转水稻条纹病毒NS3本氏烟的抗病性     

吴根土  陈广香  张珈源  胡桥  马明鸽  窦彦霞  李明骏  青玲 《中国农业科学》2019,52(10):1710-1720

【目的】NS3编码的蛋白是水稻条纹病毒（Rice stripe virus,RSV）RNA沉默抑制子。笔者前期研究发现,转NS3本氏烟（Nicotiana benthamiana）对RSV有一定的抗性。为深入揭示NS3在寄主体内的作用机制,本文将进一步探究转NS3本氏烟对其他烟草病害的抗性。【方法】以野生型本氏烟和转NS3本氏烟为试验材料,通过农杆菌浸润法接种马铃薯X病毒（Potato virus X,PVX）侵染性克隆,观察病毒症状,抽提系统发病叶片总RNA,并利用RT-qPCR方法检测病毒的相对积累量;采用灌根接种法分别接种烟草青枯病菌（Ralstonia solanacearum）、烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica var. nicotianae）,观察植株表型并统计发病率和病情指数。【结果】PVX侵染本氏烟后,植株叶片主要表现为花叶、褪绿等症状,NS3表达植株与野生型植株具有相同的PVX症状表现。在接种PVX 10 d后,RT-qPCR检测发现与野生型植株病毒积累量相比,NS3表达抑制了PVX在本氏烟体内的积累水平,两个转NS3株系（NS3-6、NS3-9）中PVX的相对积累量分别为野生型植株的68.17%和81.01%。青枯病菌在野生型植株和转基因植株上均引起萎蔫、猝倒等典型的病害症状,且两者的症状无明显差异。在青枯病菌侵染早期,NS3表达在一定程度上利于病菌的侵染,表现出对青枯病较为敏感;而在接种14 d,野生型植株的发病率为100.00%,病情指数为78.67,而NS3-6、NS3-9株系的发病率分别为95.00％、98.33％,病情指数分别为70.00、73.00;14 d之后发病率和病情指数逐渐升高,而NS3表达株系的病情指数均低于野生型植株。黑胫病菌在野生型植株和转基因植株上均为在茎基部出现黑褐色坏死斑等典型病害症状,且NS3表达也不影响本氏烟的症状表现。在黑胫病菌的侵染初期,NS3-6株系的发病率高于野生型植株;但在整个黑胫病发生过程中,转NS3株系的病情指数均低于野生型植株,在接种12 d,野生型本氏烟的发病率为96.67％,病情指数为77.50,而NS3-6、NS3-9株系的发病率分别为90.00％、86.67％,病情指数分别为64.17、62.08。【结论】通过病原侵染过程观察表明NS3表达在一定程度上影响了烟草病害在本氏烟上的侵染和严重程度,且对不同病原菌的影响不同。  相似文献   

重庆辣椒上烟草轻型绿花叶病毒的分子检测及全基因组克隆分析          下载免费PDF全文

吴根土  徐霞  陈思敏  孙淼  楚成茹  李明骏  青玲 《西南大学学报(自然科学版)》2019,41(5):1-7

辣椒是重庆重要的经济作物,烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus, TMGMV)引起的病毒病对辣椒生产造成了严重影响.为明确TMGMV在重庆辣椒上的发生、分布情况及其基因组特征,从重庆北碚、石柱、潼南和九龙坡4个区县采集29份疑似病毒病样品进行了RT-PCR鉴定,通过分段扩增测序的方法拼接获得病毒基因组全序列并进行了系统进化分析.检测结果表明:29份样品中有9份检测到TMGMV,检出率为31.03%,其中石柱县的检出率最高,为60.00%.序列分析发现,重庆辣椒分离物TMGMV-TN29基因组全序列具有烟草花叶病毒属(Tobamovirus)病毒典型基因组结构特征,由6 356 nt构成.系统进化分析得出,该分离物与TMGMV厦门分离物Xiamen (JX534224)具有较近的亲缘关系,核苷酸序列相似性达到99.75%.  相似文献   

武隆烟区烟草病毒病的病原初步鉴定   总被引：14，自引：0，他引：14  

青玲  刘映红  马丽娜 《西南大学学报(自然科学版)》2005,27(3):319-322

对重庆市武隆烟区田间烟草进行了病毒病病原种类的调查和鉴定。26个烟草样品经ELISA共检测到TMV,CMV,PVY及TuMV等4种病毒。所有样品均感染TMV,且病毒复合侵染严重,其中,以TMV,TuMV,CMV及PVY等4种病毒的复合侵染为主,侵染率达30．77％。ELISA结果表明,复合侵染的样品中TMV含量最高,TuMV含量最低。  相似文献   

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制   总被引：14，自引：3，他引：11  

吴建祥  青玲  周雪平  陈正贤  李德葆 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1999,(2)

用蚕豆萎蔫病毒（ＢＢＷＶ）提纯病毒粒子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得２株ＢＢ－ＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１∶６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ４４．７ｋＤ的外壳蛋白大亚基的特异性抗体．单抗抗原结合位点分析表明４Ｄ１１和３Ｇ１２两单抗作用于同一抗原决定簇  相似文献   

番茄花叶病毒中国分离物的生物学特性及其基因结构分析(英文)     

薛朝阳  周雪平  青玲  李德葆 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1998,(6)

Ｔｏｍａｔｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ（ＴｏＭＶ）ｉｓａｓｐｅｃｉｅｓｏｆＴｏｂａｍｏｖｉｒｕｓ．Ｉｔｗａｓｆｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎ１９０９ｉｎＡｍｅｒｉｃａ．ＴｏＭＶｐａｒｔｉｃｌｅｓａｒｅｓｔｒａｉｇｈｔｔｕｂｕｌｅｓ,ａｂｏｕｔ１８ｎｍｉｎｄ...  相似文献   

柑橘碎叶病毒研究进展     

孙现超  周常勇  青玲  杨水英 《果树学报》2009,26(2)

起源于我国的柑橘碎叶病是严重危害柑橘的一种重要柑橘病毒病,国内外关于柑橘碎叶病毒的研究对于控制该病害起到了重要的作用。概述了国内外关于柑橘碎叶病毒的生物学、分子生物学、病毒的株系和控制方面的研究进展,尤其是对近些年用分子生物学方法研究病毒的基因组和株系序列差异方面的情况作了详细的介绍。并对柑橘碎叶病毒研究仍未解决的问题和进一步深入研究的内容进行了分析探讨。  相似文献   

产几丁质酶烟草内生细菌的筛选及产酶条件研究   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

杨水英  李振轮  青玲  江艳冰 《西北农业学报》2007,16(4):223-227

从健康烟草叶片中筛选出一株产几丁质酶活性较高的内生细菌FEC-1，经16SrDNA基因序列和菌株生理生化特征分析，确定该菌株为环状芽孢杆菌。对FEC-1菌株产酶发酵条件研究表明，该几丁质酶是诱导酶，最佳氮、碳源是酵母膏和2g／L单糖或二糖，多糖效果相对较差，最适初始pH为9．0左右，最适温度为30℃左右。在优化条件下，摇瓶培养60h时产酶达123．16U／mL。  相似文献   

温度对二点叶蝉的发育存活及繁殖的影响     

李雪燕  刘映红  魏劲  青玲 《西南大学学报》2004,26(1)

在 15℃,20℃,25℃,28℃,32℃, 35℃恒温条件下,研究温度对二点叶蝉发育、存活和繁殖的影响.拟合二点叶蝉发育速率与温度之间的关系模型,求出各发育阶段的发育起点温度和发育上限、下限温度,组建不同温度下实验种群特定时间生命表,计算种群增长参数,分析种群增长参数与温度之间的关系.结果表明,在15℃下,卵不能完成发育,在35℃条件下3龄若虫不能存活.二点叶蝉种群增长最适温区为25～32℃.在该温区范围内,内禀生殖力为0.0631～0.0463,周限增长率为1.0561～1.0497,种群存活曲线属于Deevey I型,而在15℃不利条件下,种群存活曲线属于Deevey III型.  相似文献   

武隆烟区烟草病毒病的病原初步鉴定     

青玲  刘映红  马丽娜 《西南大学学报》2005,27(3)

对重庆市武隆烟区田间烟草进行了病毒病病原种类的调查和鉴定.26个烟草样品经ELISA共检测到TMV,CMV,PVY及TuMV等4种病毒.所有样品均感染TMV,且病毒复合侵染严重,其中,以TMV ,TuMV,CMV及PVY等4种病毒的复合侵染为主,侵染率达30.77%.ELISA结果表明,复合侵染的样品中TMV含量最高,TuMV含量最低.  相似文献   

产几丁质酶内生细菌的筛选及对烟草赤星病菌的抑制作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨水英  李振轮  青玲  孙现超  母婷婷  黎群英  江艳冰 《河南农业科学》2007,(6):66-69

从健康烟草叶片中筛选出1株产几丁质酶活性较高的内生细菌FEC-1。FEC-1菌及其代谢产物对烟草赤星病菌菌丝生长均有明显抑制作用,在PDA平板上27℃培养5 d后抑菌带宽为12.6 mm,被抑制的赤星病菌菌落边缘菌丝生长畸形、膨大呈结节状。FEC-1菌代谢产物对病菌孢子萌发呈明显的抑制作用,随代谢产物浓度提高,抑菌能力显著增强,随培养时间延长,抑菌能力降低。但试验中没有观察到菌丝细胞壁溃解、细胞质浓缩、菌丝细胞质凝聚成颗粒状并外渗等显著的几丁质酶作用病原真菌的特征。因此,该菌抑制烟草赤星病菌的机理还有待进一步研究。  相似文献