紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析     

康俊梅  张俏燕  蒋旭  王珍  张铁军  龙瑞才  崔会婷  杨青川 《中国农业科学》2020,53(2):247-260

【目的】鲨烯环氧酶（squalene epoxidases,SQE）是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶（MsSQE1）基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA₃条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯（MeJA）的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表达量最高,茎中次之,根中的表达量最低。在紫外辐射、ABA和GA₃的诱导表达显示,紫外辐射诱导24 h,叶中表达量最高; GA₃（50 μmol·L ^-1）和 ABA（100 μmol·L ^-1）处理,均为8 h叶中表达量最高;MeJA处理能诱导MsSQE1表达量上调的同时苜蓿总皂甙含量也随着MsSQE1表达的上调而增加。分析过表达MsSQE1转基因苜蓿和转空载体苜蓿株系发现,MsSQE1的表达水平和总皂甙含量均升高,其中MsSQE1的表达水平是对照的3.11—9.45倍,总皂甙含量比对照提高14.26%—28.05%,暗示MsSQE1是苜蓿皂甙合成途径中的一种关键调节酶。【结论】从豆科牧草紫花苜蓿中克隆了MsSQE1并进行功能分析。在苜蓿中过表达MsSQE1能增加苜蓿总皂甙含量,暗示MsSQE1的表达影响苜蓿皂甙的生物合成,可能对皂甙的合成有重要的调节作用。  相似文献   

农地转出行为是否会改变农民家庭的生计策略——基于CFPS微观数据的DID模型估计   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵立娟  康显超  邢骁 《中国农业大学学报》2020,25(7):205-212

在合理筛选控制变量和对农户生计策略类型进行细分的基础上,基于CFPS两期全国整合样本的面板数据,运用倍差法及倾向得分匹配倍差法,实证检验农地转出对农户生计策略产生的影响。结果表明:农地转出对农户采取农业型和农兼型生计策略产生了显著负向作用,对非农型生计策略的选择具有正向推动作用,而对兼农型生计策略的影响效应有限,没有通过显著性检验,说明农户可以通过调整自家的生计策略适应农地转出所引起的变化。另外,通过多种匹配方法对估计结果进行检验,证实估计结果具有稳定性和可靠性。建议今后在尊重农民意愿的基础上,加大对农地流转政策的支持力度。依据不同类型家庭的实际需求,为农户制定适宜自身发展的差异化鼓励政策,带动发展具有当地特色且真正属于农民自己的非农“产业”,实现农地转出户生计的可持续发展。  相似文献   

日光温室黄瓜菇渣型复合基质栽培技术规程     

田东良  康欣娜  冯兵伟  靳青 《河北农业科学》2020,24(1):33-35,42

《日光温室黄瓜菇渣型复合基质栽培技术规程》(DB 1301/T 315—2019)对日光温室黄瓜菇渣型复合基质栽培的产地环境、设施条件、栽培前准备、种植模式、育苗、定植、栽培管理、病虫害防治、采收等进行了规范,可为石家庄市日光温室黄瓜菇渣型复合基质栽培提供生产技术指导。  相似文献   

StBAG3基因介导的马铃薯对晚疫病抗性研究     

侯丁一  张晓萝  康立茹  赵君  张之为 《华北农学报》2020,35(3):193-199

为了探究来源于马铃薯中的StBAG3基因在马铃薯抗性建立过程中可能具有的功能,以夏坡蒂马铃薯的离体叶片为试验材料,利用马铃薯的瞬时表达体系对StBAG3基因的功能进行了初步的研究。结果表明,在瞬时表达StBAG3基因的马铃薯离体叶片上人工接种马铃薯晚疫病菌,24,48,72,96 h后接种位置病斑的相对面积较对照病斑显著减少了1.92～39.15百分点,说明瞬时表达StBAG3基因后显著提高了马铃薯对晚疫病菌的抗性水平。这一结果也从对接种部位坏死细胞的染色中得到了证实。H_2O_2定性和定量测定的结果表明,瞬时表达StBAG3基因后接种部位H_20_2积累量在接种后0～48 h差异不显著,接种后72,96 h与对照差异显著,二者均在72 h达到最大值,分别为0.146,0.086μmol/g。ROS清除酶活性测定的结果表明,接种后瞬时表达StBAG3基因部位SOD和CAT的活性随着接种时间推移,变化的模式有所差异,但二者在0～96 h均高于对照叶片,而POD的活性在接种后0～72 h与对照叶片没有显著差异,仅在接种后96 h显著高于对照叶片,间接证明了H_2O_2参与了StBAG3基因介导的正向调控马铃薯对晚疫病的抗性建立过程。由此可见,StBAG3基因能够提高马铃薯对晚疫病的抗性水平。  相似文献   

鹰嘴豆短肽的分步酶解法制备及其营养价值评价     

叶健明  石宁蕙  杨群慧  苏丽明  周建中  杨海燕 《保鲜与加工》2020,20(1):140-148

以鹰嘴豆蛋白为原料,建立复合酶分步酶解法制备鹰嘴豆短肽的工艺。在鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解的基础上,进一步采用中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme继续水解鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase酶解物,并对各影响因素进行研究,建立短肽得率与各影响因素的回归模型,利用高效液相色谱法和氨基酸自动分析仪等测定鹰嘴豆短肽的相对分子质量、氨基酸组成、一般营养成分,评价鹰嘴豆短肽的营养价值。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme制备鹰嘴豆短肽的最佳工艺参数为:复合酶添加量5 678 U/g,pH 7.0,水解时间216 min,水解温度55℃,在此条件下,短肽得率为63.79%,与碱性蛋白酶Alcalase单独酶解相比明显提高,水解度为26.74%;大部分水解产物的相对分子质量低于1 000、脂肪含量低,蛋白质、必需氨基酸等含量丰富,与FAO/WHO推荐的成人需求量模式相比,其第一限制氨基酸是蛋氨酸和半胱氨酸,与学龄儿童需求量模式相比,其第一限制氨基酸是苏氨酸,氨基酸分分别高达138.18和103.25;必需氨基酸与非必需氨基酸比值(EAA/NEAA)为0.73,接近FAO/WHO参考标准值0.6。该研究为进一步开发利用和工业化生产鹰嘴豆短肽奠定了基础。  相似文献   

2BM-4型藜麦覆膜精量播种机设计与试验     

王小瑜  康建明  丁汉凤  彭强吉  张春艳  李娜娜 《农业机械学报》2020,51(12):86-94

针对目前国内缺乏藜麦专用播种机械的现状,设计了一种藜麦覆膜精量播种机。根据藜麦覆膜精量种植农艺要求,采用滴灌管浅埋开沟技术,使用滑刀式开沟器在两侧种行间开出宽45mm、深20mm的浅沟,用于埋设滴灌管;采用随动仿形覆膜装置将地膜铺设于整平装置整平后的地表上;设计了翼勺式取种器,确定了种勺结构和侧孔、容种腔的长度,以实现藜麦精量取种;采用滚筒式穴播器在地膜上打穴播种,采用覆土装置将土壤输送至种行进行覆盖,完成播种过程。以白藜品种“陇藜1号”为试验对象,采用三因素四水平正交试验设计方法,试验分析播种机的作业速度、侧孔长度、充种高度对播种性能的影响。结果表明,当播种机作业速度为1.0m/s、侧孔长度为10mm、充种高度140mm时,播种机性能指标最佳,此时合格指数为85.4%,空穴指数为1.7%,漏播指数为5.2%,重播指数为9.4%,播深合格指数为88.1%,各项性能指标均达到了设计要求和相关标准要求,满足藜麦种植的覆膜精量播种要求。  相似文献   

不同饲养方式对固始鸡蛋品质的影响研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

石建州  康相涛  孙桂荣  李国喜  韩瑞丽  李效法  李朝云  秦召 《广东农业科学》2006,(2):69-71

对固始鸡笼养和放牧饲养条件下蛋品质研究结果表明:笼养和放养对蛋重和蛋壳厚影响显著(P<0.05),对蛋黄重、蛋壳重、蛋黄含量占全蛋比例、蛋白和蛋黄的粗脂肪含量、蛋白和蛋黄的粗蛋白含量等指标的影响均不显著。  相似文献   

不同盐浓度对芨芨草种子萌发过程中几种生理指标的影响   总被引：14，自引：1，他引：13  

王果平  康喜亮  陶锦  陈韩飞  阎平 《干旱地区农业研究》2006,24(2):139-142

不同浓度的N aC l处理芨芨草种子后,通过研究其萌发过程中淀粉酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性以及可溶性糖含量的变化。结果表明:N aC l处理下芨芨草种子萌发过程中超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性与对照相比均上升,且呈现双峰曲线的变化趋势。而淀粉酶活性、可溶性糖含量与对照相比均下降,并与N aC l处理浓度呈负相关。  相似文献   

喷灌条件下作物光合作用及生长的研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

姚素梅  康跃虎 《干旱地区农业研究》2006,24(1):199-204

就国内外有关喷灌条件下作物光合作用及生长的研究成果进行了分析和评述,讨论了喷灌条件下作物的生态、生理因子之间的相互关系以及对农田小气候变化的适应机制,指出了该领域研究中存在的问题和今后应加强的研究方向。  相似文献   

浅议高职院校开展研究性学习及对教师的要求     

梁珠民  甘海燕 《广西农学报》2006,21(6):55-57

在高职院校中开展研究性学习,明确研究性学习的内涵,并对教师提出具体的要求,对推动高职院校的教育教学改革不断向纵深发展,促进培养具有创新精神和较强的实践能力,适应生产、建设、管理、服务第一线需要,德、智、体、美等方面全面发展的高等技术应用性专门人才具有重要的现实意义.  相似文献