当前是否是根除繁殖与呼吸综合征的最佳时机     

金福源 《国外畜牧学(猪与禽)》2010,(3):23-24

关键点：需要养猪生产者和兽医协调一致共同努力清除PRRSv。减少稳定的猪群再次感染本病毒是面临的最大挑战。空气过滤技术是达到根除PRRSv这个最终目标的重要环节。  相似文献   

上海地区鸡传染性支气管炎病毒S2基因的检测及分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘惠莉  陆承平  朱伟云 《中国兽医学报》2006,26(2):126-128,132

参考GenBank发表的传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）S基因序列，设计合成了1对引物，模拟PCR表明，该引物能扩增现已发表的所有IBV的S2基因部分核酸序列，扩增片段493bp。建立的RT—PCR检洲体系检测灵敏度达10～50ELD50，检出限量为0．1ng。采集上海地区12个鸡场疑似IBV禽样品34份进行检洲，阳性为32份，序列分析表明均为肾变型IBV S2基因片段，S2基因同源性较高（≥99％），与其他地区肾变型IBV也有较高同源性，而与腺胃型和呼吸型相比较，序列差异较大。进化分析表明，尽管IBV S2片段变异率明显低于S1基因，但二者表现相同的进化趋势，S2基因亦可反映出IBV的分子变异及毒株间的亲缘关系。  相似文献   

新城疫病毒分子生物学研究现状   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘惠莉  刘洪云 《上海农学院学报》1999,17(1):68-71

本文详尽地介绍了新城疫病毒近几年的研究进展，着重从病原因组特性，编码蛋白，致病机理以及基因工程活载体苗的研究上做了综述概述，为新城疫病毒的深入研究奠定了基础。  相似文献   

脂质体 pGH 的缓释及促增重作用初探     

李震  高明  于瑞嵩  张德福  刘惠莉  周智爱 《上海农业学报》2003,19(4):107-108

初步研究了采用脂质体包裹产物的处理方法进行pGH的缓释。去垂体大鼠的实验结果表明，pGH／脂质体可在3～4d内发挥良好的缓释作用。  相似文献   

LT粘膜佐剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用研究     

唐思静  哈卓  赵艳敏  马勋  刘惠莉 《中国动物传染病学报》2013,21(1):8-11

研究大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白(heat-labile enterotoxin,LTRG)对鸡新城疫(Newcastle disease virus,NDV)疫苗经不同途径接种效果的影响.以NDV LaSota株作为共免疫原,与LTRG重组蛋白经滴鼻、口服及肌肉注射三种途径接种雏鸡,通过血清IgG抗体、HI抗体及粘膜分泌型IgA抗体水平变化,评价不同途径接种LTRG对NDV疫苗的免疫效果的影响.结果显示:①三种途径接种,LTRG均能显著增强NDV疫苗的免疫抗体水平,免疫雏鸡血清抗体和粘膜抗体水平均高于NDV疫苗单独免疫组;②LTRG对NDV疫苗免疫增强作用,以滴鼻接种最显著:二、三免后LTRG+NDV滴鼻组与NDV组血清IgG、粘膜IgA差异均显著(P＜0.01、P＜0.05);LTRG+NDV口服与NDV组血清IgG差异不显著(P＞0.05)、粘膜IgA差异板显著(P＜0.01);LTRG+NDV肌注与NDV组IgG差异不显著(P＞0.05)、粘膜IgA差异显著(P＜0.05);③三种免疫途径比较:血清IgG抗体水平差异均不明显(P＞0.05);滴鼻、口服免疫可诱导雏鸡产生较高的粘膜IgA抗体、血清HI抗体.由此可见:LTRG粘膜佐剂对NDV疫苗免疫增强作用,以粘膜(滴鼻、口服)途径接种效果最为显著,能诱导高水平的粘膜IgA抗体及血清抗体.  相似文献   

猪流感病毒SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用     

张鹏超  师小潇  哈卓  刘永杰  刘惠莉 《中国预防兽医学报》2010,32(10)

为研究猪流感病毒(SIV)感染后SIV在体内的分布规律,本研究设计针对SIV NP基因保守区引物,建立了SIV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法对SIV核酸检测灵敏度为30TCID50,对健康猪肺组织cDNA、猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)核酸呈阴性反应。采用建立的荧光定量RT-PCR方法对人工感染A/swine/Shanghai/1/2007/H1N2(Sw/SH/1/2007)猪进行检测,结果显示:病毒在猪鼻腔粘膜持续存在至感染后第8d;肛门拭子在感染后2d～8d可持续检测到病毒核酸;喉头、气管在感染后第3d可检到病毒核酸,并持续至第10d;肺部淋巴结、脾脏在感染后5d～7d检测到病毒核酸阳性;其它脏器均未检测到病毒核酸,从而确定呼吸道系统及脾脏是SIV定殖的主要场所,SIV感染猪后向外排毒周期约为1周。  相似文献   

IBV野毒感染的诊断     

Pieter Kuhne  孔祥峰  刘惠莉 《国外畜牧学(猪与禽)》2010,30(1):25-28

疾病的诊断可通过综合评价鸡群的病史、临床症状、血清学特征及病原分离和鉴定来完成。血清学监测在一定程度上有助于鉴别出野毒感染的时间和特性。。  相似文献   

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体的原核表达及其活性研究     

唐思静  刘惠莉  马勋  赵艳敏 《中国预防兽医学报》2012,34(9):697-701

为使大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,本实验通过PCR和重叠-延伸PCR扩增,制备了突变体LTR72/G192的基因片段,经酶切和测序结果表明构建的表达载体pLTR72/G192阅读框架正确,而且相应位点氨基酸获得了替换。IPTG诱导表达目的蛋白经SDS-PAGE电泳检测,表达出突变体重组蛋白为约30 ku和10 ku的两个蛋白带,与LTA、LTB亚基分子量相吻合。Western blot检测结果表明两个蛋白亚基均可与His抗体发生特异性反应。目的蛋白经纯化后进行ADP-核酸转移酶试验及Patent-mouse毒性试验检测其酶活性与毒性,突变重组蛋白与野生型LT相比其酶活性和毒性均明显降低。纯化的目的蛋白与鸡新城疫病毒弱毒疫苗联合一起经滴鼻免疫鸡,ELISA结果显示,突变体LTR72/G192能辅助新城疫疫苗在血清和黏膜中产生较高滴度的抗新城疫病毒的IgG和IgA。  相似文献   

核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用     

莫胜兰  刘惠莉  陆承平 《中国兽医学报》2007,27(2):168-171

以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性.敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBV RT-PCR产物.用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBV S2基因确诊为阳性的只有29份.对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性.结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性.  相似文献   

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体的表达及活性研究     

赵艳敏  刘惠莉  邢继兰  潘洁  曹祥荣 《中国预防兽医学报》2008,30(1):30-34,52

利用重叠延伸PCR扩增技术,体外获得大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）突变体LTK63、LTR72和LTG192全基因片段,酶切和测序结果表明构建的表达载体pET30a-LT、pET30a-LTK63、pET30a-LTR72、pET30a-LTG192阅读框架正确,且相应位点氨基酸获得了替换。诱导表达产物用SDS-PAGE检测,野生型LT蛋白及3个突变体均表达出约33．0Ku和13．0Ku的2个蛋白带,与LTA、LTB亚基分子量大小相吻合;Westernblot检测,2个蛋白带均可与抗His抗体发生特异性免疫反应,而13．0Ku的蛋白带还可与抗霍乱毒素（cT）抗体发生免疫学反应。ADP-核糖转移酶活性试验分析,各突变体蛋白酶活性均低于野生型LT蛋白,但仍保留一些酶活性。Patent-mouse毒性试验检测,LTK63、LTR72和LTG192突变体蛋白的毒性均有不同程度降低,LTK63毒性降低最显著,TJTG192蛋白毒性相对较大。  相似文献