猪瘟病毒E2蛋白部分抗原区基因在原核系统的分泌表达与鉴定     

周顺  李俊  温建新 《中国动物检疫》2010,27(8):24-26,44

基于猪瘟病毒主要保护性抗原E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位B/C抗原区和A/D抗原区,根据GeneBank中猪瘟病毒B/C基因核苷酸序列设计合成一对引物,经RT-PCR扩增猪瘟病毒B/C基因。将扩增所得猪瘟病毒B/C基因克隆于PMD18-T载体,然后定向亚克隆猪瘟病毒B/C基因至原核表达载体PET30(a)的多克隆位点中,经酶切鉴定后,将含有B/C基因的重组质粒命名为PETB/C。用PETB/C转化受体菌BL21,挑取单个菌落,用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间收集样品。经SDS-PAGE电泳分析证实B/C基因获得了表达,并在终浓度为1mM的IPTG,诱导6h其表达达到高峰,经Western-blot分析证实表达的重组B/C蛋白具有反应活性,大小约为9KD。用表达产物作ELISA,结果表明表达产物与猪瘟病毒抗血清可发生明显的反应,而与其它8种疫病阳性血清不发生反应。正常菌体蛋白与猪瘟病毒阳性血清也不发生反应。通过对58份送检血清样品的检测结果显示其与Dot-ELISA的相符率高达95%以上。试验证明利用原核表达系统制备的重组蛋白作为诊断用抗原,为研究亚单位疫苗或诊断抗原打下坚实基础。  相似文献   

烤烟烟叶元素组成及其燃烧热解特性差异分析     

陈新  郭东锋  周顺  王孝峰  张亚平  何庆  佘世科  田振峰 《安徽农业大学学报》2016,43(1):160-164

为了探索烤烟烟叶中元素含量及其燃烧热解特性的差异,收集了全国主要植烟区域34份烤烟样品,运用统计学方差分析方法对采集的样品进行了统计分析。结果表明:(1)烟叶中大部分元素在广泛变异,区域间的钾、氧、硫和氯4种元素存在显著差异,部位间碳、氢、氮和钾存在显著差异,品种间则主要是氧元素存在显著差异;(2)烟叶的燃烧热解特性则主要表现为部位间总燃烧热释放量和烟气密度的差异,且表现出自上而下的规律性。因此,在烟叶生产、生态研究、区域烟叶质量评价等工作中,可借助烟叶元素及其燃烧热解特性的差异来开展相关技术研究和应用。  相似文献   

山东规模化猪场猪流感（H1N1亚型）血清流行病学调查     

黄秉政  孙文博  殷斌  杜以军  李俊  吴家强  于江  周顺 《中国动物检疫》2014,31(6):55-57

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温度、二氧化碳和营养液耦合对甜瓜幼苗生长的效应分析          下载免费PDF全文

张冠智  李洋  徐鹏  周顺  马丽媛  李艳  武永军  杨振超 《中国农业大学学报》2023,28(6):135-145

为解析环境因子耦合对甜瓜幼苗的影响，实现温室甜瓜环境的精准化管理，以白天空气温度、CO₂浓度和营养液浓度为调控因子，采用三因子五水平通用旋转组合设计，引入因子分析法对6个生长指标(总鲜重、总干重、净光合速率、壮苗指数、叶面积和叶绿素含量)提取公因子，将所得公因子作为幼苗综合评价指标。根据评价值拟合甜瓜幼苗综合生长对环境多因素的响应模型，分析环境因素的协同调节作用。结果表明:模型的决定系数(R²)为0.944，均方根误差(RMSE)为0.07，拟合效果较好。在试验范围内，白天空气温度对甜瓜幼苗的影响大于CO₂浓度和营养液浓度的影响。甜瓜幼苗综合评价值随CO₂浓度和营养液浓度的升高呈先升高后降低趋势，随温度的升高而升高。甜瓜幼苗综合生长的最佳环境因子区间为白天空气温度33 ℃~35 ℃、CO₂浓度1 043~1 408 μmol/mol和营养液浓度2.0~2.9 mS/cm。本研究可为甜瓜幼苗环境调控优化提供决策支持。  相似文献   

1株克氏原螯虾肺炎克雷伯菌的分离鉴定及药物敏感性分析     

董靖  张露珊  刘绍春  张国栋  周顺  杨秋红  艾晓辉 《华中农业大学学报》2021,40(1):93-98

从湖北潜江患病克氏原螯虾肝胰腺内分离到1株致病菌,经过生理生化特征测定、16S rRNA序列分析和进化树构建对该菌株进行鉴定,并通过琼脂扩散法检测该分离株的药物敏感性,通过肉汤微量稀释法测定抗菌药物的最小抑菌浓度.结果发现,该菌株具有与肺炎克雷伯菌一致的生理生化特征,16 S rRNA测序和进化树分析发现该分离株与肺炎...  相似文献