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101.
102.
[目的]构建鼠源抗HepG2核糖体展示抗体库。[方法]以培养的HepG2肝癌细胞4次免疫Balb/c小鼠,取脾脏分离总RNA,逆转录合成第一条链,PCR扩增重链可变区和轻链k,经linkerDNA连接形成VH/k核糖体展示抗体库。将VH/k与pMD18-T载体的连接产物转化E.coliTGI,蓝白斑筛选,挑取白色菌落,提取质粒,PCR鉴定,并测序。[结果]VH和k链得到正确的扩增,长度分别为399和6476p,VH/k连接产物正确,连接产物长度为10936p:[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗Hepc2核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗HepG2特异性单链抗体奠定基础。 相似文献
103.
胶体金的应用研究新进展 总被引:8,自引:0,他引:8
胶体金是氯金酸在还原剂作用下聚合成的金颗粒,其特点是:根据需要可制备大小不同的金颗粒(直径在1~150nm之间)。颜色呈桔红色到紫红色。具有高电子密度、介电特性和催化作用.能与多种生物大分子结合。且不影响其生物活性。1962年Feldherr第一次介绍了胶体金可作为一种电子显微镜水平的示踪标记物。Faulk(1971)把胶体金引入免疫化学.这一年被公认是免疫胶体金技术诞生的一年。 相似文献
104.
该研究通过调查、分析主要病毒性传染性病原传入石斑鱼(Epinephelinae)育苗场的风险途径,邀请18位专家,运用德尔菲法进行两轮咨询,对选定病原不同传入途径风险提供重要性评价。初步构建了石斑鱼育苗场传染性病原传入途径风险评估指标体系,其中一级指标4个、二级指标21个。一级指标包含活鱼及卵活动、饵料投喂、水暴露、机械传播共4种风险主题;二级指标包括新引入鱼苗是否隔离检测、饵料鱼虾带毒、养殖供水类型和员工手鞋类消毒等,共同构成传染性病原传入途径的风险因子。该次的德尔菲法专家积极系数及权威程度均较高,第二轮咨询专家的意见已趋于一致,形成的石斑鱼育苗场传染性病原传入途径风险评估指标体系结果可信。 相似文献
105.
106.
107.
在自然感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的罗非鱼(Oreochromis niloticus)成鱼、稚鱼和自然携带无乳链球菌的罗非鱼体内分别获得14株、4株和2株无乳链球菌。临床和组织病理学分析显示,罗非鱼成鱼出现无规则游动,脑、眼眶、鳃和鳍条充血,眼球突出、白浊,内脏器官肿大、充血,以肾小管玻璃样变性、脑膜炎和心外膜炎等组织病理学变化为特征;罗非鱼稚鱼体表无明显症状,但部分内脏器官呈现肿大、充血现象,以脾脏血管区出血、肾小管上皮细胞变性、脑组织炎症反应较轻为其主要组织病理学特征。此外,罗非鱼胃固有层内及稚鱼肝脏组织中有大量的嗜酸性粒细胞浸润,可观察到无乳链球菌在成鱼的脑、心脏以及稚鱼肝脏中增殖;自然携带无乳链球菌的罗非鱼临床症状和组织学病变均不明显。PCR检测发现,各无乳链球菌毒力基因谱相同,但自然感染无乳链球菌的罗非鱼成鱼、稚鱼和自然携带无乳链球菌的罗非鱼的病理学损伤差异显著。 相似文献
108.
中草药对海水动物致病菌体外抑制作用的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以扩散法和稀释法研究了31种中草药对6株海水养殖致病菌的体外抑制作用。结果表明,稀释法比扩散法更适用于中草药体外抑菌研究,扩散法由于受培养基等影响,误差较大,故实验以稀释法结果为主进行分析。同种中草药对不同致病菌抑制作用差异大,其中番石榴(Psidium guajava)、苍术(Atractylodes lancea)、黄芩(Scutellaria)和丁香(Eugenia caryophyllata)对美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida),肉桂(Cinnamomum cassia)和火炭母(Polygonum chinense)对副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)均有强杀灭作用;其次板蓝根(Lsatis tinctoria)、女贞子(Ligustrum lucidum)和白术(Atractylodes macrocephala)的抑菌效果较好,其余中草药抑菌效果差(仅在高浓度下才轻微抑菌)甚至完全无效;同菌株对不同种类中草药的敏感性差异也很明显,且抑菌药物种类少,可见药物筛选试验对针对性用药具有重要意义。稀释法结果显示,相同浓度下同种中草药的药粉比水提取物抑菌效果更好。 相似文献
109.
110.