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转sMTPGH基因小鼠胚胎的体外培养 总被引:1,自引:0,他引:1
采用纯化的羊金属硫蛋白 (s MT)启动子指导的猪生长激素 (PGH )基因 (s MTPGH)为显微注射片段 ,将其导入小鼠受精卵原核 ,比较了几种不同培养液对导入外源基因的小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明 ,改进的 M16培养液(用 m M16表示 )能有效克服 2 -细胞阻断现象 ,并使转基因胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段。在 m M16培养液的基础上 ,再加入表皮生长因子 (EGF) ,可使 1-细胞胚胎发育到囊胚的比率进一步提高。在 3种培养液 (M16、m M16、m M16 EGF)中 ,转基因胚胎突破 2 -细胞阻断期的比率分别为 12 %、6 8%、90 % ,发育到囊胚期的比率分别是 0 %、2 0 %、4 3%。采用 PCR方法检测 5 7枚经体外培养发育至囊胚的显微注射胚胎 ,4枚扩增出阳性条带 ,外源基因在囊胚期胚胎的滞留率为 7%。 相似文献
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联合使用电刺激采精与直肠按摩对大熊猫精液采集的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了实施经直肠按摩输精管壶腹部对大熊猫精液采集的影响。B超检查结果显示,大熊猫具有发达的输精管壶腹部,其位于膀胱与直肠之间;单独实施经直肠按摩输精管壶腹部200~400次后,所有个体均出现程度不等的阴茎勃起,平均阴茎周长从按摩前的6.33 cm增加到7.49 cm,但是单独使用直肠按摩还不足以刺激大熊猫的射精反应。为确定联合使用直肠按摩与电刺激采精对大熊猫精液采集的影响,开展了进一步实验;电刺激按常规方式进行,在每个刺激系列结束后接着进行直肠按摩100~200次。结果显示,对于电刺激采精量低于1.68 mL的个体,直肠按摩可显著增加采精量(P<0.05),采精量从(0.36±0.66)mL增加到(0.95±0.99)mL,但是对于电刺激后采精量在1.9 mL以上的个体,直肠按摩不能增加采精量。电刺激后进行直肠按摩可将大熊猫采精成功率从44%提高到88%。 相似文献
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为建立大熊猫IgG的定量双抗体夹心ELISA检测方法(DAS-ELISA),本研究纯化了大熊猫血清中IgG,并将其作为免疫原分别免疫家兔和豚鼠,制备兔抗和豚鼠抗大熊猫IgG高免血清,经优化DAS-ELISA反应条件,建立了以纯化的兔抗大熊猫IgG作为捕获抗体和豚鼠抗大熊猫IgG高免血清作为检测大熊猫IgG的定量DAS-ELISA 检测方法.该方法能检测1.5625μg/mL~100 μg/mL的大熊猫IgG,大熊猫IgG含量(Y)与DAS-ELISA检测OD值(X)之间呈良好的线性关系,Y=4.7186X+0.044,相关系数为0.9911,该方法特异性强,稳定性好,能用于大熊猫IgG的定量检测. 相似文献
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在Ham’s F-10培养液中,添加了不同剂量的己酮可可碱(PF)或血小板激活因子(PAF),与大熊猫冷冻保存后解冻的精子在37℃水浴中孵育,通过测量孵育不同时间精子的活力、存活时间、顶体反应率、质膜完整率和异种穿卵率,来探讨PF、PAF对大熊猫冷冻精子体外受精能力的影响,结果显示:己酮可可碱、血小板激活因子均能影响大熊猫冷冻精子体外受精能力。其中:己酮可可碱以1 mg/mL处理剂量对提高大熊猫冷冻精子体外受精能力效果较好,总存活时间达(15.33±4.73)h,培养4h时体外异种穿卵率达51.44%,培养6 h时体外异种穿卵率为7.49%,与对照组差异极显著(P<0.01),并优于其它处理组;PAF 50 ng/mL处理剂量下的各质量评估指标优于100 ng/mL处理,但用PAF处理精液的时间超过2 h后即引起精子质量的显著下降。 相似文献
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氯胺酮又名开他敏、Ketamine、Ketalat,为一种新的非巴比妥类静脉麻醉剂,主要药理作用为兴奋交感神经中枢.抑制丘脑一皮层系统,选择性的阻断痛觉冲动向丘脑和皮层的传导,能选择地抑制大脑及丘脑,对大脑边缘系统有兴奋作用。在野生动物及其濒危物种的临床上较多采用氯胺酮为首先药物。氯胺酮在对野生动物人工授精前的麻醉是否对动物的排卵以及后阶段的生殖生理及其繁育性能造成负面影响, 相似文献