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大豆抗营养因子测定方法的比较 总被引:3,自引:0,他引:3
大豆抗营养因子测定方法的比较贺英,霍贵成,张明鑫(东北农业大学动物营养研究所150030)(哈尔滨市大生饲料有限公司)生大豆中含有许多抗营养因子已成为共识,必须经过加热失活才能饲喂动物。然而加热过度又会引起一些氨基酸的破坏。例如,大豆过度加热时对赖氨... 相似文献
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表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV—VP2),用于重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,并为犬细小病毒病的诊断奠定基础。采用PCR方法对CPVVP2基因进行扩增,将CPVVP2基因克隆到毕赤酵母分泌表达载体pPICZAA中,构建真核重组表达载体pPICZAA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)X-33中,甲醇诱导表达CPVVP2,SDs_PAGE和Westernblotting鉴定表达蛋白。结果,成功扩增了CPV—VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZAA—VP2,在毕赤酵母菌中表达出约68000蛋白。Western—blotting鉴定表明,表达蛋白为目的蛋白VP2。表达菌株扩大表达体系于培养基中培养,上清液用70%过硫酸铵4℃沉淀浓缩,采用His选择镍-亲和层析柱分离纯化获得重组的酵母表达的带组氨酸标签的VP2蛋白,表达量约3mg/L。结果表明,在毕赤酵母中成功地表达了CPV—VP2蛋白,且能被犬细小病毒VP2单克隆抗体特异识别。 相似文献
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饲粮高铁对肉仔鸡十二指肠黏膜铁转运载体基因表达及组织微量元素含量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究饲粮铁含量对肉仔鸡组织重要微量元素铁、锰、铜、锌含量及十二指肠黏膜主要铁转运载体基因表达的影响,探讨铁对肉仔鸡微量元素吸收和代谢的影响及其机制。将336只1日龄商品代罗斯308肉公雏按照体重随机分成4个组,每组6个重复,每个重复14只鸡。对照组饲喂不额外添加铁的基础饲粮(实测铁含量为78 mg/kg),铁添加组分别饲喂以七水硫酸亚铁(FeSO_4·7H_2O)形式添加100、250或500 mg/kg铁的试验饲粮(实测铁含量分别为166、308和579 mg/kg)。试验期21 d。各组试鸡分别于7、14和21日龄屠宰分析肝脏、心脏、胰腺、十二指肠黏膜和胫骨灰中铁、锰、铜、锌含量及十二指肠黏膜中二价金属转运蛋白(DMT1)和膜铁转运蛋白(FPN1)mRNA表达水平。结果表明:1)500 mg/kg铁添加组1~7日龄和8~14日龄的平均日增重显著低于其他3组(P0.10),250和500 mg/kg铁添加组1~7日龄的平均日采食量显著低于其他2组(P0.10)。2)饲粮铁含量对肉仔鸡7、14、21日龄的血浆总铁结合力以及全血血红蛋白浓度(7日龄除外)和红细胞压积均无显著影响(P0.10),但显著影响7、14和21日龄血浆铁含量和铁饱和度(P0.10),二者均随饲粮铁含量增加而升高。3)7和14日龄心脏及7、14和21日龄肝脏、十二指肠黏膜、胰腺和胫骨灰铁含量均随饲粮铁含量的增加而升高,7、14和21日龄十二指肠黏膜、胰腺和胫骨灰锰含量均随饲粮铁含量的增加而降低;饲粮添加铁显著降低7日龄胰腺锌含量(P0.10),但对其他日龄胰腺和各日龄其他所测组织锌含量以及各日龄所测各组织铜含量均无显著影响(P0.10)。4)饲粮铁含量显著影响7、14和21日龄十二指肠黏膜DMT1和FPN1 mRNA表达水平(P0.10),各日龄DMT1和FPN1mRNA表达水平均随饲粮铁含量的增加而降低。以上结果提示,高铁饲粮可能通过调控十二指肠黏膜DMT1和FPN1基因的表达降低锰和锌在肠道的吸收,进而减少锰和锌在组织中的沉积。 相似文献
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将构建保存的重组表达质粒pET-ApxⅠ A、pET-ApxⅢA和pPRoAppOML-1用IPTG诱导表达,选择最佳的表达条件为IPTG 1.0 mmol/L,温度为37℃,表达时间为8 h,表达产物用SDS-PAGE鉴定,分别表达41、41、45 ku的蛋白,与预期蛋白大小一致.将表达产物用试剂盒进行纯化,得到较好的目的条带,并对其进行Western blot检测,经过分析,pET-ApxⅠ A、pET-ApxⅢA表达产物具有较好的免疫反应性. 相似文献