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【目的】 设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒（Swine acute diarrhea syndrome coronavirus，SADS-CoV） S、M及E蛋白的多表位疫苗。【方法】 本研究选用IEDB预测SADS-CoV S、M及E蛋白T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ（MHCⅠ）类分子结合表位；用NetMHCIIpan 4.0 Serve预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位；用Immunomedicine Group、IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出重叠表位区域作为优势表位，运用IEDB、AllerTOP v 2.0 Servers筛选出高保守性、非致敏性的优势表位区域，通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力，最后进行基因克隆。【结果】 经筛选后的高保守性、非致敏性优势表位构建的多表位疫苗相对分子质量为35.30 ku，为稳定亲水蛋白，具有良好的抗原性，存在1个N-糖基化位点，在二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和β-转角分别占22.11%、20.35%、50.88%和6.67%。三级结构Ramachandran作图显示优势区域中含有残基数占到90.00%，进行细化后优势区域的残基数增加到91.92%，三级结构突出表位作图也证明多表位疫苗具有良好的免疫原性，分子对接表明多表位疫苗与TLR3具有高亲和力。经密码子优化、反向翻译和基因克隆确保设计的多表位疫苗在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定的表达。【结论】 构建的多表位疫苗抗原可有效表达并可能诱导强烈的T细胞和B细胞免疫应答。本研究为SADS-CoV多表位疫苗的设计提供了一种新的方法，为SADS-CoV多表位疫苗的研发提供了理论依据及数据支持。 相似文献
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案例教学是近年来在研究生课程中广泛开展的一种教学方式，即由传统的老师讲授为主转变为案例分析为主、教师引导学生思考、师生共同参与的教学方式，进而形成教学相长的教学方法。“动物疫病防控”是兽医硕士的重要专业课之一，也是一门理论与实践紧密结合的课程。文章从国内外案例教学的发展及“动物疫病防控”课程特点、案例库建设意义、案例库应用前景等几方面探讨案例教学在动物疫病防控课程教学中的作用。案例教学的应用将促进兽医硕士更好地掌握动物疫病防控相关知识，缩短理论与实践的距离，提高研究生培养质量，其研究成果更有助于丰富国内专业学位教学案例库资源。 相似文献