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51.
禽源大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因的检测 总被引:1,自引:1,他引:0
从我国部分地区病、死家禽中分离到大肠埃希菌403株。按照CLSI(clinical and laboratory standards institute)推荐的K-B药敏纸片法对其中的344株分离株进行药敏纸片试验;根据GenBank上发表的序列,设计并合成了五对引物,对所有分离细菌进行质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因的扩增:qnrA、qnrB、qnrS、aac(6′)-ib-cr和qepA。1993年-1996年禽源大肠埃希菌分离株仅对萘啶酸的耐药率超过60%;2001年-2008年禽源大肠埃希菌分离株对1-3代7种喹诺酮类药物的耐药率均超过58%。在403株禽源大肠埃希菌中共检出3(0.7%)株qnrB阳性菌株,2(0.5%)株qnrS阳性菌株,5(1.2%)株aac(6′)-ib-cr阳性菌株以及5(1.2%)株qepA阳性菌株,未检测到qnrA阳性菌株。结果显示,近20年来,我国禽源大肠埃希菌对喹诺酮类药物的耐药性不断上升,同时,质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因在禽源大肠埃希菌中呈不断上升的流行趋势。 相似文献
52.
C3d对减毒沙门氏菌介导的NDV DNA疫苗诱导的特异性体液免疫应答的增强作用 总被引:2,自引:0,他引:2
采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F扩增出新城疫病毒F48E8株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入含有3 拷贝C3d 编码基因的pTR-C3d3质粒中,获得重组质粒pTR-F-C3d3。将F-C3d3基因片段从pTR-F-C3d3中切出,克隆入真核表达质粒pVAX1中,获得重组真核表达质粒pVAX1-F-C3d3。将pVAX1-F-C3d3转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F-C3d3)。重组菌分别以1×109 CFU的剂量两次口服免疫1日龄SPF鸡,结果显示,SL7207(pVAX1-F-C3d3)激发产生的血清抗体效价与SL7207 (pVAX1-F)免疫组之间存在显著性差异(P < 0.05)。SL7207(pVAX1-F-C3d3)免疫组的小肠黏膜抗体效价高于SL7207(pVAX1-F)免疫组,但两者间差异不显著(P > 0.05)。提示C3d可增强减毒沙门氏菌介导的NDV DNA疫苗诱导的特异性体液免疫应答水平,这为提高基于减毒沙门氏菌的NDV基因工程疫苗的免疫效果提供了新的途径。 相似文献
53.
54.
一种细胞因子检测新方法--ELISPOT技术 总被引:2,自引:0,他引:2
抗原特异性细胞毒T细胞在控制病毒感染和某些肿瘤中具有重要作用 ,如何准确地定量、定性抗原特异的T细胞反应及评价其作用 ,是细胞免疫学中的一项重要课题。ELISPOT技术是近年来正为众多研究者所认可的一项通过检测细胞因子 ,评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法。与其他细胞免疫学方法相比较 ,该方法特异性强、灵敏度高、能够直接检测分泌细胞因子细胞 ,而无需体外扩增。ELISPOT技术对病毒性疾病和肿瘤的发病机制以及体内细胞免疫功能的了解具有重要的意义 ,也为这些疾病的细胞免疫治疗提供了理论依据。目前 ,有研究显示该方法不仅应用于肿瘤免疫及其治疗中 ,而且在细胞内感染微生物、自身免疫性疾病发病机制、治疗等方面均有巨大的发展潜力 相似文献
55.
56.
鸡白痢沙门氏菌耐药性的变化趋势 总被引:14,自引:0,他引:14
对1962-1998年间分离保存的325株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明,随着时间的推移,菌株对16种抗菌药物的耐药性呈现不同程度的上升趋势,其中对氨苄青霉素,复方磺胺,甲氧苄胺嘧啶,链霉素,四环素,壮观霉素的耐药率明显上升。 相似文献
57.
表达新城疫病毒融合蛋白F基因的重组减毒沙门氏菌的构建和鉴定 总被引:8,自引:0,他引:8
新城疫是鸡的一种烈性传染病,其病原新城疫病毒(NDV)是副粘病毒科副粘病毒属的代表种,为一种单股负链RNA病毒。NDV的血凝素-神经氨酸酶(HN蛋白)和融合蛋白(F)在新城疫(ND)发病过程中起着重要作用,两者均是NDV的保护性抗原,因此HN基因和F基因常被用作研制ND基因工程疫苗的目的基因。近年来减毒沙门氏菌作为外源抗原载体,已成为新型疫苗研制的重要途径之一。由于减毒沙门氏菌仍具有侵袭性,通过其粘附、侵袭、定居肠相关淋巴组织(GALT),并经肠系膜淋巴结到达肝、脾,有效地刺激机体产生局部粘膜免… 相似文献
58.
59.
新城疫病毒F基因在大肠杆菌中的高效表达及其免疫原性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
应用PCR技术,以含有新城疫病毒F48E8株全长融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pVAX1-F为模板,扩增出594bp大小的F基因的部分片段.经克隆筛选和测序后,构建成重组原核表达质粒pGEX-6P-1-F.重组质粒转化表达菌BL21,获得重组菌BL21(pGEX-6P-1-F).经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,F基因在原核表达体系中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的23%.Western blotting结果显示,在相对分子质量46 ku位置有特异性条带.动物实验结果表明,F蛋白免疫鸡产生的针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体效价显著高于空白对照组(P<0.05),说明原核表达系统表达的F蛋白具有良好的免疫原性. 相似文献
60.