副溶血弧菌感染12h和24h杂色鲍肝脏全长cDNA文库的构建   总被引：5，自引：0，他引：5  

王艺磊  张子平  戴军  邹志华  王淑红 《中国水产科学》2004,11(3):190-195

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大黄鱼碱性磷酸酶基因的克隆及表达特征分析     

冯建军  姚志刚  张子平  钟恩惠  庄道华  林鹏  郭松林  关瑞章  王艺磊 《水产学报》2014,38(9):1243-1254

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)是一种广泛分布的单脂磷酸水解酶,是动物生物代谢过程中重要的调控酶。实验首次克隆了大黄鱼ALP基因cDNA全序列,命名为LcALP,其全长为2 345 bp,开放阅读框为1 629 bp,编码543个氨基酸。实时荧光定量PCR检测发现,LcALP在大黄鱼雌雄各组织中均有表达,其中在眼和头肾的表达量最高,雌性鳃和脑中LcALP表达量显著高于雄性,而在性腺和脾脏中的表达量则显著低于雄性;胚胎发育过程中,多细胞期、囊胚期和原肠期LcALP基因表达水平相对较低,在卵黄栓形成期明显提高,至孵出期达到峰值,而初孵仔鱼期则显著下调;大黄鱼肌肉细胞系经LPS处理后6 h LcALP表达量降低,12 h显著下调,而poly I:C处理后表达水平持续上升,24 h显著上调至峰值。研究表明,LcALP在大黄鱼胚胎发育调控以及机体免疫防御中发挥重要作用。  相似文献   

基于dnd基因标记的大黄鱼原始生殖细胞发生发育的初步研究     

陈仕海  蔡明夷  张子平  韩坤煌  姜永华  张伟军  王艺磊 《水产学报》2015,39(9):1273-1282

在鱼类的早期胚胎发育中生殖细胞便与体细胞分离,形成所谓的原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)。母源性基因Dead end(dnd)在胚胎发育中特异地表达于原始生殖细胞,编码一种进化上保守的RNA结合蛋白,对生殖细胞发育具有重要作用。本研究通过PCR获得大黄鱼(Larimichthys crocea)dnd基因(Lcdnd)的部分cDNA序列,结合实时定量PCR、整胚原位杂交等技术,研究Lcdnd在各组织和胚胎发育中的表达。实时定量PCR结果显示：dnd在性腺中特异表达,且其在卵巢中的表达量高于精巢;检测的各期胚胎中都有dnd的表达,随着胚胎的发育其表达量呈下降的趋势。整胚原位杂交结果显示：Lcdnd在早期卵裂阶段主要分布于分裂沟,到囊胚期至原肠早期则开始定位于细胞内,原肠早期时定位在胚环中的中内胚层,且阳性信号增多,暗示此时原始生殖细胞的形成。接着原始生殖细胞沿胚环向胚体形成处(胚盾)迁移;随着胚胎的发育,发现胚体两侧的阳性信号增多;到体节发生期,阳性信号细胞分布于胚体两侧的侧板中胚层,随着体节的发生这些细胞沿背腹轴向腹部运动;发育到孵出期时,到达了发育中的原始生殖嵴。本研究首次使用dnd作为一种较为可靠的大黄鱼生殖细胞标记,揭示了大黄鱼原始细胞的起源与迁移,为大黄鱼生殖细胞发生发育及养殖大黄鱼的育性控制的研究奠定了一定的基础。  相似文献   

日本囊对虾组织蛋白酶B基因的原核表达及纯化     

黄媛  王艺磊  张子平  岳亮  冯建军  郭松林  林鹏 《华中农业大学学报》2017,36(1):86-92

采用原核表达的方法得到日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶B基因的重组蛋白。以日本囊对虾卵巢组织为试验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增Cathepsin B的开放阅读框,并连接至表达质粒pGEX-4T-2中。将重组表达质粒导入大肠杆菌BL21中,在30℃条件下,用终浓度为1mmol/L的IPTG(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导5h得到最佳诱导量,His亲和柱进行纯化,纯化蛋白依次于8、6、4、2、1、0 mol/L尿素缓冲液中梯度透析,得到复性后可溶于水的重组蛋白,经SDS-PAGE检测,得到单一条带,其分子质量约为63ku。取冻干后的蛋白制备多克隆抗体,抗体效价达50 000,经Western blot检测,同样可在63ku处得到该条带,表明制备的组织蛋白酶B(CB)多克隆抗体具有特异性,该抗体可特异识别CB蛋白。  相似文献   

拟穴青蟹Sp-Sox14基因在胚胎发育和性腺发育过程中的表达     

梁可蓥  张子平  廖佳倩  邹志华  王艺磊 《水产学报》2018,42(2):204-215

为了解Sox14基因在拟穴青蟹胚胎发育和性腺发育过程中可能起到的调控作用,实验从青蟹性腺转录组数据库中得到全长为2558 bp的Sp-Sox14 c DNA序列,该序列编码一个包含427个氨基酸的蛋白,包含一个HMG-box。进化树分析表明,Sp-Sox14与其他节肢动物的Sox14亲缘关系较近。实时定量PCR结果显示,Sp-Sox14在成蟹雌雄各组织中均有不同程度的表达,其中在卵巢和雄蟹心脏中的表达量最高。在胚胎发育过程中,SpSox14在复眼色素形成期的表达量显著高于其他时期。在性腺不同发育阶段,Sp-Sox14在卵黄发生前期(O2)的表达量显著高于卵巢其他发育阶段;而在精巢发育过程中,其表达量在成熟精子期(T3)高于精母细胞期(T1)和精子细胞期(T2)。推测其参与卵巢的前期发育以及精子成熟等过程。整胚原位杂交结果显示,Sp-Sox14在青蟹胚胎复眼色素形成期阳性信号定位于头部以及鄂足附近,在近孵化期定位于复眼附近,幼体孵出期则在头部仍有少量信号,暗示其与青蟹神经器官的形成以及体节附肢的发生有关。  相似文献   

十足目甲壳动物性别控制与单性养殖研究进展     

陈仕海  靳雅琦  张子平  王艺磊 《中国水产科学》2024,31(1):106-127

十足目甲壳动物性别决定与分化途径有多种方式,其中多数表现出雌雄二态性模式。本文综述了十足目甲壳动物性别决定和分化分子调控机制的研究进展,总结了在其中发挥重要作用的眼柄、促雄腺等组织,以及IAG和dmrt等关键基因的功能,探讨通过激素诱导和RNA干扰技术等获得十足目甲壳动物单性群体的性别控制方案,以期为十足目甲壳动物性别控制深入研究和单性苗种养殖提供参考。  相似文献   

拟穴青蟹Spfox-1基因及调控其表达的lncRNA的鉴定与分析     

王晋珺偲  钟照威  张子平  王艺磊 《水产科学》2024,(3):352-362

为探究Spfox-1基因及存在靶向关系的lncRNA在拟穴青蟹性腺发育和幼体发育过程中的作用,从其成熟雌雄性腺转录组中得到开放阅读框全长为1410 bp的Spfox-1序列,该序列编码的蛋白包含1个RRM结构域,进一步预测获得1个可能与Spfox-1基因存在靶向关系的lncRNA HX26820。多重比较和进化树分析表明,Spfox-1的RRM结构域高度保守且与其他节肢动物的fox-1亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示：Spfox-1基因在成熟青蟹各组织器官中均有不同程度的表达,其中在卵巢和雄性脑神经节中表达量最高。在性腺不同发育阶段,Spfox-1基因在卵黄发生期的表达量显著高于卵巢其他发育阶段,而在精巢发育过程中,则表达量持续下降。在幼体不同发育过程中,Spfox-1基因的表达量从溞状幼体Ⅴ期到仔蟹Ⅰ期表达量呈逐渐上升趋势。lncRNA HX26820在卵巢发育过程中表达量持续下降,在幼体发育过程中只在溞状幼体Ⅴ期有较高的表达量。研究表明Spfox-1和lncRNA HX26820可能参与卵巢发育和幼体发育。过表达试验显示,lncRNA HX26820能够抑制Spfox-1基...  相似文献   

油茶果采收应适时     

张子平 《湖南林业》2008,(11):18-18

根据林业科技人员测试,不同油茶品种,采收时间不同,茶籽出油率截然不同。即使是同一油茶品种,在不同时间采收,出油率也大有差异。就拿油茶品种霜降籽来说,在“寒露”前10天采收,种壳占46．3％,种仁占53．7％,茶籽含油率只占17．9％：而在霜降后5天采收,种壳占37．6％,种仁占62．4％,茶籽含油率可达28.5％。宁乡县夏铎铺镇村民谭冠军承包的25亩油茶霜降籽,通过3年不同时间的采收,出油率比较明显。第一年计划作播种育苗,霜降后几天才采收了6担籽（后因育苗改变计划）榨油70公斤;  相似文献   

延伸林下经济产业链促进林农增收的几点思考     

于再君  张子平 《林业勘察设计》2015,(1):53-56

林下经济已成为我国林业产业的重要组成部分,林下多种经营模式迅速发展,但林业产业链尚未形成、产业发展规划明显滞后、各种形式的林业专业合作社核心作用没有正常发挥,需要搭建企业与林农的合作平台、挖掘和培育示范典型、因地制宜统筹规划、处理保护与开发相互协调关系,使林下经济真正成为带动区域经济发展和农民增收的新的增长点。  相似文献   

对中国农村剩余劳动力转移的思考     

张子平 《湖北农学院学报》2003,23(3):217-219,235

农村剩余劳动力转移是一个影响城乡的全局性问题，关系到农民生存和就业状况；是一个宝贵的人力资源能否得到有效配置的问题，决定农村人地矛盾是否缓解、农业现代化和农村现代化能否向前推进；是一个在中国现代化进程中能否实现全面小康的问题。  相似文献