萝卜胞质雄性不育正常花蕾与败育花蕾DD-PCR及EST序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

贾晋  张鲁刚 《核农学报》2008,22(4):426-431

提取了萝卜雄性不育系BT-18败育花蕾和正常花蕾的DNA,并且采用DD-PCR技术研究了败育花蕾与正常花蕾的mRNA差异表达。败育花蕾DNA表现有规则的Ladder,而正常花蕾只有单一DNA条带,该结果为萝卜败蕾发生了细胞程序化死亡提供了生化证据;DD-PCR得到107个差异表达片段,其中败育花蕾差异表达片段94个,正常花蕾差异表达片段13个。BLAST结果显示,与功能蛋白同源的差异序列50%以上来源于叶绿体,推测萝卜败蕾与叶绿体有很大关系;叶绿体Mat K在不同的引物组合扩增中出现3次,序列分析后发现长度为282bp和283bp的为同一片段,长度为396bp的片段与长度为282bp和283bp的片段无同源性,可能为编码Mat K的不同亚基。Mat K参与叶绿体中RNA转录本Ⅱ型内含子剪切,通过对内含子剪接的影响来调节基因的表达,推测Mat K等叶绿体基因上调表达使其蛋白质的合成发生变化,导致萝卜叶绿体代谢紊乱,最终导致败蕾;而甲基转移酶可能通过DNA甲基化调控萝卜发育,使其发育异常表现花蕾败育。对BLASTx比对分值小于80及无同源性的片段进行BLASTn分析,根据比对结果推测:细胞程序化死亡可能是萝卜败蕾、植物衰老和植物受逆境胁迫时普遍发生的一种生理生化现象。  相似文献   

大白菜雄性育性转化相关β-酯酶同功酶双向电泳分析     

张少丽  张鲁刚  张明科 《园艺学报》2008,35(5):681-686

以大白菜温敏雄性不育系TsCMS7311(A)及其保持系7311(B)的小花蕾（长度大约1.5㎜）为材料,活性凝胶电泳分析发现：β-酯酶同功酶与育性转化关系密切,正常不育系比保持系缺少迁移率为0.683、0.718和0.742的3条酶带;随着育性的转化,酶谱接近保持系带型;当育性回复到正常的不育状态时,其同功酶酶谱也随之回复到正常的不育系带型。在低温处理后的不育系TsCMS7311(A^T)育性转化期间,回收与雄性育性转化相关的β-酯酶带区,双向凝胶电泳分析,结果表明,保持系B和转化后的不育系A^T的双向电泳图谱相似,第一向IEF电泳中各获得了两条特异谱带,等电点在7.7附近;第二向SDS电泳中各得到了6种β-酯酶多肽,分子量在55～62 kD之间。  相似文献   

芥蓝种质资源营养成分及商品性评价   总被引：3，自引：0，他引：3  

张静  张鲁刚  张玉 《中国蔬菜》2009,1(16):41-44

对13份芥蓝种质资源的部分营养成分进行测定及评价,并进行相关性分析。结果表明:VC含量变化范围为0.80～1.41 mg·g^-1（FW）;类胡萝卜素最高含量为0.016 6 mg·g^-1（FW）;还原糖含量变化范围为2.85～8.17 mg·g^-1（DW）;可溶性糖含量变化范围为12.38～23.80 mg·g^-1（DW）;13份芥蓝的蛋白质含量较低,粗纤维含量中等,材料间差异不大。商品性评价结果表明：风味最好的是Ba17,质地最好的是Ba35,外观最好的是Ba25和Ba44。相关性分析表明：还原糖含量与可溶性糖含量呈极显著正相关,与甜味呈显著正相关,与蛋白质含量、类胡萝卜素含量、鲜味呈显著负相关;蛋白质含量与可溶性糖含量呈极显著负相关;鲜味与甜味、VC含量与可溶性糖含量呈显著负相关;脆度与纤维感呈显著正相关,且与其他性状没有显著相关关系;粗纤维含量与纤维感、脆度没有相关性。  相似文献   

橙色大白菜原生质体的游离和纯化     

武云霞  张鲁刚  张华敏  付文婷  胥宇建  关清华 《北方园艺》2009,(10)

以橙色大白菜金冠2号为试材,就其子叶及下胚轴原生质体游离、纯化方法及影响因素等进行了研究.结果表明:适宜金冠2号子叶原生质体游离的条件为CPW+DPD培养基+0.8%纤维素酶R-10+0.1%离析酶R-10+0.5 mol/L甘露醇+10 mM CaCl2·2H2O+0.7 mMKH2PO4+0.1% MES,酶解温度27℃,酶解时间2 h,产量达3.52×106个/g·FW,活力60.3%;适宜金冠2号下胚轴原生质体游离的条件为CPW+DPD培养基+1.5%纤雏素酶R-10+0.3%离析酶R.10+0.5 mol/L甘露醇+10 mM CaCl2·2 H2O+0.7 mM KH2PO4+0.1% MES,酶解时间18 h,产量达2.20×106个/(g·FW),活力63.7%.而且以21%蔗糖,800 rpm等密度梯度法离心5min纯化原生质体效果最佳.  相似文献   

大白菜与结球甘蓝种间异源多倍体的鉴定     

郭晓芹  仪泽会  惠麦侠  张鲁刚  张明科  卢有飞 《农业生物技术学报》2012,20(10):1150-1158

利用异源多倍体作为桥梁材料是克服远缘杂交障碍,创制新种质和进行品种改良的一种重要途径.本研究对已获得的大白菜(Brassica campestrisL.ssp.pekinensis (Lour.) Olsson)与结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)种间异源四倍体和异源三倍体,利用形态学、解剖学、分子标记及细胞学等方法进行比较鉴定.研究表明,多倍体在植株形态、花器官和气孔大小等方面均表现出巨大性和超亲优势,其中四倍体比三倍体表现普遍更明显.多倍体的气孔密度显著的低于双亲.多倍体花粉生活力比双亲降低,四倍体花粉活力为81.56％,三倍体的花粉活力仅有18.78％.多倍体自交结实性明显低于双亲,四倍体自交结实率仅为0.28％;四倍体作为母本与大白菜杂交结籽率比其反交要高,是反交的2.11倍,以三倍体为母本或父本时与大白菜杂交,结实均非常低,且三倍体自交未获得种子.相关序列扩增多态性(SRAP)标记结果表明,多倍体中包含了双亲的遗传信息,但分f标记并不能区分四倍体与三倍体.细胞学观察显示,四倍体的染色体数目为2n=4x=38,三倍体的染色体数目为2n=3x=29.大白菜-结球甘蓝异源多倍体的鉴定为进一步大白菜品种改良和新种质的创制提供了基础资料.  相似文献   

白菜叶缘裂刻近等基因系的cDNA-AFLP分析及SCAR标记的转化   总被引：3，自引：0，他引：3  

惠麦侠  王晗  张鲁刚  何玉科 《中国农业科学》2010,43(21)

【目的】寻找与白菜叶缘裂刻发育相关的表达基因,了解叶缘裂刻调控的分子机理。【方法】应用cDNA-AFLP技术从mRNA表达水平研究白菜叶全缘和裂刻近等基因系间基因表达的差异。【结果】共获得57条差异片段,合并归属于55条非重复序列,其中在叶全缘株系中增强或特异表达的有25条,叶裂刻株系中增强或特异表达的有30条。54条差异片段可以在NCBI数据库中找到同源序列(包括EST)、其中42条为已知基因,1条没有找到同源序列。按照其参与的生物学途径归类,已知基因片段参与了代谢、转录、细胞囊泡运输、蛋白质合成和降解、蛋白质储藏与运输、信号传导、光合系统、基因转座等相关过程。用AFLP转化的SCAR标记在分离群体上验证结果表明,SEL7B16-SCAR检测片段的表达模式与cDNA-AFLP结果一致。【结论】构建了白菜叶缘裂刻发育调控基因表达谱,识别了与已知NAC036、DP-2、MYB77、TCP24参与调控裂刻发生基因密切相关的片段。基于cDNA-AFLP特异序列,开发了1条与裂刻紧密连锁的SCAR标记,命名为SEL7B16-SCAR,可用于裂叶纯合和杂合的分子辅助选择。  相似文献   

细胞质雄性不育相关基因orf224的克隆及其植物表达载体的构建   总被引：12，自引：0，他引：12  

王永飞  马三梅  张鲁刚 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2002,30(4):9-12

利用 PCR技术从油菜 Polim a不育系中扩增出细胞质雄性不育相关基因 orf 2 2 4 ,并将其克隆到p GEM- T Easy载体上得到重组质粒 p GEMORF。在此基础上 ,用限制性内切酶将 orf 2 2 4基因从质粒 p GEMORF上切下 ,连接在 p BI12 1质粒的 Ca MV 35 S启动子和 NOS终止子之间。经 PCR和酶切鉴定 ,得到了 orf 2 2 4基因的植物表达载体 p BIORF  相似文献   

甜瓜种资源的R型聚类分析及典型相关分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

张鲁刚  王鸣 《中国西瓜甜瓜》1991,(1):13-21

  相似文献   

麦饭石对大白菜种子萌发及幼苗生长发育的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

惠麦侠  张鲁刚  张明科  齐西婷 《蔬菜》2003,(11):32-33

麦饭石(Maifan stone)是一种天然的矿物中药石,现代科学研究证明,麦饭石是一种含有丰富常量、微量及稀土元素的花岗质浅色岩类,含有近60种元素,其中18种是动植物体正常生长所必备的。在农业方面,麦饭石可用来治理被污染的土壤,使土壤污染减轻到最低限度;可提高作物产量和产品质量。目前,麦饭石对大白菜的研究尚未见报道,本试验探讨了麦饭石对大白菜种子萌发及幼苗生长发育的影响,以期为大白菜合理施用麦饭石肥料提供依据。一、材料与方法1.材料及处理大白菜(Brassica campesistrisL. ssp. Pekinensis (lour) Olsson)品种:陕春白1号。麦饭…  相似文献   

抗抽薹春大白菜新品种“冠春”的选育     

张鲁刚  惠麦侠  张明科 《中国农学通报》2005,21(10):242-242

“冠春”是由自交不亲和系01S315和自交亲和系01S105配制而成的中熟春大白菜一代杂种。叶球浅叠抱，中桩，粗筒形；球高28.3cm，球宽19.6cm，球叶乳白，球形指数1.5，单球重1.8~2.5kg，净菜率73.9%以上。球叶数60片左右，抗未熟抽薹性较韩国品种“春获”强。高抗病毒病、霜霉病、黑斑病、软腐病和干烧心。定植到收获60~65d，一般产量89225.3kg/hm2。  相似文献