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通过RT-PCR从浙双758油菜(Brassica napus)种子的总RNA中扩增出黑芥子酶(EC3.2.1.147)MYR J基因,并克隆测序,测序结果在GenBank中的登陆号为EF583560,其翻译的氨基酸序列与黑芥子酶(GenBank中的登陆号为Q00326)仅有一个氨基酸不同,同源性达到99%.克隆载体经Sal I酶解后将MYRI基因片段插入载体pGEX-4T-1中构建成原核表达载体pGEX-4T-1-MYR1,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中.其重组菌株经IPTG诱导表达,在90 kD处有表达量很高的1条带.用0.02 mmol/L IPTG 20℃诱导2 h,得到可溶的GST-MYR1融合蛋白,用10 mg/mL芥子苷作底物,经过检测其比活力为0.003 1 U/mg. 相似文献
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实验通过RT-PCR程序从提取的油菜总RNA中扩增出硫代葡萄糖苷水解酶(又称黑芥子酶,EC3.2.1.147)基因,酶解后插入大肠杆菌表达载体(Escherichia coli)pGEX-4T-1,获得克隆菌株。基因测序在 GenBank中的登陆号为EF583560,翻译的氨基酸序列与已报道的黑芥子酶(GenBank中的登陆号为Q00326)中的一段有一个氨基酸不同,同源性达到99%。经过IPTG诱导表达,在91KDa左右处有表达量很高的一条带。 相似文献
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从水泵和电气设备开机和检修前准备、水泵和电气设备检修、水泵启动、停止和运行与开机和停机等方面介绍加西泵站机组检修与开机注意事项,以供参考。 相似文献
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