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为制备抗猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法，本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡，收集免疫后所产的鸡蛋，分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对鸡蛋中IgY进行提纯，然后运用间接ELISA和Western blotting方法鉴定和比较3种方法的提纯效果，获得可用于规模化生产的提纯方法；同时研究不同温度、pH条件下抗体活性，寻找对提纯IgY活性具有保护作用的物质。结果显示，本试验成功制备了抗PEDV变异株的卵黄抗体。浓度检测结果表明，水稀释法提取的IgY浓度最高，为6.204 mg/mL；PEG-6000方法提纯的IgY浓度次之，为4.673 mg/mL；水稀释-硫酸铵二次沉淀法IgY浓度最低，为3.359 mg/mL。间接ELISA检测结果表明，水稀释-硫酸铵二次沉淀法提纯的IgY效价最高，为1：12 800；其次是PEG-6000，为1：6 400；而水稀释法最低，为1：1 600。综合3种方法所提纯的卵黄抗体浓度与效价，发现水稀释-硫酸铵二次沉淀法的提纯效果优于其他两种方法。活性影响因素试验结果表明，提纯的IgY在37~60℃活性稳定；pH为4.0~11.0时具有良好的活性；在酸性条件下，20%硫糖铝对IgY活性具有较好的保护作用。本试验结果将为卵黄抗体的大规模生产运用与储存提供了有效的参考依据。 相似文献
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<正>副猪嗜血杆菌病,又称格拉泽氏病(GLasser's disease)。是由副猪嗜血杆菌(HaemophiLus parasuis,HPs)引起的猪的传染性疾病。该病主要影响2～4周龄的青年仔猪,病猪主要表现浆膜炎和关节炎症 相似文献
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为了解中国猪群中猪诺如病毒感染情况,本研究根据猪诺如病毒保守的RNA依赖性RNA多聚酶(RNA Dependent RNA Polymerase,RDRP)基因序列设计了一套巢式RT-PCR引物,用该引物从猪粪便样品中扩增出与预期目的产物大小一致的条带,经克隆、测序后获得的序列与GenB ank数据库序列比对,证明所扩增的序列属于猪诺如病毒,表明本研究成功建立了猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法。该检测方法具有高特异性和敏感性,应用该方法检测某猪场健康育肥猪粪便样品,阳性率为54.5%。通过RDRP基因进行核苷酸同源比对发现本文获得的猪诺如病毒Wuning 1株属于GII群诺如病毒,与美国猪诺如病毒毒株OH-QW101/03/US、中国猪诺如病毒毒株Norovirus pig/GII/Ch6/China/2009核苷酸序列同源性最近。值得注意的是猪诺如病毒Wuning1毒株与武汉人诺如病毒毒株E2120/CHN/2010核苷酸同源性高达77.1%,说明猪诺如病毒Wuning 1毒株与武汉人诺如病毒基因组上亲缘性较近。本研究成功建立了一种检测猪诺如病毒的巢式RT-PCR方法,并应用于临床猪粪便样品的检测,为猪诺如病毒的诊断与监测提供了可供借鉴的方法、为猪诺如病毒的进化、分子病毒学及与人诺如病毒关系的深入研究提供依据。 相似文献
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根据GenBank数据库中的新现猪圆环病毒3型(PCV-3)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的OFR2基因设计了2对扩增PCV-3和PCV-2的特异性引物,通过优化各反应条件,建立同时检测PCV-3和PCV-2的双重PCR方法。敏感性和特异性结果显示,该方法对PCV-3和PCV-2的最低核酸检测量均为1.0×103拷贝/μL,而对猪伪狂犬病毒(PRV)、猪delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)的扩增结果均为阴性。应用所建立的双重PCR检测了临床上256份样品,结果表明,PCV-3和PCV-2感染的阳性率分别为0.78%(2/256)和86.3%(221/256),仅有1份样品为PCV-3和PCV-2混合感染,混合感染阳性率为0.39%(2/256)。试验结果表明,本研究建立的PCR方法敏感、特异,适于临床样品检测,为猪群中PCV-3和PCV-2的临床快速诊断和流行病学调查提供了一种工具。 相似文献
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(接上期)表3奶牛和水牛饲料干物质中粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、估计总可消化营养物质(TDN)的估计浓度时间n CP NDF TDN奶牛时间×村庄··NS··A村2002.61610.4±0.9a,c63.9±3.2c61.2±2.0a2002.9228.0±1.6ab,c64.5±2.3c57.4±2.8b2002.12225.6±1.5c65.7±b51.9±2. 相似文献
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叙述了生态型日光温室的分类及特点,开发生态型日光温室设施的意义;我单位研究开发的生态型日光温室设施各部分的组成及工作原理。 相似文献
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中空玻璃是一种玻璃深加工产品,也是一种用途广泛的节能材料。近年来,已经由以往只用于高档建筑的特殊产品迅速向普通建筑、空调列车,空调客车、冰箱、展示柜等领域普及。随着人们环保节能意识的增强,中空玻璃的推广应用前景将非常广阔。该成套设备既可制作槽铝式中空玻璃,也可制作胶条式中空玻璃。设备主要包括立式玻璃清洗机、中空玻璃热压机、丁基胶涂布机、玻璃磨边机、玻璃合片台、胶条装配涂胶台。制作胶条式中空玻璃时,不用丁基胶涂布机。制作槽铝式中空玻璃时,热压机可以不开加热部分,作冷压机使用。1设备1.1立式玻璃清洗机立式玻璃… 相似文献
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母猪乳房炎是哺乳母猪的常见病,主要由仔猪尖锐的牙齿咬伤或其他机械性因素损伤乳头皮肤而引起感染,常发生于产仔至哺乳30天内的哺乳母猪。近几年笔者在治疗母猪急性乳房炎过程中总结出一种中西结合疗法,经过实践验证效果较好,供大家参考。一、临床表现江西省南康市某猪场二胎母猪2头,于2012年1月2日产仔,产前6小时与其他正常临产母猪一样,乳房胀大,手挤时有乳汁分泌。产仔2头后,乳房开始变硬、发烫。经3.5小时产仔结束,奶水渐少,有多对奶头周边坚硬,初乳不足,体温达40.6℃。连续2天拒食,倒数2~3乳头基部有碗口大疙瘩,表皮灼热,拒触压,挤压无乳汁(图1)。 相似文献
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