山羊痘病毒ORF8～ORF18缺失重组毒株的构建和鉴定     

郑敏  刘棋  金宁一  施开创  梁媛  莫胜兰  屈素洁  陆文俊  胡博 《畜牧兽医学报》2010,41(1)

本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体.采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7～ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18～ORF19间1 355 bp的片段.接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg.然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性.结果成功获得1株敲除掉ORF8～ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg.该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同.表明上述区域是GTPV的复制非必需区.  相似文献   

广西鹅γ干扰素基因的克隆与序列分析     

胡丽萍  胡晓静  付薇  徐贤坤  何丹  刘棋  熊毅 《广西农业科学》2010,41(6):602-605

为进一步研究鹅干扰素（IFN）的分子生物学特性及抗病毒作用机理,提取经刀豆素（ConA）刺激培养的鹅外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增获得鹅IFN-γ基因,将其克隆至pMD18-T载体并进行序列测定分析。结果表明,克隆获得的广西鹅IFN-γ基因与GenBank上已公布的鹅IFN-γ基因核苷酸序列的同源性均高于99.2%、氨基酸同源性均高于98.2%;与其他动物的IFN-γ基因核苷酸及氨基酸序列比较,亲缘关系越远,同源性越低。  相似文献   

γ-干扰素ELISA检测方法在广西牛结核病流行病学调查中的应用     

徐贤坤  熊毅  韦达有  黄小武  蓝纪  黄胜斌  马琳  刘棋 《广西农业科学》2013,(4):667-670

【目的】摸清广西水牛及奶牛结核病的流行情况,为制定净化广西牛结核病防制策略提供参考。【方法】2008～2011年采用皮内变态反应和γ-干扰素ELISA检测方法联合对广西奶牛及水牛开展结核病流行病学调查,共检疫5478头奶牛和1580头奶水牛。【结果】2008～2011年从广西南宁、柳州、北海、钦州、桂林等市累积检测出皮内变态反应阳性奶牛63头、水牛17头,阳性检出率分别为1.15％和1.08％,总体上广西奶牛及水牛结核病阳性率呈现逐年降低的趋势。通过采用自制水γ－干扰素EusA检测试剂盒和Bovigam牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测试剂盒对牛结核病进行检测,发现γ-干扰素ELISA检测的牛结核病阳性率低于皮内变态反应,且准确度高。【结论】对牛群进行结核病检测时,先以变态反应检疫牛群,再结合γ-干扰素ELISA检测进行综合判断,更有利于牛结核病的检测与净化。  相似文献   

外观健康家犬携带狂犬病病毒状况调查   总被引：8，自引：0，他引：8  

陆立权  郭建刚  刘棋  李华明  熊毅  郑敏  邹联斌  兰彬  苏凯 《广西农业科学》2006,37(1):88-89

为了解外观健康家犬携带狂犬病病毒的状况,采用RT-PCR方法对广西13个城市外观健康家犬的脑组织进行了检测,结果阳性率为1.76%(5/283),证明广西外观健康家犬在一定程度上存在带毒现象。  相似文献   

模猪场猪瘟野毒感染情况调查     

胡杰    磨龙春  黄夏  刘棋  陆文俊 《中国畜牧兽医》2009,36(2):105-106

利用ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1626份猪血清进行猪瘟野毒感染情况调查。结果6个规模猪场均存在猪瘟野毒感染,其中母猪感染率为7.86%~29.21%,平均为17.52%,种公猪感染率为0%~23.52%,平均为11.83%,育肥猪感染率为5%~22.45%,平均为15.5%,断奶仔猪感染率为8.24%~18.57%,平均为12.69%。此检测结果与猪场临床发病情况基本一致,病猪多表现为繁殖障碍型、温和型的非典型猪瘟。  相似文献   

狂犬病套式PCR检测技术的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

熊毅  刘棋  朱伟  郭建钢  李华明  刘科 《动物医学进展》2006,27(1):69-71

设计两对引物M1/M2、N1/N2建立起套式PCR,该方法能检测出含0.3LD50狂犬病病毒,比普通PCR的敏感性提高了10000倍,通过27份阳性病料的序列分析,所检测出的病毒全部是狂犬病病毒,具有很强的特异性。表明套式PCR技术具有快速、敏感、特异的特点,可广泛应用于实验室狂犬病的诊断及流行病学调查。  相似文献   

浅谈广西防控禽流感面临的问题与对策   总被引：1，自引：0，他引：1  

陆立权  刘棋 《广西畜牧兽医》2006,22(1):5-8

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类传染病.根据致病性的不同,禽流感可分为高致病性、低致病性和无致病性三种.高致病性禽流感是世界动物卫生组织(OIE)规定的A类传染病,同时被列入国际武器公约动物类传染病名单,我国将其列为一类动物疫病.  相似文献   

一例山羊传染性脓疱的诊疗报告     

邹联斌  郭建刚  李华明  刘棋 《广西畜牧兽医》2006,22(4):170-171

羊传染性脓疱是由痘病毒科副痘病毒属的羊传染性脓疱病毒引起的一种人畜共患传染病,主要危害羔羊,表现急性接触性传染.  相似文献   

SPA协同凝集试验检测猪布鲁氏杆菌病抗原的试验   总被引：3，自引：0，他引：3  

易奇珍  韦庆昌  周国基  陈泽祥  郑列丰  刘棋 《中国兽医杂志》1996,(9)

ＳＰＡ协同凝集试验检测猪布鲁氏杆菌病抗原的试验易奇珍韦庆昌周国基陈泽祥郑列丰刘棋（广西兽医研究所，南宁５３０００１）目前对布鲁氏杆菌病诊断方法多采用血清学、皮内变态反应方法，但能引起以上反应的动物不一定都是体内有菌者，开展检疫屠宰应以体内是否有菌为前...  相似文献   

妊娠母猪日粮添加复合膳食纤维对后代仔猪免疫应激下生长性能的影响     

伍剑  刘棋  熊毅  钟铭  万海峰  李勇  吴德 《饲料工业》2019,(2):31-34

试验旨在研究妊娠母猪日粮添加复合膳食纤维对后代仔猪免疫应激情况下生长性能的影响。采用2×2双因素试验设计,选取丹系经产纯种母猪(3～6胎)24头随机分为四组,每组6头,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ妊娠母猪日粮中添加0%复合膳食纤维,后代断奶仔猪分别注射生理盐水和脂多糖(LPS),试验组Ⅲ和试验组Ⅳ妊娠母猪日粮中添加3%复合膳食纤维(DFC),后代断奶仔猪分别注射生理盐水和LPS,母猪泌乳期及仔猪采食相同日粮。结果表明,试验组Ⅱ和试验组Ⅳ仔猪试验末体重、平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及饲料转化率(FCR)均显著低于试验组Ⅰ和试验组Ⅲ(P0.05),试验组Ⅱ和试验组Ⅳ仔猪血清中免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平均显著高于试验组Ⅰ和试验组Ⅲ(P0.05)。母猪妊娠期添加DFC与注射LPS攻毒对仔猪ADG和血清TNF-α存在显著交互作用(P=0.046;P=0.029),试验组Ⅳ仔猪ADG显著高于试验组Ⅱ(P0.05),试验组Ⅳ仔猪血清TNF-α水平显著低于试验组Ⅱ(P0.05)。母猪妊娠期添加DFC可缓解LPS诱导的后代仔猪免疫应激。  相似文献