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301.
转录因子可有效调控植物次生代谢产物的生物合成,本研究从姜科药用植物阳春砂(Amomum villosum Lour.)中克隆获得两个WRKY转录因子基因,命名为AvWRKY 40-1和AvWRKY 40-2。两个基因的编码框分别为852 bp和885 bp,分别编码283和294个氨基酸。Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2编码的蛋白序列一致性为75%,在GenBank中均比对上拟南芥的WRKY 40,且均含有WRKY转录因子家族所共有的WRKKYGQK七肽序列及CX5CX23HNH锌指结构域。系统发育进化树表明:Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2与菠萝(Ananas comosus)的AcWRKY 71亲缘关系最近,且与单子叶植物的WRKY聚为一支。两个基因在阳春砂果皮和种子团中的表达有差异,并且与阳春砂转录组中筛选出来的萜类合酶基因表达相关性也存在差异,AvWRKY 40-1表现出与萜类合酶基因更高的相关性。成功构建了两个基因的重组表达载体pDEST 17-Av WRKY 40-1和pDEST 17-Av WRKY 40-2,经诱导表达得到其融合蛋白。本研究首次克隆阳春砂的WRKY类转录因子基因并获得其融合蛋白,为后续Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2的功能鉴定及其对萜类的代谢调控研究提供基础。 相似文献
302.
303.
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305.
【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基因为研究对象,首先靶向其编码区(coding sequence,CDS)序列设计并合成6条干扰和1条阴性对照shRNA,并构建表达载体pENTR-U6-shRNA。然后与载体psiCHECK-Ⅱ-SREBP1共转染293A细胞,筛选有效的pENTR-U6-shRNA。其次将筛选的pENTR-U6-shRNA和阴性对照pENTR-U6-NC分别与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST体外重组,得到腺病毒重组载体,并在293A细胞包装扩繁得到高滴度腺病毒,GFP标记法测定病毒滴度。最后将病毒侵染牛前体脂肪细胞,实时荧光定量法(qRT-PCR)检测干扰效率。【结果】筛选出靶向牛SREBP1基因干扰效率为87.4%的shRNA-1053。构建了pAd-1053和阴性对照pAd-NC重组腺病毒载体并包装得到Ad-1053和Ad-NC高滴度病毒,测定得到的病毒滴度分别为7×108 GFU•mL-1和9×108 GFU•mL-1。Ad-1053和Ad-NC分别侵染牛前体脂肪细胞,qRT-PCR检测结果显示Ad-1053可显著降低SREBP1基因的mRNA 水平(干扰率>85%),而Ad-NC对SREBP1基因表达无明显影响。【结论】成功筛选得到靶向干扰牛SREBP1基因的有效shRNA,并包装扩繁获得相应的高滴度重组病毒。 相似文献
306.
307.
为了了解硒化甘草多糖(SeGUP)对雏鸡抗炎活性的影响,试验采用脂多糖(LPS)建立雏鸡体内炎症模型,选取300只1日龄京红1号雏鸡,随机分为5组,分别为空白对照组、LPS组、LPS+黄芪多糖(APS)组、LPS+甘草多糖(GUP)组、LPS+硒化甘草多糖(SeGUP)组,除空白对照组外,各组试验鸡于8,10,12日龄腹腔注射LPS后,LPS+APS组、LPS+GUP组、LPS+SeGUP组分别肌肉注射给予浓度为1 mg/mL的APS、GUP、SeGUP,0.5 mL/只,连续7 d,分别于试验鸡18,25,32,39,46日龄每组选取10只,采用碳粒廓清法检测雏鸡巨噬细胞吞噬指数,用试剂盒检测雏鸡血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)和诱导型NO合酶(iNOS)含量。结果表明:与空白对照组比较,LPS组18,25,32,39,46日龄雏鸡巨噬细胞吞噬指数和血清中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、NO、iNOS含量均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+SeGUP... 相似文献
308.
为了研究团头鲂(Megalobrama amblycephala)TLR2(ma TLR2)在抗嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染中的作用,本实验克隆了ma TLR2基因的c DNA全长。结果显示:ma TLR2基因c DNA的全长包括2923 bp,编码792个氨基酸。预测得到的ma TLR2的结构域包括一个信号肽、氨基端的亮氨酸重复基序(LRRs)、跨膜结构域(TM)和一个胞内的Toll/白介素(IL)-1受体区(TIR)。在嗜水气单胞菌感染后,团头鲂头肾中,TLR2的表达量在6 h时显著升高。TLR2下游相关的炎症细胞因子TNF-α的表达量也显著上调。结果表明ma TLR2在嗜水气单胞菌感染团头鲂后的免疫应答中起到了重要作用。 相似文献
309.
为了完善月季评价体系,探究不同月季品种表型性状的遗传多样性,为后期选育和高效利用月季种质资源提供参考依据。调查和分析了50个不同月季品种的14个表型性状,统计和计算调查数据,并进行相关性分析和评价。结果表明:供试月季品种间表型性状有着不同程度的变异,7个表型性状的遗传多样性指数变化范围在1.54~4.34,变异系数变化范围在18.35%~65.93%,其中花类型变异系数最小,品种类型的变异系数最大。8个表型性状相关性分析中,花香和花类型呈显著正相关,花类型和叶形呈极显著正相关,嫩茎颜色和叶色呈显著负相关。主成分分析表明,前6个主成分的特征值均大于1,累计贡献率为71.09%。综上所述,红色系依然是主流色彩,浓香型品种是主要育种方向之一,50个供试月季品种中‘香槟酒’观赏性最高,‘白珍珠’观赏性最低。 相似文献
310.