基因3型猪戊型肝炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

陈小金  董志珍  赵祥平  王建华  刘洋  王玉玲  陈本龙  肖妍  王乃福  张俊哲 《中国动物检疫》2016,33(7):72-77

对GenBank中基因3型猪戊型肝炎病毒(HEV)代表毒株基因进行序列分析,最终选定ORF3基因的部分序列为目的基因,运用生物信息学软件设计特异性引物和探针,扩增获得目的片段,并构建重组载体pUC-19-ORF3。梯度稀释重组质粒制备标准品,初步建立检测基因3型HEV的实时荧光定量PCR方法。对建立的检测方法进行特异性、敏感性和重复性验证。结果表明,标准品浓度在10~8~10~2 copies/μL范围内线性关系良好,相关系数为0.996。特异性试验结果显示,其它几种常见猪病病原体(猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒)未见典型扩增曲线。敏感性试验证实本方法的最低检测下限为10~1 copies/μL。重复性试验表明该方法对3个标准品检测结果的批内和批间变异系数低于2%。用该方法抽检59份进境猪肉样品,同时用普通RT-PCR方法对这些样品进行符合性试验,结果均为阴性。本研究所建立的检测方法不仅适用于进境猪肉样品中基因3型HEV的监控检测,而且还可用于基因3型HEV的早期临床诊断及分子流行病学调查。  相似文献   

H1和H3亚型猪流感病毒二重TaqMan-MGB探针荧光RT-PCR检测方法的建立     

王建华  陈小金  张俊哲  王玉玲  肖妍  赵丹  谭旭菲  王乃福  陈本龙  董志珍  赵祥平 《中国动物检疫》2016,33(10):90-94

根据H1和H3亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)编码基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和Taq Man-MGB探针,建立了一种检测H1和H3亚型SIV的二重荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法仅对H1和H3亚型SIV呈特异性扩增,对H9亚型SIV、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(SFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)无交叉扩增反应;用该方法检测H1和H3亚型SIV的HA基因的RNA标准对照(SIV-H1-RNA,SIV-H3-RNA),最适线性检测范围分别为3.7×10~1~3.7×10~8拷贝数/反应和3.4×10~0~3.4×10~8拷贝数/反应,最低检出限分别为38和34个拷贝数;该方法的组内试验和组间试验的变异系数均小于2.0%,显示其具有良好的可重复性。用该方法对520份进口猪的鼻拭子样本和78份国内猪鼻拭子样本进行SIV检测发现,进口猪鼻拭子样本的SIV检测结果均为阴性,12份国内猪鼻拭子样本的H1亚型SIV检测结果为阳性,5份国内猪鼻拭子样本的H3亚型SIV检测结果为阳性。本方法的建立为H1和H3亚型SIV检测提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。  相似文献   

波姬红无花果果干制作方法筛选   总被引：1，自引：0，他引：1  

王玉玲  潘一山  李晔 《福建热作科技》2017,42(1)

以新鲜波姬红无花果为原料,采用鼓风干燥、微波真空干燥和真空冷冻干燥等三种方法制作无花果果干,筛选出适宜的干燥方法,并进一步完成干燥的具体方案。试验表明,鼓风干燥、微波真空干燥不适宜进行波姬红无花果的干燥,真空冷冻干燥的效果最好,其中在冻干压力40 Pa,冻干温度65℃,冻干时间24 h的条件下可保持波姬红无花果固有色、香、味、形和营养成分。此外还对干燥前后的无花果的维生素C含量、可溶性糖含量和蛋白质含量进行了测定和对比。  相似文献   

番茄畸形果发生原因新探   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘桂芝  李杰林  李云乐  王玉玲  翟玉兰 《吉林蔬菜》2005,(4):39-39

2002年本所番茄试验分别安排在露地和日光温室内进行,试验面积2×660米2,供试品种13个,中晚熟品种9个,早熟品种4个,除早熟品种和极个别中晚熟品种外,露地番茄出现了多年来罕见的畸形现象,使当年的杂交育种工作无法进行,为了找到此现象的发生原因,对畸形果进行了详细的田间调查与分析研究。1试验材料与方法供试品种:中晚熟品种有意大利F3、瓦尔特、白果-2、96-4、台湾红、B-6、D-22、并番6号、9801-2;早熟品种有并番3号、并番2号、87-3-1、早特-8号,3月8日播种,25日分苗,4月27日囤苗,5月3日定植于露地1.7(亩),5月15日定植日光温室0.3(亩)。…  相似文献   

“三社联动”城市社区治理机制存在的问题及对策研究--以兰州市安宁区为例     

黄银凤  赵一惠  史芳玉  王玉玲  张斌童 《农村经济与科技》2020,(5):277-278

以兰州市安宁区为例,阐述了"三社联动"机制的政策背景与治理作用,探索了关于"三社联动"城市社区治理机制参与安宁区社区治理的运行模式,以及"三社联动"机制试点发展阶段存在的问题,并提出健全考核评价机制、提高居民参与度、加强社区自治运行机制的制度化建设等对策,以便于给"三社联动"模式参与社区治理提供可优化的路径。  相似文献   

猪流行性腹泻的诊断及防治措施     

王玉玲  王丽红 《中国猪业》2017,(11):67-68

猪病是制约养猪业发展的重要因素.其中猪流行性腹泻具有发病急、 传播速度快的特点,且各个年龄段的猪都是易感动物,所以是猪病中需要重点预防控制的一类疾病.该病季节性强,大多数病猪前期症状不明显,发展到后期多呈水样腹泻.本文详细介绍了猪流行性腹泻的诊断方法,并提出相应的防治措施,可供大家参考.  相似文献   

4种牛传染性疾病8种检测方法诊断试剂的测试比对试验     

王玉玲  侯艳梅  姜红  林祥梅 《中国兽医杂志》2009,45(1)

在进出口国签订的输入动物检疫双边协定中,动物疫病的检验主要依据实验室检测结果.实验室检测结果的准确性和可靠性主要由实验室检测能力和诊断试剂的有效性决定.为保证所选择的诊断试剂的有效性,保证我们检疫部门检测结果的可靠性,我们通过连续4年参加澳大利亚初级工业组织的国家质量保证计划(ANQAP)-兽医实验室间能力验证计划,对我国输入输出种牛需要检疫的牛地方性白血病(EBL)、牛布鲁氏菌病(BB)、副结核病(JD)、蓝舌病(BT)等4种传染性疾病进行了诊断试剂的测试比对试验,测试情况报告如下.  相似文献   

农作物病害与气象条件的关系     

张悦  王玉玲 《农民致富之友》2009,(4):21-21

农作物病害的发生与气象条件也有密切的关系，气象条件对病原微生物的发育、繁殖和传播起着重要的作用。1农作物病害和温度的关系病原微生物和其他生物一样，他们的生活活动有一定的温度范围，超过了这个范围，就停止活动。因此把这个范围的两极叫做最高温度和最低温度，在两极之间，还有一个温度范围对微生物的生长发育最有利，叫最适温度。  相似文献   

脱毒冬枣密植早期丰产技术     

王玉玲  杜元军  张运叶  李光辉  周国 《中国林副特产》2008,(4)

对脱毒冬枣密植枣园从栽植、修剪、保花保果、病虫害防治几个方面,实施了一系列先进丰产技术措施,从而达到早期丰产的效果。  相似文献   

农作物病害与气象条件的关系     

张悦  王玉玲 《农民致富之友》2009,(7)

农作物病害的发生与气象条件也有密切的关系,气象条件对病原微生物的发育、繁殖和传播起着重要的作用.  相似文献