供体细胞状态对牛重组胚发育的影响     

李向臣  跃华  刘鹏  乌云其其格  关伟军  马月辉 《畜牧兽医学报》2008,39(4):513-516

本试验通过比较供体成纤维细胞的不同血清饥饿培养天数、传代次数、冻存复苏等方面试验条件对重组胚发育的影响因素进行了深入的研究。结果表明：供体细胞血清饥饿0、1～3、4～6、7～9d之间重组胚卵裂率没有显著差异（P〉0.05），但囊胚率以饥饿1～3d的最高，与4～6和7～9d组别差异显著（P〈0．05）；以传代0、1～3、4～6、7～9代的细胞作为供体细胞，卵裂率没有显著差异（P〉0.05），桑椹胚率以传1～3代最高，差异显著（P〈0．05）；2代细胞解冻后的卵裂率显著高于4和8代细胞，而以2和6代冷冻解冻后细胞为供体，卵裂率并无明显差异，8代细胞的桑椹胚率显著低于其它组。本试验为提高供体成纤维细胞在卵母细胞中重新程序化及后续重组胚发育等相关研究提供参考。  相似文献   

鸡脐带间充质干细胞向胰岛β样细胞诱导分化的研究     

武爽  关伟军  马月辉 《华北农学报》2012,(4):123-129

为了建立鸡脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)体外培养体系并对其进行生物学特性研究。取11～15日龄鸡胚,脐带分离获得UCMSCs,在L-DMEM培养基中培养,观察其形态。通过传代、生长曲线和周期分析其增殖情况,并研究体外诱导分化潜能。结果表明,鸡UCMSCs可在体外扩增培养,目前传代至P30,表达CD29、CD44和CD71,并具有向胰岛β样细胞诱导分化的潜能。鸡脐带中可以分离出UCMSCs,能够在体外培养,并可诱导分化为胰岛β样细胞。  相似文献   

寿光鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶ADSL基因的表达与克隆化细胞株的筛选     

刘长青  张洪海  文杰  马月辉  关伟军  唐学玺 《畜牧兽医学报》2009,40(7)

利用RT-PCR与RACE方法检测寿光鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌8种组织腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)基因mRNA的差异表达水平,构建ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达,通过构建真核表达载体pEGFP-ADSL,利用脂质体介导法转染寿光鸡成纤维细胞,并进行阳性细胞的克隆化筛选与检测.结果表明:ADSL基因开放阅读框序列长为1455 bp,编码485个氨基酸;5′端非转录调控区具有典型管家基因的特征,在邻近起始密码子-28 bp处发生C→T突变,该突变使该位点变为核呼吸因子2(NRF-2)结合位点;经SDS-PAGE电泳显示,pGEX-ADSL重组融合蛋白在分子量约为80.5 ku处有特异的蛋白条带出现,与预期分子量大小一致,等电点为6.79,纯化后用Western-blot检测为寿光鸡ADSL蛋白.pEGFP-ADSL转染寿光鸡成纤维靶细胞后24、48和72 h,转染率在26.4%～41.2%之间,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中,随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状,经药物筛选和克隆化培养,获得表达pEGFP-ADSL融合蛋白的阳性克隆细胞株,经RT-PCR扩增与Western-blot检测确认ADSL融合蛋白基因已经整合到寿光鸡成纤维细胞的基因组中,获得正常表达.研究结果为揭示我国优良地方鸡种的风味基因结构,研究其生物学功能奠定基础.  相似文献   

骨髓间充质干细胞及其应用   总被引：2，自引：1，他引：1  

吕春荣  叶绍辉  马月辉  顾恩妍  关伟军 《中国畜牧兽医》2009,36(4):114-118

间充质干细胞因具有多向分化潜能及植入体内无排斥反应等特性而被广泛应用于医学领域。作者就骨髓间充质干细胞的生物学特性、分离培养和鉴定及应用作一综述。  相似文献   

不同胎牛血清对动物细胞体外培养的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

吴宏梅  刘帅  包阿东  陆涛峰  刘长青  张文秀  关伟军  马月辉 《中国畜牧兽医》2009,36(4):96-99

本研究针对血清在细胞库构建中的基础性作用,以中国农业科学院北京畜牧兽医研究所的20枚京星矮脚鸡的7日龄蛋胚为试验材料,利用2 种不同的胎牛血清,采用贴壁培养方法,对细胞进行培养、传代及冻存。观察细胞原代及传代后的生长个体数、生长瓶数,细胞形态、冻存前形态及细胞生长曲线。结果表明,不同血清对细胞培养有一定的影响,血清B培养的细胞各方面都优于血清A培养的细胞。本研究结果为细胞体外培养中的血清选择提供了依据。  相似文献   

石歧杂鸡胚胎成纤维细胞的体外培养     

魏亚茹 刘娣关伟军  李景芬 《黑龙江畜牧兽医》2005,(6):10-12

用组织决法对石歧杂鸡胚胎成纤维细胞进行原代和传代培养，探讨禽类胚胎成纤维细胞适宜的培养模式。成功获得较均一的稳定的细胞群体，并成功地对细胞进行了冷冻保存和复苏。对于进行大规模的动物细胞培养具有重要的指导意义。  相似文献   

小尾寒羊耳组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究   总被引：16，自引：2，他引：16  

关伟军  马月辉  丁鸿  于太永  张海艳  梁海青 《畜牧兽医学报》2005,36(5):511-516

随着高产专门化品种的进一步推广，畜禽种质资源危机日益加剧。据统计，全球6165个畜禽品种中，有740(12．00％)个已经灭绝、513(8．16％)个濒临灭绝、1092(17．71％)个濒危、有1407(22．8％)个状况不清楚，只有2395(38．89／5)个处于非危机状态。1999年已经灭绝、濒临灭绝及濒危的品种占品种总数的比例较1995年所占的比例分别增加了82．09％、37．54％、19．02％，世界范围内的畜禽遗传资源危机程度日益加剧(B．D．Scherf，2000)。在我国，据1995年至1999年对全国24个主要畜禽分布省区的391个地方品种的动态信息调查，灭绝品种由1983年的10个增至17个，共148个品种受不同程度威胁，  相似文献   

牛胚胎移植的操作技术及其影响因素     

乔利敏  黄成定  李向臣  关伟军  马月辉 《黑龙江畜牧兽医》2008,(10)

目前,牛的胚胎移植技术已日趋成熟.在我国,胚胎移植技术的发展相当迅速,已接近国际水平,通过超排可获得6枚左右胚胎,鲜胚移植成功率为55%～60%,冻胚移植成功率为50%～60%.但由于我国对胚胎移植技术未形成产业化,每年商业移植的数量还较少,该技术要在我国大面积推行还存在不少问题.因此,本文对影响牛超排的因素进行了分析,为加快牛胚胎移植商业化进程提供了理论参考.  相似文献   

10个绵羊品种的微卫星DNA多态性研究   总被引：9，自引：1，他引：8  

仲涛  马月辉  关伟军  凌英会  郭军  赵倩君  何晓红 《畜牧兽医学报》2008,39(5):555-561

本研究利用FAO和ILRI推荐的21个微卫星引物,结合荧光标记PCR,检测了中国9个地方绵羊（Ovisaries）品种和1个外来绵羊品种的遗传多样性。21个微卫星座位均呈现出高度多态,多态性信息含量和杂合度均表明我国地方绵羊品种有着丰富的遗传多样性。本研究共检测到342个等位基因,有效等位基因数在2．1752～9．4997之间,座位平均杂合度在0．5248～0．8551之间,品种平均杂合度在0．633-0．761之间。聚类关系和主成分分析结果与其起源、育成历史及地理分布基本一致。  相似文献   

中国7个绵羊品种mtDNA D-loop区序列的系统发育与起源研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵倩君  关伟军  郭军  乔海云  何晓红  浦亚斌  傅宝玲  敖红  李奎  马月辉 《畜牧兽医学报》2008,39(4):417-422

为探讨中国绵羊的起源、进化及遗传多样性,对新疆、内蒙古、西藏、云南、宁夏、山东等地区7个地方绵羊品种和1个外来品种共59个体的线粒体D-loop全序列进行了测序分析。7个地方绵羊群体的单倍型多样度（Hd）和核苷酸多样度（π）分别平均为0．9960和0．0306,表明我国地方绵羊品种的控制区遗传变异丰富。系统发育和网络进化分析均将中国绵羊分为3个明显的支系,揭示中国绵羊存在3个独立的母系起源;并发现欧洲摩佛仑羊与支系B聚在一起,表明摩佛仑羊与中国绵羊有较近的亲缘关系。对mtDNA D-loop的3个支系进行核苷酸不配对分布曲线分析和Fu’s中性检验,结果显示3个支系的分布曲线均呈单峰形,且中性检验差异显著,表明绵羊3个支系可能曾经历群体扩张。  相似文献