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21.
为了揭示猪卵巢卵泡选择性闭锁机制,采用Real time PCR和HE染色方法,检测猪各阶段卵泡颗粒细胞中Fas和FasLmRNA表达和形态学变化;分析比较不同发育阶段卵泡中颗粒细胞Fas和FasLmRNA表达差异及细胞凋亡程度。结果表明,健康的大(5 mm)、中(3~5 mm)、小(3 mm)卵泡,早期闭锁的大、中、小卵泡以及晚期闭锁的大、中、小卵泡壁层颗粒细胞都有Fas和FasLmRNA表达。早期闭锁卵泡颗粒细胞Fas和FasLmRNA相对表达量高于健康卵泡与晚期闭锁卵泡。早期闭锁小卵泡FasLmRNA相对表达量与大、中、小健康卵泡相比均有显著差异(P0.05);状态相同的大、中、小卵泡间Fas与FasLmRNA相对表达量均无显著差异(P0.05);表明Fas/FasL系统在猪卵巢卵泡选择性闭锁过程中,对颗粒细胞凋亡具有重要的调节作用。 相似文献
23.
本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。 相似文献
24.
奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及中药的抑菌作用 总被引:10,自引:1,他引:10
为了研究中药新促孕液防治母畜子宫内膜炎的机理和改进组方,采集南京地区患牛子宫分泌物进行细菌分离及鉴定,并测定了新促孕液及其组分药、其他10味中药及3个复方对主要分离株的体外抑菌作用和最小抑菌浓度。结果,共分离出葡萄球菌10株、链球菌6株、大肠杆菌8株,溶血性和非溶血性大肠杆菌的血清型分别为O159和O110,O159可在68 h内引起小鼠全部死亡,表明葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌是主要致病菌,O159具有致病性。新促孕液对6种分离菌株均有较强的抑制作用,淫羊藿、黄柏、硼砂发挥主要作用;其他单味药以丹参、复方以方2的抑菌作用最强,这些可以作为改进新促孕液组方的依据。 相似文献
25.
为研究猪未成熟期(GV期)和体外成熟期(MⅡ期)卵母细胞玻璃化冷冻后的超微结构变化,随机取新鲜与冷冻-解冻后的GV期和MⅡ期卵母细胞制备电镜标本.GV期和MⅡ卵母细胞分3组进行处理:Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为GV期卵母细胞冷冻组,Ⅲ组为MⅡ期卵母细胞冷冻组.结果表明,所用玻璃化冷冻程序更适用于猪GV期卵母细胞的冷冻保存,GV期冷冻组卵母细胞的二乙酸荧光素(FDA)染色存活率、卵裂率均明显高于MⅡ期卵母细胞冷冻组.透射电镜观察结果发现,猪GV期卵母细胞经玻璃化冷冻后,主要表现为部分卵丘-卵母细胞复合体(COC)发生卵丘细胞脱落,透明带破损,卵丘细胞碎裂,卵丘细胞与卵母细胞间的连接受到破坏,卵母细胞微绒毛断裂、消失、数量减少,卵母细胞内脂滴多呈均质状.而MⅡ期卵母细胞冷冻后,皮质颗粒仍呈单层排列于质膜下,仅可见形态不规则的不均质脂滴,其周围常严重空泡化.试验表明,采用适当的冷冻方案,可以获得少量源于冷冻保存的猪GV期卵母细胞的胚胎.而猪MⅡ期卵母细胞冷冻后,经体外受精未见卵裂,脂滴严重空泡化是其最为明显的变化. 相似文献
26.
用0.25 mL细管和OPS(open pu lled straw)管,对小鼠囊胚进行玻璃化冷冻,以比较2种方法的冷冻效果。结果表明,冷冻-解冻胚胎体外培养24 h后,2组的发育率分别为63.3%(31/49)和71.4%(55/77);OPS法在冻胚发育率上稍优于细管法,但无统计学差异(P>0.05);2组冷冻胚胎的培养发育率均显著低于鲜胚培养组94.3%的发育率(P<0.05)。采用OPS法冷冻小鼠8-细胞胚,其冻后培养发育率为55.6%,似乎要低于囊胚冷冻后的培养发育率,但差异不显著(P>0.05)。 相似文献
27.
山羊腔前卵泡卵母细胞体外发育与体外成熟的研究 总被引:9,自引:0,他引:9
通过比较3种培养基、5个培养系统和4种培养方法对卵母细胞生长率的影响,结果发现,就卵母细胞生长率而言。以MEM HEPES培养液+5%FCS+40μg/mlFSH 20ng/ml IGF-1 2mmol/L cAMP 2mmol/L次黄嘌呤培养系统为佳。在腔前卵泡体外培养过程中,12个卵泡经腔期发育,约占同等培养条件下卵泡九的2%(12/603)。培养卵泡经腔期发育并未改善其卵母细胞的成熟率(0/12)。腔前卵泡卵母细胞经过不同时间的体外培养,发现经12和14d培养结不的卵母细胞中,有81%(47/58)生发泡明显迁移至质膜下;培养14d的卵母细胞中,约16.4%(9/55)产生pbI但不排出,因而在胞质中见到极体;;培养16d得到1枚排出pbI的孤雌激活卵;同时发现培养16-18d卵母细胞退化率明显增高(P<0.01)。推测山羊腔前卵泡卵母细胞体外培养的适宜时间为16d。 相似文献
28.
随着经济与社会的迅猛发展,我国宠物犬数量快速增长,同时也出现了愈益严重的流浪犬问题;城市流浪犬的出现带来了一系列社会问题。本文从该问题的产生原因、负面作用和解决方案入手,讨论运用行为学原理纠正流浪犬所存在的不良习惯和行为,以期为促进流浪犬回归家庭提供参考。 相似文献
29.
猪完整分离有腔卵泡内的卵泡液含量丰富,采用常规石蜡切片制作方法往往很难制作出结构自然完整的卵泡切片。本试验用Bouin氏固定液固定猪分离卵泡72 h,脱水程序采取二甲苯∶乙醇(1∶1)过渡的方法,并适当加长透蜡时间。通过改进卵泡固定、脱水和透明等程序后,成功制成效果优良的猪分离卵泡组织切片。 相似文献
30.
4冷冻与解冻方法本研究采用两步法冷冻保存技术。卵母细胞进行随机分组后,转移到预先在37℃恒温台上平衡的预处理液中,平衡5m in,再转到玻璃化冷冻液中。用做好标记的GLT、OPS、GM P分别吸入含玻璃化液卵母细胞,每管8 ̄12枚细胞。然后直接投入液氮中;实验前2h预先37℃平衡解冻液,从液氮中取出冷冻管,在37℃水浴中晃动10秒,立即取出拭去水珠,将内容物吹入表面皿中(0.5m ol/L蔗糖溶液),然后转入新鲜的蔗糖溶液中平衡5m in,再转入到0.25m ol/L蔗糖溶液中平衡5m in,最后在TCM199液平衡10m in,以充分洗去冷冻保护剂。5卵母细胞冷冻效果评价… 相似文献