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71.
应用抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株建立竞争ELISA(ciELISA)分析方法,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-Kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-Kit标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9955,检测范围为0.1~128.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1;奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%、82.7%,平均批内和批间变异系数均<15%;CAP-Kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无CR;基质对CAP-Kit的检测结果影响不大;CAP-Kit在4℃可保存6个月以上。 相似文献
72.
73.
西马特罗杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备和鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
用重氮化法将牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别与西马特罗(CIM)偶联作为免疫原或包被原,用BSA-CIM免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-CIM包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原超强免疫;取脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIM单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIM mAb,对CIM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-3;融合后筛选出3B11-H4、2A11-G11和4F5-F11共3株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800、1∶1600和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×106、1∶1.02×107和1∶2.56×107,3B11-H4株对CIM的IC50为040ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于02%。本试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIM mAb,为CIM残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础。 相似文献
74.
IBD试纸条对中强毒力苗毒及分离野毒的检测研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以琼扩为对照,应用IBD试纸条分别检测了人工感染鸡、疫苗接种鸡、自然发病鸡3种不同类型的法氏囊样品以及不同的疫苗。毒株测定结果显示,IBD苗毒228E、MB、V877、NF8、QC试纸条均为阳性,琼扩对照均为阴性,分离强毒H4、He3、Y2试纸条及琼扩对照均为阳性。法氏囊样品测定结果显示,自然感染病例,H4、He3、Y2感染鸡,228E、MB、V877、NF8接种鸡两种方法测定均为阳性,QC则为阴性。对法氏囊样品的检测结果证明,IBD试纸条具有特异、敏感、快速的特点,其敏感性高于琼扩的敏感性,为IBD诊断提供了新方法。 相似文献
75.
应用IBD快速检测试纸和琼脂凝胶免疫扩散试验(AGIDT),对不同疫苗免疫鸡检测结果均为阴性,对人工感染强毒鸡最早检出IBDV的时间,试纸检测法为感染后36h,琼脂扩散检测法为感染后96h。试纸检出的最低含毒量为800ELD50,ELISA检出的最低含毒量为400ELD50,琼扩检出的最低含毒量为2 5×104ELD50,试纸检出的敏感性比琼扩提高32~64倍。IBD试纸检测简便、快速、敏感、特异,是诊断鸡法氏囊病的有效方法。 相似文献
76.
旋毛虫基因重组抗原快速ELISA诊断试剂盒的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用旋毛虫基因重组抗原(TSRA)建立了诊断猪旋毛虫病的快速ELISA诊断试剂盒,用TSRA和旋毛虫肌幼虫排泄-分泌抗原(ES)分别对12份人工感染旋毛虫病猪血清进行快速ELISA检测,阳性率为100%。在猪旋行虫病发病区随机采集103份血清和肉样,分别用TSRA和ES作抗原对血清进行快速ELISA检测,结果显示,它们与肌肉消化法的诊断符合率分别为95.12%和96.3%,研究证明,用TSRA组装的诊断试剂盒具有良好的灵敏性,特异性和重复性。 相似文献
77.
鸡传染性法氏囊病疫苗毒株的生物学特性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
鸡传染性法氏囊病 (IBD)是目前危害养鸡业最严重的疫病之一 ,该病在世界各地广泛流行 ,主要侵害雏鸡的中枢免疫器官———法氏囊。临床上主要表现为尖峰式死亡 ,不同发病鸡群死亡率不同 ,死亡鸡具有典型的病理剖检变化。IBD在我国已持续存在 2 0多年 ,由于IBD疫苗及IBD卵黄抗体的广泛应用 ,鸡群暴发IBD导致大批死亡的现象已基本得到控制。然而 ,近几年来IBD的发生和流行出现了新的特点 ,主要表现在感染发病鸡群的日龄范围不断扩大 ,呈现亚临床表现 ,炎症反应弱 ,法氏囊萎缩 ,死亡率低 ,病理变化不典型 ,但免疫抑制严重 ,… 相似文献
78.
<正> 在胚胎移植中,受体与供体发情同期化问题,是胚胎移植能否成功的关键因素之一。我们在胚胎移植综合技术研究中,用15—甲基PGF2α诱导受体母牛同期发情,并进行鲜胚移植,现将研究结果报告于后。材料与方法一、受体牛:受体奶牛在郑州、开封、孟县进行选择,黄牛在中牟县进行选择。选择标准为:1.年龄为1.5—8岁,以2.5—5岁的经产母牛为好。2.黄牛体型要大,体高110厘米以上,后躯发育较好。3.体况健康,营养水平在中等以上。4.生殖器官正常,子宫无炎症,没有屡 相似文献
79.
80.
本研究旨在分离鉴定河南鸡群马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)流行毒株,了解当前MDV分子进化特征并为鸡马立克病(MD)的有效防控提供参考。根据MDV基因组设计了meq、gE、gI、gB、pp38以及132-bp重复序列基因的特异性引物,应用PCR扩增和DNA测序分析对河南焦作土鸡群8份MD疑似病例进行了确诊,并通过鸡胚成纤维细胞(CEF)盲传培养和间接免疫荧光试验(IFA)分离鉴定了3个流行毒株,分别命名为HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103。结果显示,3个MDV分离株均为血清1型(MDV-1)毒株,未发生禽网状内皮增生症病毒(REV)共感染,并且132-bp重复序列基因均为双拷贝。meq、gE和gI基因核苷酸序列比对分析发现,临床病例样本及3个MDV新分离株的meq基因与国内外温和毒或疫苗毒株的meq基因核苷酸序列同源性仅为64.7%~78.8%,但与MDV强毒株的同源性高达98.9%~100.0%;gE和gI基因的核苷酸序列同源性均较高,分别为99.1%~99.9%和99.3%~100.0%。系统发生树分析结果表明,HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103与绝大多数此前分离的河南毒株及国内MDV强毒株同处于一个大的进化分支。研究结果表明,3个分离株HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103很可能是当前河南土鸡群中流行的致病性MDV-1毒株,其确切的致病型及导致免疫失败的原因仍有待进一步深入研究。 相似文献