慢生型大豆根瘤菌putA基因的功能分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

唐咸来  武波  柏学亮  唐东阶  吕安国  唐纪良  马庆生 《农业生物技术学报》2001,9(3):286-288

重组质粒pGX300上的putA基因是从慢生型大豆根瘤菌GX201中克隆到的编码脯氨酸脱氢酶的基因。通过Tn5gusA5定位诱变方法构建了putA基因的突变株GX20120，实验表明，GX20120的结瘤时间推迟，竞争结瘤能力降低。  相似文献   

高盐极端环境土壤基因组DNA的分离纯化方法研究及基因文库的构建   总被引：5，自引：0，他引：5  

孙栋  唐莉丽  王倩倩  杨冬梅  蒋承建  武波 《广西农业生物科学》2006,25(1):24-29

以钦州市犀牛角镇晒盐池内(盐浓度>25%)的土壤样品为研究对象,对土壤混合基因组DNA的提取和纯化方法进行了深入研究,结果表明,冻融法、十二烷基磺酸钠(SDS)和蛋白酶K联合使用的提取法,能有效提高DNA得率,DNA的产量达到每克土壤样品10~15μg。交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、Sephadex G-200树脂以及大量胶回收的使用,可有效纯化DNA,纯化的DNA产量可达每克土壤样品4~6μg,DNA片段大小>30 kb。将纯化的DNA用B amHⅠ部分酶切后构建以pLAFR 3为载体的混合基因组文库,该文库包含15 600个克隆,外源片段DNA平均大小为18 kb。通过DNA序列测定和同源性比较,对从文库中随机挑取的10个克隆进行了序列分析,发现9个外源插入片段包含未知DNA序列。  相似文献   

水稻白叶枯病黄单胞菌编码顺乌头酸酶的rpfA基因的鉴定     

武波  唐纪良  马庆生 《广西农业生物科学》1996,(1)

通过生化功能分析，证实了水稻白叶枯病黄单胞菌野生型菌株Ｔ３０００产生两种顺乌头酸酶（分别命名为ＸｏｏＡｃａｎＡ和ＸｏｏＡｃａｎＢ）。通过三亲本接合的方法，将获得的含水稻白叶枯病黄单胞菌ｒｐｆ基因簇的重组质粒ｐＧＸＮ３０００导入甘蓝黑腐病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因突变体８４７６中。经生化功能分析证实，８４７６／ｐＧＸＮ３０００中含有水稻白叶枯病黄单胞菌的顺乌头酸酶ＸｏｏＡｃａｎＡ；同时还证实了ＰＧＸＮ３０００能互补８４７６，恢复其合成胞外酶和胞外多糖的能力及致病性．这表明在ＰＧＸＮ３０００中含有一个完整的水稻白叶枯病黄单胞菌的顺乌头酸酶基因，该基因具有类似甘蓝黑腐病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因的功能．因此将该基因命名为水稻白叶枯病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因。  相似文献   

丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆     

乔越美  黄胜  凡星  赵文报  武波 《广西农业生物科学》2003,22(2):139-142

采用PCR方法从大肠杆菌K12染色体DNA中克隆出1．5kb的DNA片段，并将其与pUCm—T载体连接转入大肠杆菌JMl09中。DNA测序分析证明该片段含有一个完整的丝氨酸羟甲基转移酶基因（glyA)。  相似文献   

假单胞菌抗福美双菌株T46的基因文库的构建     

武波  谢庆武等 《广西农业生物科学》1992,11(3):64-70

从南宁市郊土壤中筛选到的一株杭杀菌剂福美双的抗性菌T46，在福美双浓度达1500μg/mL的GBM平板上仍能生长。经过T46的个体形态，培养特征的观察及生理生化试验，初步鉴定为假单胞菌属第一群铜绿假单胞菌。用广谱性考斯（cosmid）载体pLAFR1,在大肠杆菌ED8767中建立了T46的基因文库。转化子数和重组质粒酶切检查均证明，所构建的基因文库达到了理论要求。  相似文献   

药用野生稻抗源对褐稻虱的抗性遗传及利用研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

秦学毅  韦素美  武波  黄凤宽  覃祖芳 《西南农业学报》2002,15(4):62-64

利用广谱高抗褐稻虱的药用野生稻（CC染色体组）与感虫栽培稻（AA染色体组）品种进行远缘杂交，通过幼胚培养获得绿苗，经过4代回交和4代自交，成功地将抗性基因转移到栽培稻中，获得了高世代B4F4株系。对其亲本和后代的鉴定结果表明，药用野生稻抗性受1对显性主效基因控制；其抗性基因与药用野生稻主要农艺性状没有连锁遗传关系。  相似文献   

慢生大豆根瘤菌与竞争结瘤相关的lrp基因的克隆     

武波  唐成来  柏学亮  唐东阶  吕安国  唐纪良  马庆生 《中国农业科学》2002,35(4):399-402

通过对重组质粒pGXN300中的2.3kb EcoRI片段测序分析发现,其中含有一完整的lrp基因和部分putA基因,与King等报道的B.japonicum的lrp基因DNA序列有88％同源性。应用Tn5gusA5定位诱变的方法获得了gusA基因表达的根瘤菌lrp基因突变体GX20108。植株试验表明,突变株结瘤时间明显推迟,竞争结瘤能力也显著下降。  相似文献   

利用双标记mTn5构建甲基杆菌MB200突变体库的研究     

申佩弘  晁红军  宋修鹏  武波  唐咸来 《山西农业科学》2008,36(11)

Methylobacterium sp. MB200是一种粉红色的、兼性甲基营养菌,它能以单碳化合物作为唯一碳源和能源,因此,可以作为氨基酸、工业酶等的生产菌株。以M. sp. MB200一碳代谢途径作为主要研究对象,利用mTn5-gusA-pgfp21转座子构建了甲醇利用菌的突变体库,在含有丁二酸的培养基上共获得了约12000株突变体,其中,甲醇营养缺陷的突变体119株,表现GUS活性的突变体1542株。然后,根据转座子已知序列,运用TAIL-PCR的方法克隆到了突变基因的部分序列,为进一步研究一碳代谢基因以及氨基酸和工业酶等的生产打下了基础。  相似文献   

可降解糖蜜酒精废液黑褐色素细菌菌株的筛选及其降解色素效率的测定(初报)     

李有志  冯家勋  武波  唐纪良 《广西农业生物科学》1999,18(4)

从废水、土壤和塘泥样中经驯化并筛选到可在平板培养基上明显降解糖蜜酒精废液色素的11 株不同细菌。在外加一定量的C和N 源条件下, 液体发酵结果表明: 无论是单菌株或混合菌株发酵, 其降解色素效果随稀释倍数增大而提高。废液稀释20 倍, 接种量为0.05 g 湿菌体/m L, 经单菌株发酵10 h 后的T值(透光率) 在60.3% ～92.1% 之间, 是对照的1.2～1.83 倍, 色质浅黄 (对照呈棕色); 同样接种菌量, 用11个菌株混合发酵5 h 后的T值为95.0% , 是对照的1.9 倍, 色质也呈浅黄色。相应的色度是500, 与对照相比色度下降了68.8% ,与此同时BOD5 和CODcr5 的去除率分别达93.1% 和87.1% 。混合菌株的降解负荷远高于单菌株。而且这些菌株主要是去除了废液的黑褐色素。  相似文献   

三个野生种群马氏珠母贝遗传多样性的RAPD分析   总被引：15，自引：0，他引：15  

王爱民  阎冰  叶力  邓凤娇  张锡元  武波 《农业生物技术学报》2003,11(2):163-168

摘要：为了解野生种群马氏珠母贝（Pimctada martensii (Dunker.)）的遗传结构背景和开展遗传改良育种,运用RAPD技术分析了海南三亚（SW）、广东大亚湾（DW）和广西北海（BW）3个野生种群的遗传多样性。采用了18个10碱基的随机引物对3个野生种群进行分析,其中6个引物能扩增出清晰的多态带谱,扩增的DNA片段大小在含0.2~3.0 kb之间。SW、DW和BW 3个种群内的遗传相似性指数分别为0.642、0.672和0.688,Shannon多样性值分别为0.266、0.211和0.174。马氏珠母贝3个野生种群的遗传相似性依次为SW< DW < BW,而遗传多样性依次是SW > DW> BW。DW和SW相对遗传距离为0.104;DW和BW相对遗传距离为0.094;SW和BW相对遗传距离为0.212。讨论了马氏珠母贝野生种群遗传多样性差异的可能原因、种群间杂交子代的杂交优势预测及人工养殖对野生种群遗传结构的可能影响。  相似文献