基因组编辑技术及其检测鉴定方法研究进展     

丁霖  彭城  殷海军  陈笑芸  徐俊锋  李玥莹 《浙江农业科学》2019,60(2):274-280

基因编辑技术指能够对目标基因进行编辑,实现对特定DNA片段的敲除、加入等技术。目前,该技术主要包括锌指蛋白系统、转录激活因子样效应核酸酶系统和成簇的规律间隔短回文重复序列系统,基本原理都是通过序列特异性核酸酶特异切割DNA靶位点,产生DNA双链断裂,诱导DNA的损伤修复机制,从而实现对指定基因组的定向编辑。本文概述了3种基因编辑技术的原理,对它们的优缺点进行比较,并阐述了CRISPR基因编辑技术在动物和植物育种中的应用,以及基于CRISPR技术的DNA分子检测新方法的建立和应用。其次,阐述了对CRISPR等基因编辑产品筛选和检测鉴定的方法,比较了几种筛选方法的检测周期、灵敏性、人工成本等。最后,对基因编辑技术的发展前景进行了展望。  相似文献   

S_(3307)调节剂对冬小麦幼苗某些生理特性的影响     

李玥莹  陈贵  陈凤玉 《麦类作物学报》1999,(1)

用 １０、３０、５０、１００ ｍ ｇ ／ Ｌ Ｓ３ ３ ０ ７ 浸冬小麦种子 １２ ｈ 。结果表明, Ｓ３ ３０ ７ 降低了麦苗的生长速度,对株高有控制作用;麦苗叶片叶绿素含量增加,叶片内可溶性糖和可溶性蛋白含量提高;叶片在低温逆境条件下电解质外渗率下降,从而提高了膜的稳定性,保证了细胞正常的生理功能。其效果以 ３０ ｍ ｇ ／ Ｌ 为最佳。  相似文献   

高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化     

许丽  李玥莹  邹剑秋  林凤  许昕  陶思源 《安徽农业科学》2007,35(2):328-329

以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选.通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:电泳时间为92～105 min;银染温度为27.8～29.0 ℃;显色温度为32℃左右.  相似文献   

大豆N2O释放与光照度和光合作用的关系     

杨宇  陈冠雄  李玥莹  崔震海  张立军 《沈阳农业大学学报》2005,36(3):282-285

采用分隔式封闭箱法，测定盆栽大豆植株氧化亚氮（N2O）通量以及光照度、光合速率和气孔导度的日变化。同时，观测田间大豆—土壤系统在主要生长阶段N2O释放的变化。在温室里，大豆植株N2O释放在上午10：00时出现一个高峰；中午时N2O释放量较低，此时光照度和光合速率都保持在较高的水平上；在14：00时，N2O释放量达到低谷,光照度达到最大，但光合速率却处于很低的水平；在15：00时，植株N2O的释放达到第二个高峰，但光照度和光合速率却处于快速下降期。结果表明：植物N2O的释放不仅与光合作用的光反应有关，而且也与暗反应有关。上午10：00以后植株N2O释放通量与气孔导度变化没有一致的关系。在大豆生长季，大豆—土壤系统N2O释放通量有两个高峰，第一个峰出现在6月中下旬，第二个高峰出现在9月下旬。  相似文献   

高粱抗蚜的分子标记RAPD初步分析     

李玥莹  徐兰兰  邹剑秋 《杂粮作物》2006,26(6):388-391

以高粱BTAM428I、CS-12B、124B的叶片为材料,应用RAPD筛选技术对高粱基因进行分子标记。用CTAB法对高粱BTAM428I、CS-12B、124B的叶片DNA提取纯化。初步建立了高粱BTAM428I、CS-12B、124B的RAPD反应体系。在此实验条件下确定了RAPD反应体系中最佳的随机引物种类,共筛选了41个RAPD随机引物,获得了较稳定的RAPD扩增结果及多态性较好的DNA。其中有11个引物能对DNA扩增,产生差异谱带。  相似文献   

热加工过程对转基因水稻检测的影响     

黄赛楠  汪小福  徐俊锋  陈笑芸  缪青梅  李玥莹 《浙江农业学报》2013,25(2):0

热加工会导致食品中DNA的降解和破坏,为研究热加工过程对转基因水稻检测的影响,试验采用水煮、高温灭活、高温烘干和微波4种外源模拟热加工的方法处理目前我国3种转基因水稻（KF6,KMD1和TT51-1）。并按照国家标准对相应的参数进行检测,内源基因SPS,CaMV35S启动子,NOS终止子和抗虫基因Bt,4种参数的PCR扩增结果显示,热加工过程无论对内源基因和外源插入基因的检测都有影响,表明现行的标准对转基因水稻加工品的检测存在局限,同时我们重新设计了针对抗虫基因Bt 的引物用于检测热加工处理的样品,扩增结果优于标准引物。  相似文献   

转Cry1Ab水稻纯合体快速准确的PCR鉴定方法     

张焕春  汪小福  李玥莹  陈笑芸  缪青梅  徐俊锋 《浙江农业学报》2012,24(4):549-554

转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01 ng,在此基础上组合各引物建立了筛选转基因水稻Bt22纯合体的多重PCR方法,结果表明该方法简单高效,便于操作。  相似文献   

几种动物生鲜肌肉组织样品DNA提取方法的比较研究     

纪艺  姜媛媛  汪小福  徐晓丽  徐俊锋  李玥莹  陈笑芸 《浙江农业学报》2019,31(9):1471

比较不同提取原理的试剂盒对动物生鲜肌肉组织DNA提取效果,为日常肉制品掺假检测与监测选择合适的DNA提取方法提供参考。以生鲜牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉和鸭肉为试验材料,采用改良CTAB法、蛋白酶K法、SDS法和快速萃取法等原理的8种不同方法来提取组织样品DNA,并对提取DNA的完整性、浓度、纯度、试验耗时和后续实时荧光定量PCR检测等指标进行评价。结果表明,8种提取方法均可用于常见动物源性肌肉DNA的提取。与改良CTAB法相比,原理为蛋白酶K法、SDS法和快速萃取法的试剂盒避免了有机试剂的使用,且操作耗时短。实际操作中,可优先选择基于蛋白酶K法和SDS法的试剂盒进行DNA提取,其提取的DNA纯度和总量高,盐残留少,对实时荧光定量PCR的抑制少,满足肉制品掺假检测与监测的核酸提取需求。  相似文献   

镉超富集植物耐镉性的分子机制研究进展     

逄洪波  谷思雨  李玥莹  陈强  张雨欣  刘宁 《北方园艺》2015,(19):170-174

土壤中的镉污染已经成为威胁生态系统和人类健康的严重环境问题。植物修复是一种绿色、经济、生态友好的土壤修复技术,超富集植物由于在植物修复中的巨大应用价值而备受关注。了解镉超富集植物的分子调控机制,对于Cd土壤修复具有重要理论指导意义。该文综述了国内外镉超富集植物耐镉性分子机制的研究现状,并对存在的问题和研究前景进行了展望。  相似文献   

RAPD分子标记技术在甜高梁基因组研究中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

李南珠  李玥莹 《安徽农业科学》2009,37(15):6881-6883

[目的]应用RAPD技术对甜高粱丝黑穗病基因进行分子标记研究。[方法]以抗病亲本7050B与感病亲本TX622B杂交后的F2代以及抗病甜高粱品种8113和感病甜高粱品种8101为试材,用CrAB法提取DNA,用RAPD分子标记技术对其DNA进行多态性扩增与初步分析,同时对琼脂糖凝胶电泳检测体系进行优化。[结果]CTAB法适宜提取DNA。在对抗病亲本7050B与感病亲本TX622B杂交后的F1代进行RAPD标记时,用60个引物进行筛选,其中27个引物扩增出了多态性谱带;应用20个具有多态性扩增谱带的引物对抗病甜高粱品种8113和感病甜高粱品种8101进行RAID分析时,共有7个引物扩增出了差异谱带,分别为S56、S66、S67、S70、S72、S75、S78。[结论]该研究为甜高粱优良品种的培育提供科学基础。  相似文献