21日龄CD163基因编辑猪血液生理 生化及免疫指标的测定和分析     

张立苹  吴常宝  牟玉莲  周伟良  华再东  华文君  李奎  毕延震 《江西农业学报》2019,31(12)

探讨了CD163基因编辑对21日龄断奶仔猪前腔静脉血液中部分生理生化、免疫球蛋白及补体蛋白等指标的影响。结果表明:CD163基因编辑后,纯合子的淋巴细胞比率、中间细胞比率、红细胞平均体积均显著低于杂合子和阴性猪(P0.05);纯合子的粒细胞比率、粒细胞数显著高于杂合子和阴性猪(P0.05);杂合子的血小板总数显著高于纯合子和阴性猪(P0.05);纯合子的葡萄糖和胆固醇含量显著高于杂合子和阴性猪(P0.05);纯合子血液中IgG、IgA、IgE和IgM等4类免疫球蛋白的含量均显著高于杂合子和阴性猪(P0.05);纯合子血液中补体蛋白3和补体蛋白4与杂合子和阴性猪没有显著性差异(P0.05)。  相似文献   

无选择标记的转基因家畜制备技术     

魏庆信  毕延震  郑新民 《湖北农业科学》2014,53(21)

选择标记基因(Selectable marker genes,SMGs)为目前应用体细胞核移植技术制备转基因家畜所必须.然而一旦完成筛选得到所需要的转化细胞或完成转基因动物的构建之后,SMGs就变成不需要的或多余的,而且这些带有标记基因的家畜还存在安全方面的隐患.因此,建立无选择标记的转基因家畜技术势在必行.目前能够采取的策略一是在筛选转化细胞或构建成功目的基因表达的家畜之后,删除SMGs;二是使用无筛选标记的转基因技术.综述了应用Cre/LoxP位点特异性重组系统删除SMGs的各种方法,以及应用锌指核酸酶(ZFNs)、TALEN和CRISPR/Cas9等新型基因编辑技术,基于受精卵显微注射的无筛选标记转基因技术的研究进展,分析对于制备无SMGs的转基因家畜而言后者的优势所在,旨在为转基因家畜研究提供参考.  相似文献   

母猪生殖对策的初探     

肖红卫  华文君  华再东  刘西梅  毕延震  任红艳  李莉  张立苹  郑新民 《中国猪业》2018,(4)

为了研究哺乳动物生殖对策,以母猪生殖记录为研究对象,对母猪不同胎次间产仔数的变化等进行研究。研究发现,在母猪的不同胎次间存在一定规律。通过优化每次繁殖过程所产生后代的数量,结果将身为发现哺乳动物对外界环境的感知和自适应机制奠定基础。  相似文献   

转hFat-1基因猪外源基因整合分析及拷贝数测定     

华文君  华再东  郑新民  毕延震  肖红卫  张立苹 《江西农业学报》2014,(11):99-101

对转人源化Fat-1基因猪的15头传代仔猪进行PCR检测,发现有7头阳性猪,其断奶后成活5头仔猪。对这5头仔猪进行Southern印迹杂交试验,确认3头仔猪整合有hFat-1基因。采用荧光实时定量PCR法测定原代转hFat-1基因公猪及3头阳性仔猪外源基因的拷贝数,分别是2、1、1、2个拷贝。转hFat-1基因猪能够将外源基因遗传到下代仔猪,但外源基因具有遗传不稳定的趋向。  相似文献   

PLINs基因对脂质的调控及其潜在的育种价值研究进展     

李志敏  陈洪波  毕延震 《中国畜牧杂志》2023,(6):27-35

周脂素蛋白家族（Perilipins,PLINs）有PLIN1、PLIN2、PLIN3、PLIN4和PLIN5 5种蛋白，该蛋白家族定位于脂滴（Lipid Droplets,LDs）表面，与其他分子相互作用介导脂质的合成与分解。PLIN1可调控脂肪的蓄积，也是脂肪细胞分化的标志物之一。PLIN2是脂质蓄积最重要的调节因子之一，可促进脂质合成，抑制LDs中主要脂质甘油三酯（Triglycerides,TG）和胆固醇酯（Cholesterol Ester,CE）的分解。PLIN3是中性脂质形成的关键基因。PLIN4参与脂肪细胞分化，还可修补脂滴形态的缺陷。PLIN5在LD积累与缓解脂毒性中起关键作用。本文综述了近年关于PLINs家族调控脂质的研究现状及其在畜禽上的应用，旨在阐述其在畜禽生物育种中的潜在育种价值。  相似文献   

m⁶A去甲基化酶FTO对猪肌卫星细胞分化的影响     

任祖凤  顾浩  胡康洪  毕延震 《中国畜牧兽医》2023,(7):2777-2788

【目的】探究N⁶-甲基腺苷(m⁶A)去甲基化酶FTO表达水平对猪肌卫星细胞分化的影响,并比较不同表型猪FTO表达和m⁶A甲基化修饰水平。【方法】收集分化第0、2和4天的猪肌卫星细胞,用Western blotting和实时荧光定量PCR分别检测FTO和肌球蛋白重链(MyHC)蛋白表达、肌分化因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG)的mRNA表达水平;利用免疫荧光法检测肌卫星细胞分化标志基因MyHC表达情况;采用Dot blotting检测m⁶A甲基化修饰水平。将过表达载体(OE-FTO)、空白对照(NC)和FTO基因干扰载体(siRNA-FTO)、阴性对照(siRNA-NC)分别转染猪肌卫星细胞并诱导分化,检测FTO、肌细胞分化相关基因表达情况以及m⁶A甲基化修饰水平,利用免疫荧光法检测MyHC表达以及肌管形成情况;利用Western blotting和Dot blotting分别检测大白猪、宁乡猪不同组织中FTO蛋白表达情况以及m⁶A甲基化修饰水平。【...  相似文献   

培养基的保存温度对牛卵母细胞体外受精的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

张立苹  刘西梅  毕延震  肖红卫  华再东  郑新民 《湖北农业科学》2016,(1):137-139

研究了培养基保存温度对牛卵母细胞体外受精的影响。结果表明,基础培养基中激素不同添加时间对牛卵母细胞体外成熟率、牛体外受精胚胎卵裂率及囊胚率差异不显著(P0.05);提前添加激素在4℃不能长期保存,而在-20℃能长期冷冻保存,并不会对牛卵母细胞体外受精胚胎的发育产生太大的影响。  相似文献   

细胞和个体水平沉默效应的差异(英文)     

郑新民  刘中华  程妮  肖红卫  乔宪凤  毕延震 《（《农业科学与技术》）编辑部》2011,(8)

[目的]研究3种不同长度的四联shRNA载体及其在细胞与个体水平的沉默效应差异。[方法]以EGFP为靶标基因,用hU6、mU6、h7SK、hH14种启动子,构建21、27、29bp的3种四联沉默载体,通过转染Vero细胞和注射小鼠肌肉,以实时荧光定量PCR的方法检测绿色荧光蛋白基因的mRNA水平。[结果]3种载体都有很强的沉默效应;其在细胞水平上的沉默效应远高于个体水平上;可以通过未成年鼠的肌肉注射进行转基因。[结论]多位点串联表达shRNA是一种可以达到较好干扰效果的方法;肌肉注射将是一个简便的转基因途径。  相似文献   

采用真空泵法快速获取猪卵母细胞     

肖红卫  郑新民  刘西梅  乔宪凤  李莉  张立苹  华文君  毕延震  华再东  周荆荣 《湖北农业科学》2011,(21):4438-4440

试验比较了真空泵法与传统的手动抽吸法对猪卵母细胞成熟效果的影响,结果表明,真空泵法在平均使用时间、卵母细胞的收集效率及A、B级卵母细胞所占的比例方面均优于手动抽吸法,在卵母细胞的成熟率方面稍低于手动抽吸法。表明真空泵法是一种有效的猪卵母细胞采集方法。  相似文献   

梅山猪耳组织成纤维细胞及其处理对核移植重组胚发育的影响     

华再东  徐国旗  毕延震  肖红卫  华文君  刘西梅  郑新民 《华中农业大学学报》2015,34(6):78-82

为研究供体细胞不同处理方法对核移植重构胚发育能力的影响,分别用血清饥饿不同时间和传代次数的供体细胞进行核移植,比较重组胚的卵裂率和囊胚率。结果发现,饥饿0、2、4、8d的核供体细胞,重组胚在卵裂率上没有表现显著的差异,而饥饿2d和4d试验组的囊胚率却显著高于其他组;以传代0、2、4、8代的细胞作为供体细胞进行核移植,未经传代的细胞直接作为核供体卵裂率为57.69%,明显低于经过传代的细胞;细胞的传代次数在重组胚卵裂率上并未表现出明显的不同,但传至第4代细胞构成重组胚的卵裂率和囊胚率最高(86.29%和23.36%)。试验选取饥饿处理2d、传4代的成纤维细胞作为核移植的供体,挑选发育良好的重组胚移植到6头代孕母猪体内,3头代孕母猪在第1到第3个情期相继返情,1头在胚胎移植45d流产;2头没有返情,B超检查受孕,其中1头代孕母猪到预产期顺利产下6头健康胎儿。  相似文献