西葫芦9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶CpNCED2基因的克隆及其干旱响应模式研究     

刘建汀  曾美娟  温文旭  王彬  陈敏氡  叶新如  朱海生  温庆放 《核农学报》2021,35(8):1751-1760

为探究9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)在西葫芦干旱胁迫环境中的调控作用,本研究基于前期构建的转录组数据库从西葫芦中分离到1条1 941 bp的cDNA,该序列包含一个完整的开放阅读框(ORF),命名为CpNCED2;基因预测编码588个氨基酸,其理论分子量(Mw)为65.73 kDa、等电点(pⅠ) 为6.89。CpNCED2与同为南瓜属的中国南瓜和印度南瓜中同源蛋白的相似性均为99%,显示出高度的保守性。Pfam分析发现,CpNCED2具有NCED家族的典型特征,即含有4个保守组氨酸位点(His284、His333、His398和His575)和2个NCED蛋白保守结构域(281~289和333~340位)。利用光合仪对干旱胁迫后1、2、3、4 d西葫芦的幼苗进行测量,结果表明,随着干旱胁迫时间的延长,叶片净光合速率(Pn)、光系统Ⅱ最大光化学效率(F_v/F_m)、非光化学淬灭系数(NPQ)和光化学电子传递效率(ETR)显著降低。同时发现,干旱胁迫后1、2、3、4 d西葫芦叶片中水势逐渐降低,脱落酸(ABA)含量逐渐升高,CpNCED2基因显著上调表达。本试验为进一步研究CpNCED2在西葫芦干旱胁迫应答以及ABA的代谢合成过程的功能提供了理论依据。  相似文献   

青梗花椰菜和白梗花椰菜转录组分析     

林珲  薛珠政  李永平  李大忠  刘建汀  朱海生  温庆放 《核农学报》2018,(9)

为探讨花椰菜花梗颜色的遗传基础,采用高通量测序技术(Illumina Hi Seq 4000)对青梗和白梗花椰菜进行转录组测序,共获得52 253 822个序列读取片段(reads),对测序的结果从头组装获得66 450个单基因(Unigene),N50为1 285 bp,平均长度为717.40 bp。转录物注释结果显示,45 390个基因有同源比对信息;21 060个基因无匹配序列信息,可能为花椰菜特异的基因序列。对所得差异基因(DEGS)进行不同数据库注释,GO注释到2 540个DEGS,分为细胞组分、分子功能及生物学过程3大类54个功能组;COG注释到的753个Unigene功能系统分为24类;以KEGG数据库为参考,将946个DEGS定位到119个代谢途径分支,注释到6个差异基因与类胡萝卜合成途径有关,9个DEGS与类黄酮生物合成途径有关,1个DEGS与叶绿素代谢相关,且与花椰菜的花梗颜色形成密切相关。16个差异基因通过qRT-PCR验证,结果与RNA-Seq测序结果一致。本研究结果进一步揭示花椰菜花梗颜色的形成机理,为花椰菜品种遗传改良奠定了一定的理论基础。  相似文献   

空心菜SRAP-PCR分析体系的建立与优化     

陈敏氡  朱海生  王彬  温庆放 《福建农业学报》2015,(4)

以空心菜为试验材料,利用单因素试验对影响SRAP-PCR反应体系的DNA模板、10×PCR Buffer(含Mg2+)、dNTPs、引物以及TaqDNA聚合酶5个因素进行优化,从而建立适合于空心菜SRAP-PCR分析的反应体系。结果表明:空心菜SRAP-PCR最佳的反应体系(25μL)为:DNA模板80ng、10×PCR Buffer(含Mg2+)2.5mmol·L-1、dNTPs 0.2mmol·L-1、引物0.4μmol·L-1、TaqDNA聚合酶1U。运用所优化的SRAP-PCR分析体系,对"本地空心菜"和"三叉空心菜"2个品种进行SRAP-PCR扩增,扩增结果所获得的电泳谱带清晰明亮,材料间表现出明显的多态性,并且在25对SRAP引物组合中可以筛选出7对多态性高的组合,能明显区分2个空心菜品种。由此可见,本试验所建立的SRAP-PCR体系适用于空心菜的品种鉴定和遗传多样性分析。  相似文献   

草莓八氢番茄红素脱氢酶基因pds的克隆及特征分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱海生  李永平  温庆放  林珲 《园艺学报》2011,38(1):55-60

 采用RT-PCR和RACE技术从草莓果实中克隆到草莓类胡萝卜素合成途径中关键基因pds,该cDNA全长2 043 bp,具有一个1 704 bp的完整开放阅读框（ORF）,编码568个氨基酸。序列分析表明,pds编码的氨基酸序列与其它植物的PDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,草莓PDS与杏的PDS蛋白亲缘关系比较近。原核表达结果表明pds基因在大肠杆菌中获得高效表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,pds基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达,表达量为红果＞粉红果＞白果＞花＞青果＞叶。  相似文献   

不同贮运温度对蔬菜秧苗产后质量保持的影响     

朱海生  宁为  温庆放  林义章 《江西农业大学学报》2003,(Z1)

不同贮运温度对蔬菜秧苗产后质量保持有重要影响。11℃下贮运的秧苗较其他贮运温度的秧苗,根系活力、叶绿素含量和呼吸强度三项生理指标都下降较小,干重最大,地上地下部分生长平衡,定植后的心叶生长速度表现最快,质量得到最好的保持。  相似文献   

草莓新品种‘福莓2号’     

花秀凤  陈铣  朱海生  陈爱华 《园艺学报》2015,42(1):195-196

‘福莓2号’草莓是以‘佐贺清香’为母本,‘法兰地’为父本配制而成的新品种。果实圆锥形,红色;肉质细腻,硬度中等,香味浓;可溶性固形物含量9.5%,总糖含量7.1%,可滴定酸含量0.47%,维生素C含量0.719 mg·g-1;平均单果质量20 g。抗白粉病,适宜在南方地区露地或保护地种植。  相似文献   

草莓乙烯受体FaEtr2基因的克隆及其反义表达载体的构建     

朱海生  温庆放  林义章  张志忠  潘东明 《勤云标准版测试》2007,(6)

为了构建草莓乙烯受体FaEtr2基因的反义表达载体,在已报道的FaEtr2基因序列的基础上,设计特异引物,克隆草莓乙烯受体FaEtr2基因部分特异序列,将该片段反向插入植物表达载体pBI121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了反义表达载体pBI121Etr2。通过双酶切鉴定后,导入农杆菌EHA105中,酶切和PCR鉴定表明质粒已导入到农杆菌中。本研究为后期该反义基因转化草莓品种以改良草莓果实耐贮运性打下基础。  相似文献   

杂交太阳鱼引种试养小结     

朱海生  谈灵珍 《科学养鱼》2007,(7):29-29

杂交太阳鱼（Hybrid sunfish），又称美国太阳鱼、杂交太阳鲈，是以蓝鳃太阳鱼（Lepomis marochirus）为母本和绿色太阳鱼（Lepomis cganellus）为父本的杂交子一代，外形似父本，是一种体型较小的温水性鱼类。其优点是：①形似鲈鱼，肉多鲜嫩、体侧肌肉无小刺、鱼肉中粗蛋白含量高、煮汤汤白而鲜；②偏肉食性的杂食性鱼类，食性广杂，可喂配合饲料；  相似文献   

白玉蜗牛养殖技术     

谈灵珍  朱海生 《新农村》2009,(4):21-21

1．生物学特性白玉蜗牛属雌雄同体的软体动物,贝壳呈螺旋形,体躯几乎全是肌肉,无骨骼,主要依靠肌肉伸缩移动。 （1）习性白玉蜗牛喜在阴暗潮湿、疏松多腐殖质的环境中生活,昼伏夜出,畏光怕热。对环境极为敏感,最适温度为25～28℃,相对湿度为75％-85％。当温度低于15℃或高于35℃时呈休眠状态,停止生长和繁殖。  相似文献   

丝瓜ISSR反应体系的优化     

叶新如  朱海生  温庆放  刘建汀  王彬  陈敏氡  张前荣 《分子植物育种》2018,(5)

以丝瓜基因组DNA为模板,对ISSR反应中主要5个影响因素Mg~(2+)浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度,建立丝瓜ISSR-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为:25μL ISSR体系:50 ng DNA,0.2 mmol/L dNTP,1 U Taq酶,0.4μmol/L的单条引物,2.5μL 10×Buffer,2.0 mmol/L Mg~(2+)。在此基础上,对12个引物的退火温度进行优化。最终选用60份丝瓜品种对所确定的扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高和重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的ISSR分子标记为丝瓜种质资源的鉴定、分类和丝瓜的杂交育种提供参考依据。  相似文献