猪孤雌胚胎干细胞建系的研究     

周光斌  孟庆勇  王弘  李秋艳  赵志辉  李宁 《兽医大学学报》2012,(6):917-921

以猪孤雌激活囊胚为材料,囊胚透明带消化后采用全胚培养,培养液中添加不同培养成分或因子（如FGF2,LIF,2i等）,以及选择不同的初始培养液体积来筛选猪胚胎干细胞（embryonic stem cell,ES细胞）建系的优化培养体系。囊胚内细胞团形成的细胞集落采用胰酶消化传代。结果显示：透明带消化后,囊胚贴壁率显著升高（19．4％VS．8．8％）（P〈0．05）;初始培养液体积比平常培养液体积（0．30mL／孔,24孔培养板）减半条件下,能显著提高其贴壁率（91．7％VS 20．0％）（P〈0．01）,而且获得了可传至7代的类ES细胞系2株,碱性磷酸酶染色成阳性;当用2i因子（CHIR99021和PD03025901）去替代培养液中的FGF2,囊胚贴壁率（29．400VS53．3％）和原代集落形成率（20．0％VS 87．5％）反而显著下降（P〈0．01）。这表明培养液添加了FGF2和LIF（不舍2i因子）,用24孔板培养,最初培养体积为0．15mL,透明带消化的培养体系比较适合猪孤雌激活胚的ES细胞建系。  相似文献   

抗克伦特罗重组抗体发酵条件的优化     

梁艳  王弘  杨金易  刘细霞  徐小艳  张宏斌  雷红涛  沈玉栋  孙远明 《广东农业科学》2009,(8):200-202

为提高抗克伦特罗(clenbuterol,CBL)单链抗体(single chian Fv,seFv)的表达量,考察了Mg2+、Ca2+、NH4+、NaHPO4-等无机离子,初始pH值以及装液量对重组抗体表达量的影响.优化试验结果表明,重组大肠杆菌E.coli BL21在初始pH值为7.2、含2 mmol/L Ca2+和20 mmol/L NaHPO4-的培养基中培养,装液量为25 mL,42℃诱导表达后抗CBL-scFv的表达量为33.7%.  相似文献   

法国粮食储藏技术及工艺概况   总被引：1，自引：1，他引：0  

周浩  王莉蓉  林风刚  王弘  曹阳  唐学军  高彬彬  吴跃萍  张俊生 《粮食储藏》2009,38(6):43-47

主要介绍了国家粮食局2008年12月执行赴法国粮食储藏技术管理和标准培训所了解掌握的关于法国粮食储藏及技术应用方面的有关情况,包括港口库储粮技术、农户储粮技术、储粮害虫防治技术、储粮通风降温技术以及法国粮食主要储粮工艺与储藏技术推广应用体系,分析了法国粮食储藏技术应用及管理的特点,为我国粮食储藏工作拓宽了新的思路。  相似文献   

卷烟通风分配对中支卷烟烟气成分的影响     

唐小雪  范忠  李欢  黄勃  王弘  宾晖  康金岭  刘瑱 《湖北农业科学》2023,(S1):173-178+186

为了探究卷烟通风分配对中支卷烟烟气成分的影响,以滤嘴通风率（在线打孔）、卷烟纸透气度为参数,制备了20种不同通风度的中支卷烟样品,通过回归分析探究了卷烟通风分配对中支卷烟烟气成分影响规律。结果表明,中支卷烟总通风率、滤嘴通风率与主流烟气常规成分、有害物质、香味成分呈负相关关系,且总通风率、滤嘴通风率对常规成分、有害物质、香味成分的影响规律有较强的一致性;当滤嘴通风率为0.1%时,中支卷烟烟丝段通风率与主流烟气烟碱释放量呈显著负相关（P<0.05）;中支卷烟烟丝段通风率总体上与有害物质、香味成分呈负相关。滤嘴通风率在40%水平时,BaP释放量随着烟丝段通风率的增加而增加;在20%、30%、40%水平烟丝段通风率与酸性香味成分总量呈正相关。  相似文献   

钢筋非均匀锈蚀引起混凝土保护层内裂分析     

汪奔  王弘  张志强  周蒙蛟 《保鲜与加工》2017,(3):70-75

根据自然环境下保护层锈胀开裂前的钢筋锈蚀形态,将锈蚀层简化为半椭圆状的非均匀分布,从而建立了钢筋非均匀锈蚀理论模型。经过求解得到了混凝土中锈胀应力理论解,并与有限元计算结果对比,验证了理论解的精确性。根据理论解可知最大周向应力在水平轴上,因此锈蚀层的发展会首先引起保护层内部水平裂纹的产生。增加钢筋直径可有效减低锈胀应力,提高结构抗锈裂的能力。与均匀锈蚀理论模型对比结果表明：均匀锈蚀要远小于非均匀锈蚀条件下的临界锈蚀层厚度,均匀锈蚀的计算结果偏于保守。因此,对锈胀问题进行理论分析时,应采用更接近真实锈蚀形态的非均匀锈蚀模型。  相似文献   

高亲和力的农药克百威单克隆抗体的制备及鉴定   总被引：2，自引：1，他引：2  

杨金易  吴青  王弘  潘科  雷红涛  肖治理  郑晓锋  孙远明 《中国农业科学》2007,40(3):518-523

【目的】制备高亲和力农药克百威单克隆抗体，建立克百威残留免疫检测方法，控制克百威残留，保障人民身体健康与保护环境。【方法】合成克百威半抗原BFNB，用人工抗原BFNB－BSA免疫Balb/c小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合，经间接ELISA筛选及显微克隆法亚克隆，分离出阳性细胞株，腹水诱导法及辛酸－硫酸铵沉淀法大量制备及纯化单克隆抗体，间接ELISA法测定抗体滴度及亲和力，间接竞争ELISA法测定抗体特异性。【结果】获得1株稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株5D3，其培养上清和腹水抗体滴度分别为1﹕2.048×103和1﹕1.024×106，其抗体亚类为IgG1，亲和力常数为2.54×109 L•mol-1，IC50为1.18 ng•ml-1，最低检测限为0.01 ng•ml-1。与克百威降解产物呋喃酚的交叉反应率为4.59×10-4％，另外几种结构类似的氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于3.0×10-4％。【结论】此抗克百威的单克隆抗体亲合力高、特异性强，为建立克百威简便、快速、特异的免疫检测方法奠定了基础。  相似文献   

浅谈桑园土壤改良     

王弘 《蚕桑茶叶通讯》2014,(3):22-23

射阳县中耀蚕种场始建于1989年,地处沿海,桑园面积600亩,土壤为盐碱性土质。由于长期施肥结构不合理,滥施无机化肥,导致土壤有机质含量较少,理化性质差;桑叶成熟较缓,易老化,叶质低下,严重影响了蚕儿生长发育,所制蚕种卵质不充实、卵粒偏小,不良卵多,克卵粒数最多达1900粒,蚁蚕生命力低。针对这种情况,从2008开始,蚕种场着重对桑园土壤进行改良。通过三年改良,土壤有了比较明显的好转,养蚕制种质量显著提高。  相似文献   

2000年射阳县晚秋蚕大面积发病调查     

秦翠绿  钱彩萍  黄晓萍  王弘  杨正明 《四川蚕业》2001,29(3):47-48

<正>2000年晚秋蚕,我县发生了历史上罕见的蚕病为害,其发病时间之早,涉及范围之广,病势之重,损失之大,为近年来少有。全县张平单产不足30公斤,比上年同期下降5公斤左右,不仅给蚕农带来惨重的经济损失,也给蚕桑生产造成了较大的负面影响。1原因试析1.1气候因素2000年晚秋蚕期间气候变化频繁,环境条件极为恶劣。四眠前高温干燥,五龄第四  相似文献   

肉犬的宰前宰后检疫     

王弘学 《甘肃畜牧兽医》2002,32(6):45-46

1　宰前检疫1 1　群体检查不论是养殖场 ,还是临时收购的待宰群犬 ,检疫人员在依法实施检疫时 ,首先要查证验物 ,查验其检疫证 (即动物产地检疫合格症明或出县境动物检疫合格证明 ) ,检查物证是否相符 ,检疫证明是否在有效期内、了解其是否来自非疫区、免疫是否在有效期内、是否患病等。同时观察其静、动、食及生理指数等有无异常变化。具体步骤 (以临床感观检查为主 )是 :静的观察 :检疫人员进入圈舍场地后 ,在不干扰犬的情况下 ,用看、听的方法观察犬在自然状态下的精神状态、营养、立卧姿势及呼吸等 ,并注意有无咳嗽、气喘、寒粟、痉挛…  相似文献   

食蟹猴沙门氏菌和志贺氏菌带菌情况调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

王弘义  韦毅 《中国兽医科技》1997,27(8):43-44

  相似文献