濒危植物巴东木莲RAPD扩增反应体系的建立     

汤子春  李雪萍  陈发菊  乐超银  姚伟  梁宏伟  戴建武  陈凡  何正权 《福建林业科技》2006,33(1):20-23

以巴东木莲叶片为材料,通过对反应体系中Mg2+、dNTP、Taq酶、模板、引物浓度等影响因素的优化,确定了一套适于巴东木莲RAPD分析的稳定反应体系,即25μl的总反应体系中:模板DNA 100 ng,Mg2+2.1 mM,引物0.7μM,dNTP0.20 mM,TaqDNA聚合酶3 U。  相似文献   

黔东南小香羊与贵州原有其它山羊品种的线粒体DNA多态性比较   总被引：9，自引：0，他引：9  

简承松  张亚平  李通权  廖正录  史宪伟  贾永红  朱文适  余应淮  何正权 《西南农业学报》1999,12(4):86-91

ａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＤｒａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ、ＰｖｕⅡ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＳｍａⅠ、ＳｔｕⅠ、ＸｈｏⅠ１５种识别６碱基的限制性内切酶对黔东南小得羊和贵州原３个地方山头品种的９３只个体的ｍｔＤＮＡ进行分析表明,ＢａｍＨⅠ、ＨｉｎｄⅢ和ＳａｌⅠ３种酶表现多态性;共检出１８种限制性多态型,归纳得到３种单倍型,以单倍型Ⅰ和Ⅱ为基本单倍型。根据此２种基本单  相似文献   

巴东木莲DNA的提取及SRAP-PCR反应体系的正交优化止父优化     

万玉华  余璐璐  李晓玲  陈发菊  梁宏伟  何正权 《湖北农业科学》2008,47(9)

研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法．采用正交试验设计法对影响SRAP—PCR反应的引物浓度、TaqDNA聚合酶的用量、Mg^2＋和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg^2＋、dNTPs、砌酶及引物的不同水平均对PCR反应结果有显著的影响。建立了巴东木莲20μL SRAP—PCR的反应体系为1xbuffer、Mg^2＋浓度为2．0mmol·L^-1、dNTPs浓度为0．25mmol·L^-1、引物浓度为0．45μmol·L^-2、Toq酶为O．5U和模板DNA40ng。适宜的扩增程序为94℃预变性1min,94℃变性1rain,33℃复性1min,72℃延伸1min,10个循环;94℃变性1min,55℃复性1min,72℃延伸1min,30个循环;最后72℃延伸5min。试验表明,该体系重复性好、稳定性强．  相似文献   

濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立     

李晓玲  温国莉  陈发菊  梁宏伟  何正权 《江苏农业科学》2008,(4)

利用正交设计建立和优化适合于濒危植物巴东木莲的ISSR-PCR分子标记技术体系.对影响ISSR-PCR反应的多个因素,包括引物和DNA模板浓度、Taq酶用量、Mg2 和dNTPs浓度以及PCR扩增的退火温度、退火时间及循环次数等进行了优化.结果表明,适于巴东木莲ISSR-PCR反应的分子标记技术体系为:反应总体积20μ1,含2μ1 10×buffer、1μ1 20 mmol/L Mgcl2、4μ1 2 pxaoL/L引物、0.4μ1 10 mmoL/L dNTPs、0.8μ1 5 u/μ1Taq酶及40 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94 oC变性30 8,54 oC复性45 s,72℃延伸1.5min,35个循环,最后72℃延伸7 min.本研究建立的ISSR分子标记技术体系稳定性强,重复性高.  相似文献   

盐胁迫条件下木霉菌肥对小麦抗病性和土壤酶活性的影响     

刘畅  段京涛  张建夫  庞丽  宋昊跃  陈发菊  何正权  张福丽 《华北农学报》2021,36(z1):353-360

为探究盐胁迫条件下木霉菌肥对小麦生长、抗病性、产量以及土壤酶活性的影响.通过小区试验,采用木霉菌肥代替30％化肥与100％施用化肥2种施肥方式,在盐胁迫条件下测定了小麦品种西农979的株高、根长、根数、生理生化指标、病穗率、病情指数、防效、千粒质量和土壤酶活性.结果表明,盐胁迫条件下木霉菌肥的施用与化肥相比显著增加了小麦株高、根长和根数,增加值分别为10.91％,43.45％,42.86％.其次,盐胁迫条件下,施用木霉菌肥显著提高了小麦叶片的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和叶绿素含量,同时丙二醛(MDA)含量和过氧化氢(H2 O2)含量显著低于施用化肥的小麦.再者,施用木霉菌肥的小麦赤霉病的发病率显著低于施用化肥的小麦,对小麦赤霉病的防效达到了88.36％.千粒质量分析表明,施用木霉菌肥小麦籽粒的千粒质量与化肥相比增长了9.5％.另外,小麦根际和非根际的土壤酶活性研究表明,木霉菌肥提高了土壤的脲酶、蔗糖酶、脱氢酶、过氧化氢酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活性.总之,盐胁迫条件下,木霉菌肥通过提高小麦的抗氧化酶活性和叶绿素含量以及改善土壤的生态环境增强了小麦的抗病能力,从而增加了产量和提升了品质.  相似文献   

CRP基因原核表达载体的构建和表达及其免疫原性检测   总被引：2，自引：1，他引：2  

余云芳  姚伟  张昌菊  鲁林  何正权  乐超银  梁宏伟 《江西农业大学学报》2006,28(2):226-229

采用大肠杆菌表达体系来获得C-反应蛋白(CRP)融合蛋白。以pDNR-CRP质粒为模板,用PCR方法扩增获得全长的CRP基因,将其克隆入表达载体pET28 a( )中,再转化到宿主菌BL21(DE3)中,加入IPTG诱导表达,表达产物做SDS-PAGE电泳分析,最后做免疫原性检测。成功地构建了CRP基因原核表达载体pET28 a( )-CRP,经IPTG诱导SDS-PAGE电泳分析表明C-反应蛋白能在大肠杆菌中获得表达,但免疫原性检测初步结果为阴性。结果证明CRP能以融合蛋白的形式在宿主菌BL21(DE3)中得到大量表达,表达产物缺乏免疫原性,其机理还有待进一步试验探讨。  相似文献   

秸秆变成洁净高效燃气     

何正权 《农机推广与安全》2006,(7):46-46

“如果能全部推广，我们麦田里所有的秸秆就会像煤炭、柴油一样宝贵了，”河南省信阳地区罗山县田堰村村民张瑞田摆弄着信阳市某环保节能公司试装的新型环保燃气具，看着一盆盆切碎的秸秆塞进炉子后变成洁净、高效的燃气，高兴地说。  相似文献   

山楠染色体的核型分析     

邓永金  何正权  李雪萍  陈发菊  姚伟  梁宏伟 《福建林业科技》2006,33(3):112-113

对山楠(Phoebe chinensisChun)进行了染色体计数和核型分析。结果表明:山楠染色体数目为2n=24,染色体基数为x=12,核型公式为2n=2x=24=14 m+10 sm。核型属于Stebbins核型分类中的“2B”类型。  相似文献   

种子特异表达启动子的克隆分析及其植物表达载体的构建     

朱亚兰  姚伟  窦建华  乐超银  何正权  陈发菊  梁宏伟  梁薇 《华北农学报》2007,22(2):6-10

根据GenBank已公布的种子特异性的Oleosin蛋白基因启动子序列设计合成引物,利用PCR技术从油菜总基因组DNA中扩增出Oleosin基因启动子序列(SOP),将该序列克隆到pGM-T载体中,经鉴定获得pGM-T-SOP重组载体。测序和序列分析表明,该启动子序列由899 bp核苷酸组成,其核苷酸序列与GenBank中的Oleosin基因启动子序列同源性高达95.6%。分别用限制性内切酶HindⅢ和BamH I双酶切重组质粒pGMT-SOP和双元植物表达载体pBI121,分别回收pGMT-SOP重组质粒中的SOP小片段和pBI121植物表达载体中去掉CaMV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化和鉴定,获得由SOP驱动报告基因GUS的新型植物表达载体pBI121-SOP,为外源基因在油菜种子中的定位表达研究奠定基础。  相似文献   

抗菌肽在水稻抗病研究中的应用     

董肇楠  梅家松  何正权  刘文真 《河南农业科学》2015,(5)

抗菌肽是生物体抵御外来入侵病菌的一系列短肽,在生物界中广泛存在。抗菌肽具有广谱杀菌活性及不易引起病原微生物产生耐药性等优点,可以显著提高动植物的抗病能力。总结了抗菌肽的生物学特性、分类与作用机制,重点介绍了几种不同来源的抗菌肽在水稻白叶枯病、稻瘟病及纹枯病等病害防治方面的应用研究进展,并提出了存在的问题和发展建议。  相似文献