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采用PCR-DGGE技术分析瘤胃菌群在不同纤维素富集条件下的多样性 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析瘤胃菌群在不同纤维素富集条件下的多样性。试验采用羧甲基纤维素(CMC)培养基、蛋白胨纤维素(PCS)培养基、J培养基和K培养基分别在37和50℃条件下培养瘤胃内容物,使用PCR-DGGE技术、DGGE图谱共性及特异性条带的克隆和测序、聚类分析和主成分分析(PCA)几种方法分析瘤胃菌群多样性。结果表明:37℃条件下,不同培养基的DGGE图谱差异较大,J培养基和PCS培养基间的相似性系数为0.77;J培养基和CMC培养基间的相似性系数仅为0.76。50℃条件下不同培养基的DGGE图谱相似性较高,J培养基和PCS培养基间的相似性系数为0.78;而CMC培养基和PCS培养基间的相似性系数高达0.84。DGGE图谱中共性条带属于解没食子酸链球菌和解脲芽孢杆菌2个菌属,是瘤胃中的优势菌群;而主要的特异性条带属于解没食子酸链球菌、摩氏假单胞菌、产碱杆菌和未培养毛螺旋菌4个菌属。结果提示,不同纤维素富集培养基和温度对瘤胃菌群的多样性有一定程度上的影响。 相似文献
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模拟猪十二指肠高胆盐环境,研究玉米、豆粕和麦麸提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的影响.将约氏乳酸杆菌JJB3、SNZ10 ,罗伊氏乳酸杆菌MNZ8、KNZ4 等4株菌在分别含有玉米、豆粕和麦麸提取物的1.0% 胆盐、pH 7.0的磷酸盐缓冲液中作用4 h ,检测活菌数;另以不同浓度葡萄糖和酵母提取物替代3种提取物,探讨饲料原料提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的作用机制.结果表明:在未添加提取物的对照组,4株乳酸杆菌活菌数极显著下降( P<0.01) ,其中MNZ8对胆盐最敏感,活菌数下降1.74个对数值,而KNZ4的耐受力最强,仅下降1.16个对数值.分别添加3种提取物后,4株乳酸杆菌的胆盐耐受力均显著提高( P<0.05) ,其中,玉米、豆粕和麦麸提取物对JJB3的胆盐保护作用最强,菌株存活率从对照组的78.12%分别提高到99.35%、99.48%、99.74%,对MNZ8的胆盐保护作用最弱.葡萄糖能显著提高乳酸杆菌耐胆盐能力,而酵母提取物作用较弱.说明在胆盐环境中,3种提取物均能显著提高4株乳酸杆菌的耐受力,对乳酸杆菌的保护作用是:麦麸提取物> 豆粕提取物> 玉米提取物. 相似文献
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不同纤维素培养基及温度对体外培养瘤胃细菌多样性的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
为探讨瘤胃细菌多样性,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(Polymerase chain reaction-denaturinggradientgel electrophoresis,PCR-DGGE)技术结合共性及特异性条带的克隆测序和聚类分析及主成分分析,对牛体外厌氧条件下瘤胃细菌在CMC、PCS、J、K培养基及37和50℃培养温度下的多样性进行研究。结果表明:1)37℃条件下不同培养基的DGGE图谱差异较大,虽然具有较高的平均条带数,CMC和K培养基样品分别为20和27条,但各样品间的相似性系数较低,J和CMC培养基间的相似性系数为0.84,J和PCS培养基间的相似性系数仅为0.75。2)50℃条件下不同培养基的DGGE图谱差异较小,平均条带数较低,CMC和K培养基样品均为15条,但各样品间的相似性较高,CMC和PCS培养基间的相似性系数为0.89;而J和PCS培养基间的相似性系数高达0.97。3)DGGE图谱中共性条带序列表明瘤胃优势细菌主要是Streptococcus macedonicus,而特异性条带主要是Escherichia coli、Firmicutes以及Brevundimonas。体外厌氧条件下不同纤维素培养基和温度在一定程度上影响瘤胃细菌的多样性。 相似文献
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植物乳杆菌BS22对黄曲霉毒素B1的吸附效果
及对肉鸡消化道菌群的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为探明植物乳杆菌BS22对黄曲霉毒素的解毒作用及对肉鸡肠道菌群的影响,设饲料添加不同量的BS22试验(不饲喂)和饲料添加BS22饲喂肉鸡试验。在含有50μg黄曲霉毒素B1(AFB1)的1 kg饲料中加入106、107、108 CFU/g植物乳杆菌BS22,于加入0、15、30 d检测AFB1含量。检测结果:加入BS22后,各组饲料中的AFB1含量均显著下降;同一添加量下,随饲料贮存时间的增加,AFB1含量均有所提高。肉鸡饲喂设3个组:I组(对照组),饲喂基础日粮;II组,饲喂基础日粮+50μg/kg黄曲霉毒素B1;III组,饲喂基础日粮+50μg/kg黄曲霉毒素B1+1.0×108 CFU/g植物乳杆菌BS22。试验期为28 d。采用RCR–DGGE比较4周龄肉鸡嗉囊、腺胃、十二指肠、空肠、回肠及盲肠内容物及黏膜细菌群落的结构。对消化道内容物而言,除回肠外,消化道其他部位的内容物的细菌多样性指数、均匀度和丰富度均是III组的高于II组和对照组;聚类图显示,除腺胃和盲肠外,其他部位均是II组与对照组聚在一起,而III组单独存在。对消化道黏膜而言,除空肠和盲肠外,其他部位的黏膜的细菌多样性指数和丰富度均是II组的均高于III组和对照组,且III组和对照组的细菌多样性指数相近或相同;除回肠和盲肠外,其他部位III组和对照组聚在一起,而试验II组单独存在。综合分析,黄曲霉毒素B1对各肠段内容物菌群的作用不明显,对黏膜菌群有较大影响,尤其是对十二指肠的黏膜菌群影响更明显,植物乳杆菌BS22能调节由于黄曲霉毒素B1引起的肠道黏膜菌群失衡。 相似文献