牛表皮祖细胞的体外分离培养     

黄林生  侯玲玲  李向臣  关伟军  马月辉 《安徽农业科学》2011,39(18):11111-11113,11191

[目的]探索和建立牛表皮祖细胞体外分离与培养体系。[方法]无菌取3个月龄的胎牛皮肤组织,用组织块法培养获得细胞,用L—DMEM培养基（添加5％FBS,0．05mmol／LCaCl2,20ng／mlEGF,20ng／mlbFGF,1％B-27,0．4斗g／mlhydrocortisone）置细胞培养箱内培养。在显微镜下观察细胞的克隆形成能力,免疫细胞化学染色鉴定a6、B1整合素。[结果]获得的细胞有很高的克隆形成能力,a6、p1整合素免疫细胞化学染色阳性。RT—PCR检测结果表明,P,代时Oct4基因有表达,但传代超过P11代时,Oct4基本不表达。[结论]该研究可为进一步采用组织工程技术构建皮肤组织奠定基础。  相似文献   

表皮干细胞分化调控的研究进展     

黄林生  刘英杰  侯玲玲  关伟军  马月辉 《安徽农业科学》2011,39(16):9723-9724,9727

表皮干细胞（Epidermal stem cells,ESCs）主要是位于表皮基底层及毛囊外根鞘隆突部,具有自我更新和增殖分化能力的细胞。通过体外分离表皮干细胞、培养皮肤器官样组织和利用细胞工程等方法研究ESCs的增殖、分化调控过程,加深了对ESCs生物学特征的了解。就近几年来ESCs分化调控机制进行了综述。  相似文献   

绵羊卵巢运输、保存温度及时间对其卵母细胞孤雌发育能力的影响     

乔利敏  郭彤  乔富强  姚华  张京和  雷莉辉  关伟军  侯引绪 《浙江农业学报》2012,24(4):563-566

为研究绵羊卵巢不同运输温度、保存温度及时间对其卵母细胞孤雌发育能力的影响,将采集卵巢随机分别置于(10～15),(20～25),(30～35)℃3种不同温度生理盐水中运输到实验室培养,然后优选较好运输温度将采回卵巢随机分为3个试验组,分别保存在4,(14～18),(25～30)℃生理盐水中,保存15～17h后进行成熟培养并孤雌激活。结果表明:(1)在不同运输温度的卵母细胞中,温度为20～25℃时卵母细胞能够进行最好的发育,其成熟率和囊胚率分别为67.44%,35.93%;(2)将绵羊卵巢在14～18℃保存15～17h,对卵母细胞的成熟率(61.81%)、孤雌激活后囊胚的发育率(29.03%)均无显著影响,而将卵巢保存在4℃或25～30℃却显著降低了卵母细胞的成熟率(41.90%,18.40%)与卵裂率(9.09%,13.04%),没有发育到囊胚。从而得出,绵羊卵巢卵母细胞体外培养的长距离运输适宜温度为20～25℃。卵巢在14～18℃保存过夜,不影响卵母细胞的发育能力。  相似文献   

北京油鸡蛋胚贮存时间与体外成纤维细胞生长状况相关性研究     

于太永  关伟军  马月辉  文杰  杨公社 《中国畜牧兽医》2005,32(5):30-31

将10日龄北京油鸡蛋胚于常温下分别放置10min和24、48、72h后进行组织块贴壁培养。试验结果表明，放置10min和24h的蛋胚培养细胞生长速度和形态无差异，均在组织块贴壁后24h左右长满瓶底，放置48、72h的蛋胚分别于30和36h后长满瓶底。作者建议特殊情况下，用作细胞培养的蛋胚在常温下贮存时间以不超过36h为宜。本试验结果表明，对于远程异地采样时，科学地把握样品的贮存时间及提高体外培养细胞的品质具有重要意义。  相似文献   

探讨微卫星作为地方山羊品种生长性状的遗传标记   总被引：1，自引：2，他引：1  

王建民  孙允东  李宏滨  王桂芝  尚友国  关伟军  马月辉 《畜牧兽医学报》2006,37(10):961-966

采用微卫星技术及最小二乘拟合线性模型，利用崂山奶山羊、济宁青山羊、鲁北白山羊和莱芜黑山羊4个地方山羊品种中的10个多态性微卫星基因座，分析了微卫星基因座及其等位基因对山羊生长性状的关联效应。结果表明：与品种、性别和年龄等因子比较，标记因子对山羊体重和体尺性状的影响较小，但发现BM6404、BM1818、BM812和BM6444基因座对体重有显著影响（P〈0．05或P〈0．01），BM6404、BM1818、BMS12484、MAF70基因座对主要体尺性状有显著影响（P〈0．05或P〈O．01）。BM6404基因座的等位基因130可能对山羊的胸围、体高、尻宽均有正效应；120对胸围有较强的负效应，而对体高、尻长则有较强的正效应；168对尻长、尻宽均表现为负效应。MAF70基因座的等位基因142对体长有正效应，178对体长有负效应。BMS1248基因座的等位基因128对管围有正效应。  相似文献   

家禽胚胎干细胞分离培养的影响因素及其细胞生物学特性鉴定   总被引：1，自引：1，他引：1  

王颖  岳文斌  陈丽娜  张艳艳  关伟军 《中国家禽》2006,28(20):79-82

家禽的胚胎干细胞与遗传工程，转基因技术相结合的综合性研究具有重大的理论意义与实践价值。文章就家禽胚胎干细胞、胚胎生殖细胞研究背景，分离培养的影响因素。生物学特性的检测方法进行了阐述，较为详细地分析了分离培养的影响因素及细胞生物学特性鉴定，并对家禽胚胎干细胞的前景进行了展望。  相似文献   

中国6个山羊群体微卫星标记的遗传多样性分析   总被引：14，自引：2，他引：14  

赵艳红  何晓红  关伟军  浦亚斌  李金泉  马月辉 《畜牧兽医学报》2007,38(1):20-24

利用30个微卫星座位，对中国6个群体山羊（阿尔巴斯、二狼山、乌珠穆沁、阿拉善、辽宁绒山羊和陕南白山羊），共计240个个体的遗传多样性进行了分析。计算了各群体的等位基因频率，并以其为基础获得了各群体的平均杂合度（He）、平均多态信息含量（PIC）和平均有效等位基因数（Ne），分别为0．367～0．467、0．533～0．639、2．571～4．915。分析了群体内和群体间的遗传变异，并根据遗传距离，进行了NJ聚类，结果将6个山羊群体分为两大类。为进一步对山羊品种的保存和利用提供科学的依据。  相似文献   

哺乳动物精子质量检测原理及方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

白修云  王有柱  李向臣  关伟军 《中国畜牧兽医》2007,34(9):24-28

人工授精和体外受精技术的不断发展，以及这些技术在生产实践中如各种濒危野生动物的拯救、哺乳动物繁育、人类不孕症的解决中的应用,使得精子质量评价方法也在不断改善。作者综述了精子的质膜完整性、顶体的状态、染色质状态、线粒体活性、精子DNA损伤检测以及受精能力等指标的检测原理及方法，以便准确预测精子的受精能力。  相似文献   

北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究     

高也凡  宋哈楠  王育南  吴月  牛锐利  宗宪春  关伟军 《中国畜牧兽医》2022,49(9):3372-3381

【目的】 研究北京油鸡角膜缘干细胞（LSCs）分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性。【方法】 取10胚龄健康北京油鸡鸡胚的角膜缘,采用分散酶Ⅱ（dispaseⅡ）联合胰蛋白酶二步法分离细胞,进行体外培养,绘制生长曲线,通过免疫荧光和RT-PCR技术鉴定LSCs特异性标志物细胞角蛋白3（CK3）、CK12、细胞周期调控蛋白p63、ATP结合盒转运蛋白（ABCG2）和细胞角蛋白19（CK19）的表达;通过成骨和成软骨诱导检测其多向分化潜能。【结果】 获得的北京油鸡细胞折光性强、贴壁后呈多角形,生长曲线呈典型的S型,群体倍增时间（PDT）随着代次的升高逐渐下降;免疫荧光检测结果表明,分离的细胞中ABCG2、p63和CK19均呈阳性表达,CK3和CK12不表达;RT-PCR检测结果表明,分离的细胞表达p63、CK19、ABCG2,不表达CD45,说明分离的细胞为LSCs。LCSs成骨诱导分化后,可见被茜素红染色的矿化钙结节,RT-PCR检测结果表明其表达成骨关键基因骨桥蛋白（OPN）和Ⅰ型胶原蛋白（Col-Ⅰ）;成软骨诱导分化后,可见被阿利新蓝染色的软骨组织,RT-PCR检测结果表明其表达成软骨细胞关键基因转录因子性别决定区Y框9（SOX-9）和Ⅱ型胶原蛋白（Col-Ⅱ）。【结论】 本研究成功从10胚龄北京油鸡胚胎角膜缘中分离LSCs,且其具有良好的增殖活力及成骨和成软骨能力,结果可为禽类LSCs的资源保存研究提供参考。  相似文献   

微小RNA功能与癌症形成的关联分析     

包阿东  刘长青  吴宏梅  刘帅  关伟军  马月辉 《中国畜牧兽医》2008,35(2):49-54

微小RNA（microRNA,miRNA）是长度约16~29 nt的非编码RNA。其功能是通过特异性基因沉默导致靶mRNA降解,抑制蛋白质的合成或在细胞分化、发育和凋亡等关键时期调控转录后的基因表达水平。大量研究结果表明,miRNA既可作为诱癌基因参与恶性肿瘤发生和发育过程,又可作为抑癌基因参与控制恶性肿瘤的形成。迄今,试图以治疗癌症为宗旨进行miRNA的功能与癌症形成的关联性研究已成为国内外的热点课题之一。因此,作者就miRNA产生机制、miRNA的生物学功能、与癌症相关的主要miRNA和癌症治疗的展望等问题进行了概括性的论述,其目的在于为从事miRNA的功能与癌症形成关联性研究的同行提供重要的参考资料,促进该项研究取得新进展。  相似文献