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家兔胚胎细胞周期的调控 总被引：4，自引：0，他引：4
本实验用化学药物对家兔胚胎细胞周期进行调控,以建立细胞周期同期化的方法.实验结果表明(1)用1.00μg/ml噻氨酯哒唑(nocodazole)处理家兔16-细胞胚胎12h,可使胚胎细胞完全同期化于M期;(2)细胞周期同期化于M期的家兔胚胎细胞用0.20μg/ml阿菲迪霉素(aphidicolin)处理8h,可完全抑制DNA的合成,使胚胎细胞同期化于G1期;(3)细胞周期同期化于M期的家兔胚胎细胞在体外培养8h后,然后用1.00μg/ml环己酰胺(cycloheximide)处理8h,可使胚胎细胞同期化于G2期.本研究的结果还表明细胞周期同期化处理不影响胚胎的体外发育,但胚胎移植后的产仔率明显低于对照组(P＜0.05). 相似文献
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探索了单独应用乙醇或者联合 6 -氨基嘌呤 (DMAP)、细胞松弛素 B(CB)、放线菌酮 (CHX)等化学物质对体外成熟 4 4 h猪卵母细胞激活的影响。结果如下 :分别用 0、5 %、8%、11%乙醇处理 5 min,或者在 8%乙醇条件下激活处理2、5、10 min的各组试验中 ,8%乙醇处理 5 min的卵裂率为 (6 .4 2± 4 .88) % ,高于其他各组 ,但均无囊胚发育 ;乙醇(8%、5 min)激活后 ,分别用 CB、CHX、DMAP、CB+CHX、CB+DMAP培养 6 h,结果 CB+DMAP的激活率、卵裂率和囊胚率最高 ,分别为 (70 .86± 3.75 ) %、(5 3.87± 5 .36 ) %、(15 .0 7± 5 .5 3) % ,与其他组相比 ,囊胚率差异显著 (P<0 .0 5 ) 相似文献
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小鼠原核胚OPS法冷冻保存技术 总被引：15，自引：1，他引：14
在20，25℃室温条件下，采用OPS（open pulled straw)法对小鼠原核胚进行玻璃化冷冻保存。结果表明，EFS EDFS各冷冻组的原核形态正常率（95％－100％），体外发育率（76％－82％）和对照组（100％，88％）无显著性差异（P＞0．05）。采用EWFS40冷冻后的原核胚形正常率（70％－76％）与对照组相比差异极显著（P＜0．01）。而EPFS30和EPFS40冷冻后的胚胎发育率（34％－57％）均极显著低于对照组（P＜0．01）。另外，在25℃室温条件下冷冻保存的原核胚，解冻后其囊胚发育率（76％－80％）与对照组（86％）无显著性差异（P＞0．05）。冷冻保存的原核胚移植后的妊娠率和产仔率达45％和44％，与新鲜原核胚移植的对照组（56％和46％）相比均无显著性差异（P＞0．05）。 相似文献
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一般来讲 ,奶牛的产奶量是受遗传因素和环境两个方面共同作用的影响 ,奶牛泌乳性能遗传力 0 .2 5～ 0 .30 ,所占比重较小 ,而泌乳受环境因素的影响却很大。因此 ,在奶牛现有的遗传基础上 ,只要加强和改进饲养管理条件 ,即可提高牛奶产量。为此 ,我场在 2 0 0 0年除抓好常规奶牛管理的同时 ,注重科技的投入 ,采取走出去 ,请进来的方式 ,加大科技管理力度 ,加强与大专院校的联系 ,聘请专家、教授进行技术指导服务。由于我场在生产中采用了一系列技术措施 ,不仅牛群健康 ,而且牛奶产量有了较大幅度的提高 ,牛奶产量创我场历史最好水平 ,经济效… 相似文献
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提高绵羊卵母细胞发育能力的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
近年来，研究者对羊卵巢在培养前的保存温度与时间，采卵方法等因素进行了研究，取得一些重要成果。在绵羊的体外受精研究中也发现，从不同温度保存的卵巢中采取的卵母细胞色泽变化明显。此次试验就绵羊卵巢的不同保存温度以及不同的采卵方法对卵母细胞发育能力的影响进行了研究，以期为提高绵羊胚胎体外生产效率提供有用的参考依据。 相似文献
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本实验研究了体外成熟绵羊卵母细胞在舍抗冻保护荆DMS()和EG的冷冻液中暴露和OPS法玻璃化冷冻保存后对体外受精卵裂率、精子入卵率、皮质颗粒分布、酶溶解透明带时间及雌原核形成的影响.将体外成熟24 h的绵羊卵母细胞分为3组:(1)对照组,卵母细胞不进行处理;(2)毒性组,卵母细胞在冷冻液中进行暴露但不投入液氮中冷冻;(3)冷冻组,卵母细胞利用OPS法进行玻璃化冷冻.处理组卵母细胞在浓度递减的蔗糖溶液中脱除抗冻保护剂.结果,卵母细胞体外受精的卵裂率和单精子入卵率,毒性组(62.3%和29.3%)和冷冻组(67.6%和28.2%)显著低于对照组(78.4%和45.0%)(P＜0.05),毒性组和冷冻组间无显著差异(P＞0.05).为了研究冷冻保存导致卵母细胞受精能力降低的机制,处理组及对照组一部份卵母细胞分别于处理后0 h(IVM24 h)、2 h(IVM26 h)和体外受精后12 h(IVFl2 h)测定皮质颗粒分布和用0.1%链霉蛋白酶溶解透明带时间,另一部份卵母细胞则在不含有精子的受精液中孵育12 h后测定雌原核形成率.结果,在IVM24 h和IVM26 h,皮质颗粒呈完全释放的比例,毒性组(41.2%和40.8%)和冷冻组(41.7%和51.8%)显著性高于对照组(7.1%和18.4%)(P＜0.05);IVM26 h酶溶解透明带时间,毒性组(435.6±16.6)s和冷冻组(422.3±14.6)s显著长于对照组(381.6±15.3) s(P＜0.05);雌原核形成率,毒性组(58.7%)和冷冻组(63.9%)组显著高于对照组(8.2%)(P＜0.05).上述结果表明,舍DMS()和EG的冷冻液对体外成熟绵羊卵母细胞具有孤雌激活作用,引起皮质颗粒的提前释放,导致透明带变硬,降低卵母细胞的受精能力. 相似文献
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朱士恩 《农业生物技术学报》2003,11(1):88-88
自90年以来，用10余年的时间研制出几种高效低毒的玻璃化溶液(EFS、GFS、DFS和EDFS)．利用此溶液成功地对哺乳动物体内、外受精的早期胚胎进行了玻璃化冷冻保存。本方法不使用冷冻仪，且在室温(20～25℃)下徒手操作，仅30s即可完成冷冻程序：改变了传统的慢速冷冻法借助冷冻仪，且降温过程需3h才能完成。利用本方法对体外 相似文献
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小鼠2-细胞胚胎细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究 总被引：8，自引：0，他引：8
本试验在室温 (2 0℃和 2 5℃ )条件下 ,利用不同浓度的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠 2 细胞胚胎进行细管法和OPS法玻璃化冷冻保存。在 2 0℃室温条件下 ,用EFS4 0平衡 1min细管一步法冷冻 ,解冻后囊胚发育率仅为35 .0 % ,和新鲜 2 细胞体外培养的对照组 (6 5 .0 % )的差异极显著 (P <0 .0 1)。当 2 细胞胚胎在 10 %EG +10 %D溶液中预处理 5min ,再移入EDFS中平衡 30s二步法冷冻保存 ,解冻后囊胚发育率达 4 7.8%～ 4 8.8% ;当室温升至2 5℃时 ,二步法冷冻保存后 2 细胞的囊胚发育率达到 5 2 .2 % ,与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 )。改用OPS二步法EFS30冷冻组保存后的 2 细胞胚胎的囊胚发育率高达 6 2 .2 % ,为试验中的最佳组。用最佳细管法和OPS法冷冻组解冻后培养至囊胚移植给受体母鼠均获得产仔 相似文献
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达兰猪精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定.对8 d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12 h ,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定,初步确定精原干细胞及其比例.结果表明所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为92.65%和7.35%,平均每克睾丸可获得4.17×107个细胞;精原细胞主要分布于19%～27%的Percoll 梯度带中,经纯化后其纯度为47.62%,精原干细胞占该带细胞的比例为5.52%.因此,采用组合酶消化,结合Percoll 不连续密度梯度离心法分离的达兰仔猪的精原细胞不但能够满足体外培养的需要,还可以做为精原干细胞移植的研究材料. 相似文献