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利用噬菌体随机7肽库分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白B细胞抗原表位。以PRRSV BJ-4株N蛋白的单克隆抗体(mAb)GE3作为筛选分子,筛选噬菌体展示的随机7肽库。经序列测定和分子生物学软件分析,表明噬菌体展示的外源氨基酸序列与PRRSV BJ-4株N蛋白的50~55aa的氨基酸序列有极高的同源性。ELISA分析结果表明,筛选到的噬菌体能特异性地与PRRSV阳性血清结合,从而证实了该表位是单克隆抗体GE3所识别的抗原表位。 相似文献
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汽车制动系统零部件多,范围较广,结构又比较复杂,某一部位稍微有点问题,在使用中就会出现毛病.该系统常见的疑难杂症也较多,如果观察不细致,分析不周全,操作检验不规范,要想排除故障是比较困难的.汽车的制动性能是其最主要的性能之一,它直接关系到运输效率和成本以及行车安全,因此汽车具有良好的制动性能是至关重要的.汽车制动系统在各种复杂条件下使用,如环境温度的变化、天气条件的影响和复杂路段的运用等,产生故障的因素自然也多种多样,准确地分析和研究疑难故障的成因,是诊断故障所必须具备的. 相似文献
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为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)诱导体外细胞凋亡的机理,本研究利用荧光定量PCR方法结合流式细胞术检测PEDV感染Vero-E6细胞后凋亡分子的变化情况.荧光定量PCR结果表明,抑制细胞凋亡因子Bcl-2在PEDV感染后基因转录水平迅速升高,在24 h达到峰值后被抑制;而促凋亡因子的蛋白水解酶caspase8和caspase3在PEDV感染后基因转录水平也随之提高,在48 h达到峰值.流式细胞术结果表明PEDV感染细胞48 h后促凋亡分子中的蛋白水解酶Caspases被活化.该研究结果揭示了PEDV感染细胞能够拮抗细胞存活信号通路,引起细胞凋亡,其中凋亡调节因子Bcl-2、caspase3和caspase8在细胞凋亡发生过程中起关键作用. 相似文献
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为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒p MD-Pm和p MD-RHDV,并经菌液PCR和测序鉴定后作为重组质粒标准品。经各反应条件优化后初步建立了检测Pm和RHDV的双重PCR方法。反应条件优化结果显示,该方法的最适退火温度为59℃,扩增kmt1和VP60基因的最优引物浓度均为0.5μL (10μmol/L)。对Pm和RHDV及其他病原包括兔源支气管败血波氏杆菌、产气荚膜梭菌等20种相关病原的特异性试验结果显示,除Pm和RHDV有特异性扩增条带外,其余相关病原均无扩增条带,特异性较强。将两种重组质粒标准品分别10倍倍比稀释并等体积混合后作为模板,经该双重PCR方法扩增。结果显示,该方法对p MD-Pm的检测限为17.9拷贝/μL,对p MD-RHDV的检测限为1 260拷贝/μL,敏感性较高;对两种病原的DNA和cDNA混合物的批内和批间重复性试验结果均一致,重复性较好。对100份临床... 相似文献