两款恒温箱的气流组织模拟与实验验证     

张雷杰  张敏  杨乐  钟志友  徐曼 《安徽农业科学》2009,37(18)

引入了CFD软件对两款常见的恒温箱(上出风型和下出风型)做了气流组织模拟并进行了实验验证。模拟值与实验值能较好地吻合,最大绝对误差不超过0.04 m/s。结果显示:上出风型恒温箱由于其扰流强度较大,能很快地使待测品达到预定温度,而下出风型恒温箱的气流均匀性较上出风型好。  相似文献   

家蚕GATA转录因子BmGATA6的克隆、多克隆抗体制备及组织细胞定位     

谭鹏  徐曼  梁航华  张亚军  胡仁建  崔红娟 《中国农业科学》2016,49(2):371-380

【目的】克隆家蚕（Bombyx mori）GATA转录因子BmGATA6,将其在原核细胞中进行表达,纯化重组蛋白,多次免疫小鼠获得BmGATA6多克隆抗体,为进一步分析BmGATA6在家蚕变态发育中的功能提供抗体条件。【方法】解剖家蚕获得5龄第3天的各组织及4眠至熟蚕整个时期的中肠组织,在液氮中研磨为粉末,利用Trizol法提取RNA,体外反转录得到cDNA。基于家蚕BmGATA6的基因编码序列设计全长特异引物,并以BmActin3作为内参,进行家蚕5龄第3天各组织及4龄眠期至熟蚕期各时期的RT-PCR检测。设计原核表达引物,扩增原核表达片段连接到pET32a载体上,构建原核表达载体,转化至BL21(DE3) Escherichia coil表达菌株。加入IPTG至终浓度分别为0.4、0.6、0.8、1.0 mmol·L^-1。在16℃条件下培养20 h和37℃条件下培养5 h分别进行BmGATA6蛋白诱导表达。选取最佳诱导条件进行BmGATA6蛋白的大量诱导,用镍柱亲和层析法纯化家蚕BmGATA6蛋白,经多次免疫昆明小鼠后,最终获得BmGATA6多克隆抗体。利用ELISA法测定鼠抗BmGATA6蛋白多克隆抗体的效价,通过Western blot检测BmGATA6抗体的特异性。以家蚕5龄第6天中肠的石蜡切片作为样本,通过免疫荧光对家蚕中肠组织中的BmGATA6蛋白进行亚细胞定位。【结果】家蚕GATA转录因子BmGATA6的cDNA全长4 011 bp,ORF长为1 974 bp,编码657个氨基酸,包括205 bp的5′非翻译区序列（5′UTR）和1 832 bp的3′非翻译区序列（3′UTR）。该基因位于15号染色体上,基因全长12 326 bp,为多外显子基因,共含有8个外显子和7个内含子,具有2个典型的GATA锌指结构域,分别位于第470-521和531-582氨基酸区域。RT-PCR结果显示BmGATA6在5龄第3天家蚕中肠中显著高量表达,其次在马氏管中有少量表达,而在其他组织中没有检测到BmGATA6的表达。同时RT-PCR结果显示BmGATA6在4龄眠期到熟蚕期的中肠组织中持续高表达。构建BmGATA6 原核表达载体,通过不同温度与IPTG浓度诱导发现,BmGATA6重组蛋白在16℃诱导主要存在于上清中,在37℃诱导主要存在于包涵体中。在0.6 mmol·L^-1的IPTG、16℃下诱导20 h为最佳条件,利用镍柱亲和层析法获得较纯的BmGATA6重组蛋白,并利用纯蛋白多次免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,用ELISA法对抗体效价进行了检测,显示BmGATA6抗体效价均高达1﹕128 000。Western blot结果显示BmGATA6抗体能特异地识别家蚕BmGATA6蛋白,其大小约为75 kD,与预测大小相符。免疫荧光结果显示BmGATA6蛋白在家蚕中肠的各类细胞中均有较高表达,且定位于中肠细胞的细胞核中。【结论】成功制备了BmGATA6多克隆抗体,分析了其在中肠组织中的亚细胞定位情况,推测BmGATA6在家蚕中肠的生理变化过程中扮演着重要调控角色,为进一步探索BmGATA6在家蚕中的功能奠定了基础。  相似文献   

储存玉米中黄曲霉毒素主要产生菌的检测及污染预防研究     

刘增然  张光一  王南南  徐曼 《植物保护》2017,43(6):46-52

通过对储存玉米霉变初期的感官症状观察、分离菌的PCR检测及在不同环境条件下的生长预测模型建立,探讨了识别、预防储存玉米发生黄曲霉毒素及其主要产生菌污染的实用方法。结果表明:籽粒色泽及致密性改变、表面有潮湿感、粮堆内局部发热等症状的出现可表征储存玉米有可能发生真菌污染。以毒素合成相关的全局性调控因子veA基因为靶标,对污染玉米样品分离菌进行PCR检测,扩增出约1.9kb的条带,与预期大小相符,证明污染菌是黄曲霉或寄生曲霉。污染曲霉在不同玉米水分活度和环境温度下的生长数据,经Baranyi函数拟合、估测其最大生长速度,并建立了生长速度随玉米水分活度和环境温度变化的多项式回归模型;模型显示玉米水分活度和环境温度对污染曲霉的生长影响具有协同性;要确保储存玉米安全,储存参数的限值选择应远离适合污染菌生长的区域。本研究为储存玉米安全管理决策、玉米水分活度和环境温度限值的选择及调控提供支持,利于降低储存玉米的黄曲霉毒素及其主要产生曲霉(黄曲霉或寄生曲霉)的污染风险。  相似文献   

盐胁迫下水氮处理对小桐子生理特性的影响     

刘冰  杨启良  徐曼 《排灌机械工程学报》2018,36(8):679-684

为研究盐胁迫条件下不同水氮处理对小桐子幼树生理特性的影响,采用3个灌水水平(灌水处理的每次灌水量分别为T1:3.2 L/株,T2:5.4 L/株,T3:9.6 L/株),4个施氮水平(NZ:0 g,NL:10 g,NM:30 g,NH:50 g),共12个处理,6次重复,进行温室小区试验.结果表明:盐胁迫下适当增加灌水量可以有效提高小桐子的净光合速率;在盐胁迫且不施氮条件下,与T1相比T2和T3能促进小桐子的光合特性、叶水势增加;适宜的土壤水氮调控有助于增加小桐子的光合作用;在盐胁迫与灌水量相同处理条件下,与NZ相比,NL,NM,NH下的小桐子的光合作用显著,且叶水势减小.与T3NH比,T3NM的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、叶水势分别显著提高4.98%,6.01%,9.14%,22.97%.在盐胁迫下,有利于小桐子生理特性的最优处理是T3NM.  相似文献   

家蚕组织蛋白酶L(BmCathepsin L)基因鉴定、表达及其功能分析     

潘光照  张奎  李重阳  赵羽卒  申利  徐曼  苏晶晶  林西  崔红娟 《中国农业科学》2017,50(16):3236-3246

【目的】鉴定克隆家蚕组织蛋白酶L基因BmCathepsin L(BmCat L),分析其序列和表达特征。分析家蚕组织蛋白酶L在大肠杆菌诱导下m RNA表达量的变化趋势,为进一步研究家蚕组织蛋白酶L的功能打下基础。【方法】基于家蚕基因组数据库(Silk DB)中序列BGIBMGA006893设计引物,利用RACE技术克隆家蚕组织蛋白酶L基因的cDNA全长序列,通过在线工具对基因结构和蛋白质分子量及等电点进行预测;在NCBI数据库下载其他物种组织蛋白酶L同源序列,利用Clustalx(1.83)和MEGA 6.0软件进行同源比对并构建进化树。运用RT-PCR和qRT-PCR对其时空表达特征进行分析。选取该基因的特异性片段,经PCR扩增,测序验证后将其连接至pET-28载体,转化至Rosseta感受态表达菌株,经IPTG在适宜温度条件下诱导,获得组织蛋白酶L重组蛋白。然后再利用镍离子亲和层析法对该蛋白进行纯化,获得纯度较高的重组蛋白。最后利用大肠杆菌对家蚕血液系统进行攻毒,检测家蚕组织蛋白酶L基因的表达水平。【结果】通过查询家蚕基因组数据库和生物信息学分析得出,家蚕组织蛋白酶L基因定位于家蚕第10号染色体上,基因编号为BGIBMGA006893,nscaf2860。基因开放阅读框全长687 bp,编码228个氨基酸,含有保守的Pept_C1结构域。通过在线网站预测,得出该蛋白酶的分子量为26.132 k D,等电点为4.57。进化分析表明该基因与同为鳞翅目昆虫的草地贪夜蛾和黑脉金斑蝶亲缘关系最为接近。RT-PCR显示该基因集中表达于血细胞,在血液不同龄期也较高表达。用His抗体检测经纯化后的蛋白,最终成功孵育出纯化后的蛋白条带;大肠杆菌个体攻毒免疫试验检测显示,其mRNA表达水平随攻毒时间呈现抛物线式的显著性变化规律,从而揭示出BmCat L与家蚕免疫系统的关联性。【结论】克隆获得家蚕组织蛋白酶L基因的cDNA序列,发现其特异性高表达于血细胞。通过原核表达和蛋白纯化成功获得了该基因的重组蛋白。大肠杆菌的刺激能够显著上调其表达,推测组织蛋白酶L可能参与家蚕免疫反应。  相似文献   

现当代文学创作中茶文化的诠释     

徐曼 《福建茶叶》2022,(3):280-282

文学作品与生活实际的联系十分紧密,茶文化是我国传统文化中的重要组成部分,探究茶文化在现当代文学中的应用不仅可以重点探究茶文化的作用和价值,而且还可以提高文学作品的创作质量和水平.茶文化代表物质文明的同时也体现了精神文明,茶这一物质与文化的相互交融,促使茶文化的形成和发展,在众多的文学作品中都有表现茶文化的内容,茶文化在...  相似文献   

四种水泥发泡剂发泡效果评价     

苏海霆  吴奇泽  马倩  徐曼 《山东农业大学学报(自然科学版)》2020,51(3)

发泡水泥保温板作为近几年来兴起的无机保温材料,绿色环保,施工简单,耐火性能高,与建筑同寿命。但国内发泡剂市场鱼龙混杂,质量参差不齐,衡量发泡剂性能的标准不完善,因此进行本次实验选用了工程中应用较广泛的四种发泡剂,采用普通硅酸盐水泥作为主要胶凝材料,通过测试发泡水泥保温板的干密度、开孔情况、抗压强度和抗折强度性能,对四种常用发泡剂进行评价。结果表明不同类型的发泡剂对试件强度、密度性能指标有较大的影响,其中LG-2258不仅发泡效果明显,同时还兼具一定的抗压强度与抗折强度。通过此次研究表明,LG-2258发泡剂具有较高的性价比,实际工程中可以采用水泥:水:发泡剂为1:0.2:0.06来制备发泡水泥试件。  相似文献   

稻鱼生态种养技术及开发建议     

顾振华  邓正春  步洪凤  徐曼  张忠武  郑文凯  杜登科  曾祥林 《现代农业科技》2021,13(13)

本文总结了稻鱼生态种养技术,包括生产基地选择、基础设施建设、水稻种植与鱼养殖的技术要点,并提出了开发建议,以期为该技术模式的推广应用提供参考。  相似文献   

做好产地检疫工作的几项措施     

范军  徐曼 《养殖技术顾问》2009,(12):151-151

动物产地检疫是预防和控制重大动物疫病的重要措施之一,是做好其他检疫工作的基础.产地检疫能否有效实施,直接影响到畜牧业发展和畜产品质量安全,也是搞好整个动检工作的关键.同时,对保护人体健康,促进畜牧业健康、稳定、快速发展都有着非常重要的意义.因此我们要始终高度重视产地检疫工作,多措并举,常抓不懈,全面做好产地检疫工作.  相似文献   

‘奥斯特’北美冬青繁育技术   总被引：2，自引：0，他引：2  

余有祥  周正宝  徐曼昱  许绍远 《中国花卉园艺》2012,(14):32-35

“奥斯特”北美冬青（Ilexverticfllata‘Oosterwijk’）为冬青科冬青属多年生落叶灌木,株高120～250cm、冠幅80～250cm。叶互生、单叶、纸质、长卵形或卯状椭圆形、长椭圆形,叶缘有疏锯齿,网状脉,两面明显,嫩叶古铜色,叶绿色,表面无毛、背面略白且多毛;雌雄异株,花白色,复聚散花序,  相似文献