蓝舌病病毒反向遗传操作系统的建立简     

杨涛  徐青元  孙恩成  冯瑜菲  李俊平  孙亮  孙晶  吴东来 《中国预防兽医学报》2014,(2):85-89

  相似文献   

芸薹属查尔酮异构酶基因家族RNA干扰载体的构建     

曹廷  冯瑜  牛海霞  柴友荣 《广西农业生物科学》2010,(5)

作为类黄酮途径的第二步关键酶,查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)催化四羟基查尔酮成为柚皮素,用于合成各种类黄酮物质,影响多种性状。芸薹属含有多种重要的油料、蔬菜和观赏植物。本研究从甘蓝型油菜克隆了芸薹属CHI基因家族的干扰片段BCHII(761bp),采用NcoⅠ+AatⅡ和BamHⅠ+XbaⅠ双酶切方案分别将其反义片段和正义片段亚克隆到植物RNA干扰(RNAi)平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11674bp的RNAi载体pFGC5941M-BCHII(简称pBCHII),多种PCR检测表明2个片段的插入方向正确,重组载体完整,将其转化根癌农杆菌菌株LBA4404以后获得了工程菌株LBA4404-pBCHII-①。本研究结果将促进研究CHI与芸薹属异花授粉、植株色彩、黄籽和抗逆性等性状的关系和开展相关分子育种。  相似文献   

pFGC5941的改造及芸薹属透明种皮1基因(TT1)家族RNA干扰载体构建   总被引：3，自引：0，他引：3  

马丽娟  冯瑜  江丽萍  申敏  柴友荣 《农业生物技术学报》2010,18(6)

pFGC5941是使用较多的植物RNA干扰载体,但其间隔区过长,间隔区与启动子间可用酶切位点偏少.本研究采用基于甘蓝型油菜(Brassica napus)PAP2基因第2内含子(BnPAP2I2)的新型间隔区取代了pFGC5941的原有PhChsA间隔区,并在新间隔区与启动子之间的多克隆位点处新增了一个AatⅡ切点,改进后的载体取名为pFGC5941M.克隆了芸薹属透明种皮1(TT1)基因家族RNA干扰片段BTT1Ⅰ,将其反义片段和正义片段采用Nco Ⅰ+AatⅡ和BamHⅠ+XbaⅠ分别插入到pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pFGrC5941M-BTT1Ⅰ(简称pBTT1 Ⅰ),复合PCR鉴定表明载体构建成功,转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404后获得工程菌株.pBTT1Ⅰ的构建有助于揭示芸薹属种皮发育和种皮色素积累的机理和探索黄籽性状分子育种.  相似文献   

融资租赁降低多方风险     

冯瑜 《技术与市场》2006,(6):50-51

风险,任何企业或金融机构在进行融资、经营、投资活动时,都将对其重点关注,希望通过策划在保证完成预期计划尽量将其规避、减小。融资租赁,一种新兴的融资方式,基于其独有的三大特点:租赁物所有权与使用权分离;融资与融物的结合;租金的分期回流,大大降低银行,及信托公司、租赁公司、承租企业三方风险。这使企业的融资计划顺利实现, 促进设备的更新和企业的发展,推动经济的快速稳定发展。  相似文献   

低剂量辐照对杂交油菜刺激效应的研究     

刘勇强  陈传波  董绍斌  李华  吴孝波  张恺凯  尹起涛  蒋文宇  冯瑜 《四川农业科技》2019,(2)

运用50Gy、100Gy、150Gy、200Gy、250Gy、300Gy的不同剂量的X-射线对不同杂交油菜种子进行低剂量刺激。并采用随机区组设计,在相同条件下进行同田种植,并进行产量及品质的测定。通过对不同品种辐照后的产量分析,低剂量刺激对杂交油菜具有明显的增产作用。杂交油菜各品种在150Gy刺激下增产最为明显,杂交油菜蓉油18增产最多,增产20.55%。  相似文献   

抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定     

魏鹏  孙恩成  刘霓红  杨涛  徐青元  秦永丽  赵晶  冯瑜菲  王文世  张翠云  吴东来 《中国预防兽医学报》2012,(5):412-414

为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型BTV(BTV1)免疫BALB/c鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTV1的MAb的杂交瘤细胞株(2B10、3D4和4H8)。利用表达BTV1主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后,对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及western blot鉴定,结果显示:2B10和4H8与VP7蛋白反应,而3D4与VP6蛋白反应。同时,IFA鉴定结果进一步表明,3株MAb与24个血清型的BTV均可以发生反应。本研究制备的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。  相似文献   

蔬菜水果中的农药残留分析进展   总被引：20，自引：1，他引：20  

姚建国  周卯星  冯瑜 《山西农业科学》2003,31(2):49-55

较为详细地讨论了蔬菜水果中农药残留的分析方法,着重论述了样品的前处理过程和检测手段。一些新的样品前处理技术,像超临界流体萃取和固相分散正不断应用于农药残留分析中;质谱这一鉴定手段将会得到更广泛的应用;原子发射检测器的选择性好,能够对多元素进行同时分析检测,将会在农药残留的分析中扮演重要的角色;免疫分析法已经在农药残留分析中显示出巨大的潜力。  相似文献   

贵州省安顺市主要农作物品种现状及优化质量对策构思     

伍巨  汪云朗  姜骏猷  陶文国  姚洪  王兴贵  张弢  冯瑜 《种子》2001,(2):76-78

本文对安顺市主要农作物品种现状进行分析，切合实际地提出了该地区主要农作物品种优化质量、优化布局的思路，对农作物生产和结构调整有一定的指导意义。  相似文献   

芸薹属TT19基因家族RNA干扰载体的构建     

陈艳  柴友荣  张迪  冯瑜 《贵州农业科学》2011,39(3)

为构建芸薹属TT19基因家族的RNAi载体,为芸薹属植物的种皮色素、观赏色彩等性状的研究和修饰打基础.利用PCR克隆芸薹属TT19基因家族的RNAi片段,采用双酶切将其反义片段和正义片段分别从T-载体亚克隆到平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区之间和间隔区与终止子之间,形成RNAi载体,转化大肠杆菌并完成PCR鉴定,再转化根癌农杆菌LBA4404得到工程菌株.结果表明:克隆得到200 bp(含人工酶切位点)的芸薹属TT19基因家族RNAi片段BTT19I,其对应于甘蓝型油菜BnTT19-1 mRNA的363～540 bp,其反义和正义片段分别被NcoI+AatII和BamHI+XbaI双酶切亚克隆到pFGC5941M中,得到10552 bp的RNAi载体pFGC5941M-BTT19I(简称pBTT19I).成功构建了芸薹属TT19基因家族的RNAi载体.  相似文献   

甘蓝型油菜MYB4基因RNA干扰载体构建     

王玉明  曹廷  冯瑜  柴友荣 《作物杂志》2010,(2)

拟南芥(Arabidopsis thaliana)MYB4(AtMYB4)编码负调控转录因子,通过对苯丙烷途径中关键酶C4H(肉桂酸4-羟化酶)基因的抑制来调控重要次生代谢物质芥子酸酯的生物合成,在防御紫外线中起重要作用。同为十字花科的芸薹属(Brassica)有多种重要的油料、蔬菜和园林作物,如甘蓝型油菜(B.napus)、白菜(B.rapa)、甘蓝(B.oleracea)和芥菜(B.juncea)等。本研究克隆了甘蓝型油菜MYB4基因家族的RNA干扰片段BMYB4I,将其反义片段、正义片段采用NcoI+AatII和BamHI+XbaI分别插入到改进型植物RNA干扰基础载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pF-GC5941M-BMYB4I(简称为pBMYB4I)。经复合PCR鉴定表明,载体构建成功,并转化根癌农杆菌获得工程菌株。为揭示芸薹属MYB4基因调控芥子酸酯等苯丙烷物质合成的分子机理以及探索抗紫外线分子育种奠定了基础。  相似文献