广东烟草花叶病毒的提纯,鉴定及外壳蛋白基因扩增   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘志昕  李乃坚 《热带作物学报》1993,14(2):79-85

从广东烟草病株叶片中提纯获得一种杆状病毒,用几种血清学方法测定该病毒和烟草花叶病毒有血清学关系,SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳表明该病毒外壳蛋白由一种分子量为17500道尔顿的亚基构成。根据粒体形态,血清学及病毒生化特性,该病毒被鉴定为烟草花叶病毒。从提纯病毒提取RNA,反转录合成cDNA,用人工合成的两段DNA引物通过聚合酶链式反应扩增获得480bp的外壳蛋白基因片断。  相似文献   

多聚酶链式反应检测海南槟榔黄化病   总被引：5，自引：0，他引：5  

罗大全  陈慕容  叶沙冰  刘志昕 《热带农业科学》2002,22(6):13-16

应用多聚酶链式反应(PCR)技术检测海南槟榔黄化病。结果表明：槟榔黄化型黄化病病株样品分别用2组植原体(Phytoplasmas)通用引物（R16mF／R16mR2、R16mF2／R16R2和1067／1068)测定，均出现特异的Phytoplasmas DNA谱带，呈阳性结果；而健康植株相应组织样品(对照)和其它样品则均未出现上述谱带，呈阴性反应。因此，黄化型的槟榔黄化病病株组织内存在植原体，植原体是导致槟榔发生黄化型黄化病的病原菌。  相似文献   

植物抗病基因特征和抗病分子育种策略   总被引：2，自引：0，他引：2  

邓晓东  刘志昕 《热带农业科学》1998,(5):49-54

阐述已克隆的抗病基因特征以及植物抗病的可能内在机制,提出了应用基因工程进行抗病育种时应注意的问题及解决方法。  相似文献   

斯里兰卡木薯花叶病毒 TVM3 分离物侵染性克隆构建及鉴定          下载免费PDF全文

余乃通  冼淑丽  尹慧祥  赵羽涵  郑小宝  刘志昕 《广东农业科学》2023,50(8):136-142

【目的】斯里兰卡木薯花叶病毒（Sri Lankan cassava mosaic virus, SLCMV）是一种对世界木薯产业产生威胁的单链环状 DNA 病毒，为双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）成员。我国木薯品种抗性不明且抗病种质资源缺乏，为进一步探究国内木薯种质资源抗花叶病的遗传背景以及 SLCMV 与宿主的互作机理，本研究开展 SLCMV 侵染性克隆构建及鉴定。【方法】以 SLCMV（TVM3 株系）为对象，将其1.10 倍（mer）长的 DNA-A 和 1.08 倍（mer）的 DNA-B 组分分别构建到 pCAMBIA1301 载体，获得病毒侵染性克隆载体 pCAMBIA1301-DNA-A （pDNA-A）和 pCAMBIA1301-DNA-B （pDNA-B），利用 GV3101 农杆菌介导pDNA-A 和 pDNA-B 共侵染本生烟和拟南芥。【结果】SLCMV 侵染性克隆接种本生烟 14 d 后，系统叶可产生严重的花叶、扭曲等症状；而感染 SLCMV 的拟南芥叶片在 18 d 出现轻微的扭曲症状。提取感病本生烟和拟南芥植株新生叶片总 DNA，PCR 方法均检测到了病毒 DNA-A 和 DNA-B 组分。此外，本生烟的病毒感染率为 100%，而拟南芥的病毒感染率仅为 40%，两者差异显著（P<0.05）。【结论】本研究成功构建了 SLCMV 病毒侵染性克隆，且能侵染本生烟和拟南芥植物，其在本生烟中的病毒感染率高达 96.67%；另外，该 pDNA-A 和 pDNA-B 侵染性克隆载体序列仅为病毒原基因组 DNA-A 和 DNA-B 大小的 1.10 倍（mer）和 1.08 倍（mer），且不含有重复的编码区序列，可为下一步探究国内木薯种质资源抗花叶病的遗传背景以及病毒致病机理研究提供重要基础。  相似文献