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为获得能在肌肉表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼(Brachydaniorerio),采用PCR方法,从斑马鱼基因组DNA中分离了肌球蛋白轻链2启动子,序列分析表明,该启动子与国外文献报道的斑马鱼肌球蛋白轻链2启动子序列的相似性为98.6%。将改造后的启动子插入绿色荧光蛋白基因载体,构建成肌肉特异性表达载体。通过显微注射,将线性化的表达载体注入斑马鱼的受精卵,获得了转绿色荧光蛋白基因的斑马鱼。绿色荧光蛋白在胚胎期开始表达,随着鱼体的生长表达量有增加的趋势,成鱼在紫外灯下用肉眼即可观察到绿色荧光。转基因鱼绿色荧光蛋白的表达具有明显的肌肉特异性。本研究为下一步特定基因的表达研究和获得有特色的转基因观赏鱼奠定了基础。 相似文献
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珠江流域不同江段鲮鱼遗传差异研究 总被引:15,自引:0,他引:15
利用随机扩增多态性DNA技术开展了珠江流域不同江段鲮鱼(Cirrhinamolitorella)遗传差性研究,23个10bp的引物随机扩增58尾鲮鱼得到98个片断,多态性DNA片断为35个,总的多态百分率为35.7%,野生种群的多态性较池养种群多,野生种群中北江多态性最小为25.5%,西江梧州段最大为29.6%,各多态片断具有不同的出现频率.种群内相似率大小依次为北江、西江与东江,池养种群;种群内遗传距离最小为北江,种群间最小为北江-珠江所池养,大小分别为0.063,0.161.研究表明东江和西江分化指数较大,而北江和池养较小,对各江段分化指数DC与PDC进行t检验,发现tDC=2.3277<t0.05(4)=2.776,tPDC=1.2833<t0.05(9)=2.262,说明不同江段鲮种群间与种群内遗传差异水平均不大. 相似文献
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鱼类卵细胞质对胚胎发育速度的调控 总被引:1,自引:0,他引:1
观察金鱼、大鳞副泥鳅自交组和其正反杂交组的胚胎发育速度,证实是由细胞质因子调控的。 相似文献
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采用高保真PCR技术从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组中分离了β-肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析显示该片段包括长为1643bp的β-肌动蛋白(β-actin)基因5,端侧翼区的启动调控区和90bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为108bp的β-actin基因上游调控序列、β-actin基因不翻译的第一个外显子和第一个内含子。上游调控序列中含有与转录活性密切相关的作用元件:CAAT Box,TATA Box和CArG Box,分别位于转录起始位点上游的-92,-29,-62处。将尼罗罗非鱼β-actin基因的启动调控区定向克隆到不含启动子的红色荧光表达载体pDsRed2-1中,构建了重组荧光表达载体。重组载体经EcoRⅠ线性化后,采用显微注射技术将其注射到唐鱼的受精卵中,利用荧光显微镜观察外源基因增强型红色荧光蛋白基因(DsRed2)在唐鱼中的表达。结果表明在荧光显微镜下以及普通解剖镜下均可观察到红色荧光,说明本实验分离到的罗非鱼β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能。该实验为下一步进行转自源基因尼罗罗非鱼的研究奠定了基础。 相似文献
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