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以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清8型分离株Hpn-405株基因组DNA为模板,PCR方法扩增ApxIVA特异性片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建成重组表达质粒pET-ApxIVA3,转入到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导重组蛋白的表达,SDS-PAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为18 ku,与预期片段大小相符;将经过超声破碎的菌液离心取沉淀经尿素洗涤溶解后用镍金属螯合层析柱进行纯化。Western-blot分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。 相似文献
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猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的研究——效力、最小免疫量、免疫持续期和保存期试验 总被引:5,自引:0,他引:5
对中国农业科学院兰州兽医研究所研制的8批猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗进行了效力试验,并对其中的3批疫苗进行了最小免疫量,免疫持续期和保存期试验。结果表明,免疫猪对APP(Actinobacillus pleuropneumoniae)1,3,7血清型强毒攻击的近期保护率分别为91.6%,91.6% 95.8%;免疫剂量为1mL时,对APP1,3,7血清型强毒攻击的保护率分别为33.3%,33.3%和50.0%;免疫剂量为2mL时,保护率分别为88.9%,88.9%和100%;免疫剂量为3mL或4mL时,保护率均为100%,免疫后120d和180d时,攻毒保护率分别为100%,88.9%,100%和88.9%,77.8%,100.%;疫苗经4-8℃保存180d和360d后,攻毒保护率分别为88.9%,100%,100%和100%,77.8%,88.9%。 相似文献
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动物疫病是畜牧业生产的大敌,要发展畜牧业生产就要防治动物疫病。但在疫苗接种时,经常出现正常反应外的其他不利于机体的反应,如废食、皮疹、休克、死亡等,正确处理或避开这些问题,对推行动物疫病的计划免疫,实施强制免疫,保护人畜安全具有十分重要的意义。 相似文献
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用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎 总被引:20,自引:0,他引:20
经戊二醛化-鞣酸化处理的绵羊红细胞用胸膜肺炎嗜血杆菌(HP)抗原致敏,以间接血凝试验(IHA)检测猪传染性胸膜肺炎病血清抗体。致敏红细胞抗原的最佳浓度为100-150μg/mL,超免疫血清的抗体效价达1:512-1:1024,对人工感染14d的猪血清阳性检出率达80%,与猪瘟、猪肺疫、喘气病、猪萎缩性鼻炎阳性血清无效叉反应。 相似文献
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副猪嗜血杆菌感染豚鼠试验及在其体内的分布 总被引:1,自引:0,他引:1
为了评估副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)对豚鼠的毒力以及在豚鼠组织器官的分布,作者采用改进的寇氏法测定了H.parasuis血清5型标准株对豚鼠的LD50,以1 LD50剂量经鼻腔、气管、肺、腹腔、肌肉和皮下接种感染豚鼠,比较不同途径感染H.parasuis对豚鼠致病性的差异;以1 LD50剂量气管接种豚鼠,接种后在不同时间取豚鼠的脑、心、肝、肺、脾和肾组织,制作石蜡切片,用免疫组化技术检测H.parasuis在豚鼠上述组织的分布.结果显示该H.parasuis血清5型标准株的LD50为1.33×109 CFU,LD50的95%可信限范围为1.35×109~1.30×109 CFU;感染试验结果显示,气管、肺和腹腔3个接种途径试验组豚鼠出现了4/8、2/8和5/8的死亡;在气管感染豚鼠6 h后,首先在肺脏组织呈现阳性结果,在感染8 h后,上述组织中都出现了阳性结果.结果表明气管、肺、腹腔和肌肉4个途径都可以使H.parasuis对豚鼠致病,免疫组化检测并结合细菌分离结果表明H.parasuis感染后能侵染肺、心、肝、脾和肾组织,并能突破血一脑屏障而侵染脑组织. 相似文献
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复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌方法的建立及初步应用 总被引:2,自引:1,他引:1
在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立了APP、HPS复合PCR诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增APP的442 bp,和HIS的1090 bp的特异性片段,并应用于临床检测.该方法的建立对临床上进行这2种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义. 相似文献
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1 发病情况
2009年5月到6月湖北省某羊场从四川省某公司(每家每户散养后集中),分3批购得黑山羊847只.第1批羊购进后第3天出现咳嗽并死亡1只,第15天有30%羊群表现出咳嗽症状,第20天约有80%的羊表现为精神沉郁,食欲减退,咳嗽,消瘦同时,口、唇部结痂并出现大批死亡,第2批羊购进后和第1批羊混合饲养,其中第3批的192只羊买回后即转手卖给当地农户.发病后该羊场在没有确诊的情况下凭技术人员养殖经验先后使用了13种药物进行治疗,但疗效不明显.截止2009年8月1日死亡率为24.7%(162/655).2009年8月1日笔者赶到发病羊场,经现场调查、剖检和实验室诊断确诊为羊传染性胸膜肺炎和羊口疮混合感染. 相似文献