玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR 检测方法的建立与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

代玉立  甘林  滕振勇  杨静民  祁月月  石妞妞  陈福如  杨秀娟 《中国农业科学》2020,53(3):527-538

【目的】由大斑突脐蠕孢（Exserohilum turcicum）和玉蜀黍平脐蠕孢（Bipolaris maydis）引起的玉米大斑病和小斑病是玉米生产上重要的叶部真菌病害,本研究旨在建立玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法,为玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型田间分布和有性生殖研究提供技术方法。【方法】根据GenBank中已登录的玉米大斑病菌（登录号MAT1-1：GU997138和MAT1-2：GU997137）和小斑病菌（登录号MAT1-1：X68399和MAT1-2：X68398）交配型基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计2种病原菌交配型多重PCR检测特异性引物,采用单因素法对引物的退火温度以及扩增程序中延伸时间和循环数等重要参数进行优化,建立玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法,并对2种病原菌的交配型多重PCR检测灵敏度和特异性进行检验。同时,对田间采集的129株玉米大斑病菌和194株玉米小斑病菌单孢菌株的交配型进行多重PCR检测,以明确建立的交配型多重PCR检测方法的适用性。【结果】建立的多重PCR方法和设计的交配型特异引物StMAT01-2F/R、StMAT02-3F/R、ChMAT01-3F/R和ChMAT02-2F/R可分别扩增出MAT1-1、MAT1-2型菌株大小为816、132 bp（大病斑菌）与490、136 bp（小病斑菌）的特异性目的条带。25 μL多重PCR扩增体系：2×Multiplex PCR Mix 12.5 μL,引物各10 pmol,DNA模板100 ng,退火温度为57.2℃（大病斑菌）和55.0℃（小斑病菌）,35个循环。该多重PCR对玉米大斑病菌MAT1-1、MAT1-2型单孢菌株的检测灵敏度分别为0.1、0.01 ng基因组DNA,而对玉米小斑病菌MAT1-1、MAT1-2交配型的检测灵敏度均为0.1 ng基因组DNA。该交配型多重PCR检测方法对玉米大斑病菌和小斑病菌特异性很强,能够很好地区分玉米大斑病菌和小斑病菌相应的近缘种和14株其他真菌菌株。不同地理来源的玉米大斑病菌和小斑病菌交配型检测结果表明,该多重PCR能够准确地检出129株玉米大斑病菌和194株玉米小斑病菌的交配型,且检测结果与随机抽取的菌株杂交验证结果完全吻合。【结论】构建的玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法灵敏度高、特异性好、操作简便,能够准确、快速地检测出玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型,为玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型田间分布和监测及有性生殖研究提供了可靠的技术方法。  相似文献   

冬绿肥覆盖翻压对土壤碳、氮含量的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

谭英爱  赵秋  田秀平  周丽平  宁晓光  张新建  岳露 《河南农业科学》2020,49(5):81-87

为改善华北地区冬闲田生态问题以及为绿肥资源的合理利用提供理论依据,选取二月兰、毛叶苕子和黑麦草3种冬绿肥,以冬闲为对照,进行了9 a连续定位试验。在冬绿肥翻压前采集植物和翻压后采集土壤样品,测定植株生物量、养分含量以及土壤有机碳、微生物量碳、土壤全氮、土壤硝态氮、土壤铵态氮含量等,研究3种不同冬绿肥生物量及覆盖翻压对土壤碳、氮含量的影响。结果表明,二月兰和黑麦草的生物量显著高于毛叶苕子,分别高出48.17%和40.85%;二月兰和毛叶苕子植株全磷及全钾含量高于黑麦草。3种绿肥处理的土壤有机碳、微生物量碳含量均显著高于冬闲,土壤有机碳含量以毛叶苕子处理最高,为13.97 g/kg,土壤微生物量碳含量以二月兰处理最高,为164.13μg/g。与冬闲相比,3种绿肥翻压均不同程度提高了土壤氮含量。豆科绿肥毛叶苕子处理的土壤全氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮含量均为最高,分别比冬闲提高了26.50%、150.97%、52.92%、83.32%。因此,种植绿肥不仅能充分利用大面积的冬闲田,增加土壤冬季覆盖面积,还能提高土壤有机碳、氮含量等,改善生态环境。  相似文献   

钝化材料对农田土壤Cd形态及微生物群落的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

兰玉书  袁林  杨刚  程蓉  石梏岐  高本汗 《农业环境科学学报》2020,39(12):2743-2751

为探讨钝化剂对土壤Cd生态风险和土壤微生物群落结构的影响,通过田间试验,在轻度Cd污染水稻田中施加钝化剂（海泡石、石灰、秸秆生物炭和螯合铁肥）开展相关研究。结果表明：施加钝化剂使土壤pH值提高0.17~1.29个单位,Cd的可交换态减少29.79%~64.48%。施加海泡石、石灰、秸秆生物炭使得微生物群落的多样性指数（ACE、Chao1、Shannon）增加,但螯合铁肥不利于微生物群落的生长,多样性指数均减少。土壤微生物群落随钝化剂的施加发生显著改变,变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门相对丰度有所增加,芽单胞菌门、绿弯菌门、螺旋体菌门相对丰度均降低。相关性分析表明,pH和Cd是影响微生物群落的关键因素,此外Cd形态也对微生物群落产生了影响。研究表明,施用钝化剂可降低土壤中重金属Cd的潜在生态风险,改变土壤微生物群落结构,使多种微生物群落得到抑制或增强。  相似文献   

烘烤凋萎期失水速度对烟叶质量的影响     

杨树勋  权文彦  李玉良  李琅  孟刚  石阡力 《作物研究》2020,(1):72-75

凋萎期失水速度在烟叶质量的形成过程中具有重要作用,是影响烟叶质量的关键指标。为了优化烘烤工艺,寻找最佳的凋萎期失水速度,以秦烟96为试验材料,2014~2015年在甘肃陇南地区应用变频技术通过风量调节研究了烘烤凋萎期7组失水速度对烟叶质量的影响。试验结果表明,凋萎期失水速度控制在5~7 g∕(kg·h)之间,不但可以让未变黄的烟叶继续变黄,消除青烟,让已变黄的烟叶适度失水,同时降低了变黄后烟叶的水分含量,为烟叶定色创造了条件,有利于防止棕色化反应的发生。  相似文献   

罗曼蛋鸡与苗山乌鸡杂交生产性能研究          下载免费PDF全文

徐科礼  洪开祥  撒石  庞贤  李洪曙  周鹏 《中国畜禽种业》2023,19(4):12-15

为客观评价罗曼蛋鸡与苗山乌鸡杂交后代罗苗乌鸡的生产性能和繁殖性能,该研究挑选优良的苗山乌鸡与罗苗乌鸡作为研究对象,测定其体重体尺、屠宰性能、营养物质以及产蛋率、受精率等指标。结果表明,苗山乌鸡平均产蛋率为41.94%,罗苗乌鸡平均产蛋率为77.01%,罗苗乌鸡比本土乌骨鸡平均产蛋率提高35.07%,罗苗乌鸡比苗山乌鸡产蛋受精率平均高出16.1%;罗苗乌鸡受精蛋平均孵化出壳率与苗山乌鸡（受精蛋孵化出壳率）高出16.62%,可见,罗苗乌鸡新品系产蛋授精率和孵化出壳率都较为理想,能较好地为生产实践服务。  相似文献   

大花序桉幼苗营养吸收及分配规律研究     

吕曼芳  覃祚玉  曹继钊  石媛媛  赵隽宇  潘波 《林业调查规划》2021,46(1)

对大花序桉幼苗生物量及营养元素进行测定,结果表明,大花序桉苗木平均单株生物量大小排序为茎>根>叶。幼苗主要营养含量和吸收积累规律为K>N>P>Fe>Mn>Zn>B>Ca>Cu>Mg。大量元素N、P、K贮量最高的部位均为茎,根部和叶中含量相近。大花序桉苗期叶片对主要营养元素N、P和K的吸收分配间存在相互促进的关系;Mg与Ca,Cu与P、K,Zn与N、K、Cu、Fe,Fe与N呈现互相促进关系;Mn与N、Fe、K、Cu,B与P、Cu为相互抑制关系。据此,大花序桉苗期以氮、磷、钾肥为主,其中要求养分K₂O>N>P₂O₅,并有针对性地添加铁肥、锌肥和铜肥。  相似文献   

工业化肉鸭屠宰加工销售过程细菌污染防控措施     

周丰  周志扬  廖玉英  韦彩妙  廖晓光  何仁春  周岳飞 《现代农业科技》2020,(4)

随着生活水平的提高,食品安全问题越来越受到重视。在食品安全风险因素中细菌污染是非常重要的一项,对食品加工过程中细菌污染的管控具有极其重要的意义。微生物污染主要包括真菌污染、细菌污染、病毒残留等。在肉鸭屠宰加工过程中,细菌污染是最主要的微生物污染形式。这些细菌不仅会影响到产品的外观品质、产品货架期,甚至会导致严重的食品安全事故。传统的鸭肉消费以小作坊、菜市场屠宰为主,卫生条件较差,产品容易受到微生物污染;而工业化的集中屠宰、储运、售卖是肉鸭屠宰加工行业的大势所趋,对工业化肉鸭屠宰加工过程中微生物污染的防控研究,符合人民对食品安全的需求。本文介绍了工业化肉鸭屠宰加工销售过程中细菌污染防控措施,以期为肉鸭安全屠宰加工产业的发展提供参考。  相似文献   

加格达奇市黄芪种植地土壤形态描述及适宜性分析     

李华芝  马锐  侯萌  陈一民  隋跃宇  焦晓光 《中国农学通报》2020,36(17):71-75

黄芪(Astragalus membranaceus)因其药用价值高近年来被大量、无节制采挖,致使野生黄芪资源几近枯竭。探究黄芪适宜生长的土壤,将为人工驯化黄芪提供一定的科学依据。本研究以加格达奇市连续多年人工种植黄芪的土壤为研究对象,系统分析了2个典型土壤剖面的形态特征及土壤养分。结果表明：表层土壤结构疏松,孔隙度较大,土壤颜色较深,干态为黑棕色,润态为黑色;淀积层及母质层土壤结构坚实,孔隙度较小,土壤颜色随着层次加深,颜色逐渐变黄、变棕。表层土壤质地肥沃,多以壤土为主;表层有机质含量高,分别为122.07、110.09 g/kg,占其整个土壤剖面有机质含量的52%和82%,土壤剖面有机质随土层深度的增加呈现一个骤降的趋势;表层土壤全氮含量较高,分别为6.58、8.87 g/kg,而土壤全磷含量较低,主要分布于土壤表层,表层土壤的全磷含量分别为0.07、1.01 g/kg,土壤酸碱度在pH 5.11~6.35之间。黄芪适应生长土壤质地疏松,土壤温度状况为寒冻性、土壤水分状况为湿润,土壤肥沃,表层土壤有机质含量高,全氮含量也较高,而全磷含量较低,土壤呈弱酸性至中性。  相似文献   

多重实时荧光PCR快速检测转基因大豆     

石盼盼  谢文佳  刘燕  王璐  陈蕾  郝莉花 《江苏农业科学》2020,48(18):77-81

采用多重实时荧光PCR技术,对大豆筛选基因35S启动子(cauliflower mosaic virus,CaMV 35S)、NOS终止子(nopaline synthase,NOS)和内源基因Lectin设计合成了多对检测引物和探针,在筛选各基因合适的检测引物和探针的基础上,摸索引物组合和扩增条件,最终确定合适的探针引物组合和试验条件,建立转基因大豆快速初筛技术。该方法可在1 h内同时完成对转基因大豆3个基因片段的实时荧光PCR检测。方法特异性强,灵敏度高,可用于大豆转基因成分的快速检测,大大提高检验效率,可为消费者的食品安全及我国大豆的进出口检验提供有效的技术支持。  相似文献   

1-MCP处理对猕猴桃果实采后生理的影响   总被引：8，自引：4，他引：8  

赵迎丽  李建华  石建新  王春生 《山西农业科学》2005,33(1):56-58

以秦美猕猴桃为试材,在常温下(20±0.5℃),研究了不同浓度1-甲基环丙烯(1-MCP)对果实采后生理的影响。结果表明,与对照相比,1-MCP处理显著抑制了果实乙烯的释放量,有效地延迟了果实的软化,对果实可溶性固形物含量的影响不明显,一定程度上提高了果实的贮藏效果。  相似文献