 0.2～0.3 mg·L-1+NAA 0.1～0.2mg·L-1组合最适合诱导栝楼茎段腋芽形成无菌试管苗;MS+BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.1～0.2 mg·L-1组合是继代增殖最适培养基:1/2 MS+NAA 0.2mg·L-1组合是生根最适培养基.  相似文献   

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验     

王红琳  杨峻  邵华斌  温国元  艾地云  罗玲  罗青平  张蓉蓉  张琳 《农业科学与技术》2009,10(2):102-107

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。  相似文献   

连作对土壤性状影响的研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

彭有才  刘挺  赵俊杰  孙曙光  高峻  吴福如  刘国顺  叶协锋 《江西农业学报》2009,21(9):100-103

针对连作产生的障碍,综述了连作与土壤理化性状、土壤微生物和土壤酶活性之间的关系,指出连作会造成土壤养分不平衡、土壤微生物区系发生变化、土壤物理性状和土壤酶活性朝着不利于作物生长的方向改变,是影响作物生长发育、产量和品质的主要原因。为此,提出了改良土壤、消除连作障碍的一些措施。  相似文献   

巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析     

林秀琴  邓军  袁坤  王真辉  杨礼富 《热带农业科学》2009,29(4):1-6

采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和双向凝胶电泳（2-DE）的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE（双向电泳）图谱效果更好（7cm,考染）。根据预实验结果,选用17cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基和F1104．2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。  相似文献   

山羊痘病毒TK基因的克隆与序列分析     

罗阿东  唐源  文明  岳筠  程振涛 《山地农业生物学报》2009,28(2)

设计特异性引物并应用PCR方法扩增山羊痘病毒QL、LD、Y、B株TK基因序列片段,将其克隆至pMD 18-T载体,构建重组质粒pMD18-T-TK.再将该重组质粒转化DH5α感受态细胞进行培养,对通过PCR、酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定.TK基因核苷酸和氨基酸同源性分析表明,4株测序毒株TK基因与参考毒株的同源性均为96.6%～100%,说明羊痘病毒TK基因具有高度的保守性.  相似文献   

木耳菌糠有机肥对烤烟干物质的影响     

董洪涛  陈兴  焦玉生 《黑龙江农业科学》2014,(4):51-54

为探索木耳菌糠有机肥的肥效,研究了施用木耳菌糠有机肥及其与化肥配施对烤烟根、茎、叶干重的影响。结果表明:化肥与木耳菌糠有机肥配施对增加烤烟中期干物质重具有明显的促进作用。烟苗移栽后69d,处理6(75%有机肥氮+25%无机肥氮)根干重、茎干重和叶干重均最高,与其它处理差异达显著水平,建议生产中应用。  相似文献