不同禽鸟类传染性法氏囊病病毒分离物核酸及结构蛋白的比较     

王永山  周宗安  顾志香  张建昌  罗函禄  丁铲 《中国预防兽医学报》1998,(3)

将从鸡、鸭和麻雀体内分离到的ＩＢＤＶ用ＳＰＦ鸡胚增殖,采用氯仿抽提、聚乙二醇沉淀和蔗糖密度梯度离心的方法纯化病毒,鉴定结果表明,这种方法可有效地将病毒与杂蛋白分开。用异硫氰酸胍－酚－氯仿－抽提一步法提取病毒ＲＮＡ,电泳分析表明,三种ＩＢＤＶ均由双节段ＲＮＡ组成,大、小基因片段的电泳迁移率毒株间无差异。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,各ＩＢＤＶ的结构蛋白带谱相同,但各蛋白带的相对百分含量有差异,表明这些不同ＩＢＤＶ分离株的同源性和变异。本文还对ＩＢＤＶ的纯化和变异进行了讨论。  相似文献   

基因重组抗原酶联免疫法检测兔出血症病毒抗体及其标准化   总被引：2，自引：0，他引：2  

王永山  陆承平  周宗安  陈兴祥 《中国兽医学报》2004,24(3):233-235,239

以重组兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白为抗原，建立了RHDV抗体间接ELISA检测方法。优化的试验反应务件为：重组VP60的包被质量浓度为1．0mg／L，用10％牛血清封闭，以大肠杆菌提取物稀释被检血清以消除非特异性反应。将所建立的ELISA与现行血凝抑制(HI)试验比较发现，不同免疫状态的兔血清的RHDV ELISA抗体与HI抗体均呈正相关。对11个RHD免疫兔场1130份血清样品的抗体检测表明，各免疫兔群血清RHDV抗体水平不完全一致，D值在1．09～1．76之间，显著高于非免疫兔(0．05)及SPF兔(0．02)，低于高免兔(2．34)。在此基础上，研制了RHDV抗体酶联免疫检测试剂盒，测定了其主要指标，制定了各成分的质量控制标准，为兔群进行免疫学监测及评价疫苗的免疫效果提供了便利。  相似文献   

指状腹腔丝虫微丝蚴在中华按蚊体内发育过程中的形态学观察     

周宗安  邹明玉  梅峰 《畜牧与兽医》1985,(3)

<正> 指状腹腔丝虫的幼虫是马、羊脑脊髓丝虫病的主要病原,中华按蚊是其主要传播媒介。我们在对福建省马脑脊髓丝虫病病原终宿主及其传播媒介调查研究的基础上,1978年对指状腹腔丝虫微丝蚴及其在中华按蚊体内发育过程中的形态进行了观察,以期通过观察获得指状腹腔丝虫微丝蚴及其在中华按蚊体内发  相似文献   

马脑脊髓丝虫病传播媒介调查     

周宗安  邓仁生  韩高钗  余昌益  黄洛清  邵洲双 《中国兽医杂志》1983,(4)

为了解福建省马脑脊髓丝虫病的传播媒介,在普查病源牛的基础上,1974年我们选择该病发病率高的福建省厦门市灌口和未见发生典型马脑脊髓丝虫病的南靖县和溪,对马厩、牛舍的吸血蚊类进行了解剖调查,并于1974、1975年在福建省连江县山边和福州市梅峰进行了诱蚊试验观察。现将调查结果报告如下。一、调查1.调查方法:每月上、中、  相似文献   

不同传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP2表达差异性分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王永山  周宗安  张建昌  刁振宇  高健  邓小昭  罗函禄 《中国预防兽医学报》2001,23(4):252-254

将在不同时间、地域从传染性法氏囊病（IBD）发病鸡群中获得的15个IBDV株分别用SPF鸡、鸡胚和鸡胚成纤维细胞增殖，经氯仿处理后，采用聚乙二醇沉淀、超速离心和不边疆蔗糖密度梯度离心的方法纯化病毒，检测表明，病毒主要分布于40%蔗糖层，对纯化病毒进行SDS-PAGE分析，结果显示，病毒结构蛋白VP2在不同毒株表达量有较大差异。本实验为IB-DV主要保护性抗原VP2高表达疫苗的研究奠定了基础。  相似文献   

猪瘟病毒单克隆抗体的研制和应用Ⅰ.抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定     

周宗安  刘劲松  房德兴  顾志香  王元伦 《中国兽医学报》1989,(3)

以聚乙二醇(PEG,MW6000)沉淀法部分纯化的猪瘟兔化弱毒中国株(SFV-C)免疫BALB/C小鼠,取其脾脏制备脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测和有限稀释法克隆化筛选出9株对SFV特异的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞。它们产生的McAb仅对SFV-C株发生特异性反应,而与SFV-S及BV DV Oregon株不发生反应.相加试验表明,9个McAb分别针对不同的抗原决定簇。所有的McAb均不具有沉淀反应特性。  相似文献   

鸭自然感染传染性法氏囊病病毒的调查     

王永山  周宗安  翟春生  罗函禄  丁铲  方元 《中国预防兽医学报》1997,(5)

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ试验对采自三种不同鸭群的３８０份血清进行ＩＢＤＶ抗体检测，抗体阳性率分别为，农村散养鸭１００％，农场圈养鸭２９．９％，市场贩运鸭９５．４％，总阳性率为９５．５％，抗体效价为１２～１０４。这一结果不仅表明在我国ＩＢＤＶ传染已到了非常高的程度，而且揭示了鸭在ＩＢＤ病原生态和传播中可能起重要作用。  相似文献   

用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原     

刘劲松  房德兴  王元伦  顾志香  周宗安 《中国预防兽医学报》1992,(6)

用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9％;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性.  相似文献   

鸡病毒性关节炎弱毒苗的研制 Ⅱ.弱毒株的免疫原性     

唐雨德  周宗安  翟春生  王元伦  顾志香 《中国兽医学报》1994,(3)

应用具有良好安全性的鸡病毒性关节炎病毒（AVAV）弱毒JN-1株免疫1日龄肉鸡40只,分别用琼脂扩散试验、间接ELISA和中和试验（NT）检测免疫鸡血清中的AVAV抗体。中和抗体于免疫后7d开始出现,14d后全部阳转;ELISA抗体也于免疫后7d开始显示阳性,21d后全部阳转;琼脂扩散抗体于免疫后14d开始阳转,28d以后全部显示阳性。分别在免疫后7、14、21和 28d于足掌皮下用强毒攻击免疫鸡,临床保护率分别为2/10、9/10、10/ 10、10/10,病理保护率分别为0/10、7/10、9/10、10/10。体外抗病毒谱试验显示,弱毒株的免疫血清能中和AVAV J-1株、S_(1133)株、FDO株和H_(9307)株。上述实验结果表明,AVAV弱毒株具有良好的免疫原性。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒抗原表位分析--单克隆抗体的制备与鉴定   总被引：3，自引：1，他引：3  

王军  李银  范红结  周宗安  施正良  王永山 《中国预防兽医学报》2005,27(3):171-174

将传染性法氏囊病病毒(IBDV)分离毒株ZB和TA3的细胞培养物采用不连续蔗糖密度梯度离心的方法浓缩纯化病毒,免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,建立了6株分泌抗IBDV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系1C1、1E6、2B2、2G8、3A2、3E2。间接ELISA测定,杂交瘤细胞培养上清液的抗体效价为102,诱生腹水的抗体效价为106～107。相加ELISA分析,这6株单克隆抗体对应不同的病毒抗原表位。中和试验结果表明,2G8对病毒有较强的中和能力,腹水的中和效价为105。用2B1和3E2配对建立的夹心ELISA可特异地检测IB DV。  相似文献