昆虫死亡素thanatin与斑点叉尾鮰β-防御素在毕赤酵母中的表达及其抑菌效果评价     

何敬文  陈婷  赵微  扈立伟  任君  刘青  顾天越  包利霞  金天明 《畜牧与兽医》2023,(4):72-78

旨在利用毕赤酵母表达系统表达出具有良好抑菌效果的重组抗菌肽。选定昆虫死亡素thanatin基因和斑点叉尾鮰β-防御素基因(命名为defbl),按毕赤酵母偏好性密码子优化后，将用T2A剪切肽连接的共表达基因(命名为TD)及各单基因分别构建至pMD19-T载体上，经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切后亚克隆至表达载体pPICZɑA上，经SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母GS115感受态细胞中，通过Zeocin抗性及PCR筛选出阳性菌株，利用1%甲醇进行诱导表达，72 h后收集培养基上清液，冻干浓缩并纯化后，进行Western blot检测及体外抑菌试验、溶血性试验。结果显示，成功构建重组毕赤酵母工程菌株GS115-pPICZαA-thanatin、GS115-pPICZαA-defbl和GS115-pPICZαA-TD,通过甲醇诱导成功获得重组蛋白，纯化后Western blot检测结果显示，thanatin组和defbl组分别在2.3 kDa和7.8 kDa处出现特异性条带，TD组同时出现上述2条带，蛋白大小均与预期相符；3个重组蛋白浓度分别为600、300和700μg/mL;体外抑菌试验及溶血性...  相似文献   

我国农业保险发展的问题与对策探析          下载免费PDF全文

刘青  崔瑛 《农业科研经济管理》2005,(4):42-44

一、我国农业保险的现状 我国于新中国成立初期即开设了农业保险，20世纪70年代停止了该项业务。1982年，恢复办理农业保险业务以来，这一险种就处于长期不景气状态。有资料显示，2002年全国农业保险总收人为4．8亿元，占保险业总收入的0．16％，同比下降了20％，是自1982年启动农业险以来下滑幅度最大的一年。全国2．3亿农户，户均保费不足2元。  相似文献   

猫食道裂孔疝的诊治报告     

刘青  艾生权 《中国兽医杂志》2023,(8):117-120

<正>食道裂孔疝为腹腔内脏器(最常见的是贲门和胃底)通过食管裂孔进入尾纵隔引发的疾病，临床中滑动型食道裂孔疝最为常见^[1,2]。患病动物主要的临床特征是反流，其他临床特征可能包括呕吐、多涎、食欲降低和营养不良等^[3]。食道裂孔疝如果发生在动物幼龄时，可直接进行手术治疗；如果在动物年长时出现，常对胃食管反流采取积极的药物治疗(如西沙比利、奥美拉唑),药物治疗无效时，再考虑手术治疗。笔者采用手术方式成功治愈1例4月龄罹患滑动型食道裂孔疝矮脚猫，  相似文献   

不同植物来源单宁和没食子酸对常见致病菌的体外抑菌效果研究     

刘青  彭红艳  马春霞  钟舒红  李军  李常挺  白慧丽  石艳  尹杨燕  王乐平  李凤生  刘朝干  任浪涛  郭青海  董胜美  彭昊  廖玉英 《中国畜禽种业》2022,18(9):37-42

为了解不同植物来源单宁对危害水产畜牧业的主要致病菌（大肠杆菌、沙门氏菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌）的抑菌效果。采用体外共培养的方法,通过分析不同来源植物单宁和没食子酸对4种常见致病菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,来探讨单宁和没食子酸对致病菌的体外抑菌作用的影响。结果显示,与水解单宁（塔拉、栗木、五倍子、橡椀）和缩合单宁（白坚木、荆树皮）相比,没食子酸对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌具有极强的抑菌作用,但是对于金黄色葡萄球菌没有抑菌作用。其余不同植物来源的单宁对4株致病菌均有抑菌效果,对大肠杆菌抑菌效果最好,对产气荚膜梭菌抑菌效果较弱,并且抑菌效果随着单宁浓度升高而增加。塔拉单宁对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌抑菌效果最好,最小抑菌浓度为16mg/mL,对产气荚膜梭菌最小抑菌浓度为64mg/mL。白坚木单宁对致病菌抑菌效果最差,对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度为64mg/mL,对产气荚膜梭菌最小抑菌浓度达到128mg/mL。说明不同植物来源的单宁抑菌效果存在明显差异,塔拉单宁对常见致病菌均有较好的抑菌效果,在水产畜牧业上拥有非常大的潜力和市场前景。  相似文献   

共表达MEL和Ec-cLYZ重组表达质粒的构建及其重组蛋白的抑菌效果评价     

陈婷  何敬文  赵微  扈立伟  任君  刘青  顾天越  包利霞  金天明 《黑龙江畜牧兽医》2023,(9):1-5+12+127

为了表达一种高效低毒的广谱抑菌蛋白，试验通过T2A连接肽连接蜂毒肽(MEL)与斜带石斑鱼c型溶菌酶(Ec-cLYZ)基因，并克隆至pPICZαA质粒上构建重组表达质粒；将鉴定正确的重组表达质粒用限制性内切酶SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母表达菌株GS115感受态细胞中，构建毕赤酵母表达菌株；利用0.5%甲醇诱导表达，收集上清液进行冻干浓缩并纯化，采用Western-blot法检测重组蛋白的表达情况，BCA蛋白浓度测定试剂盒测定重组蛋白浓度，试管二倍稀释法分别检测不同浓度重组蛋白对兔红细胞的溶血活性，牛津杯法评价重组蛋白的抑菌效果。结果表明：成功构建出重组表达质粒pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL、pPICZαA-Ec-cLYZ和pPICZαA-MEL及毕赤酵母表达菌株GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL、GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ和GS115/pPICZαA-MEL;经甲醇诱导，GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL表达出分子质量为16.5,3.4 ku的重组蛋白，GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ表达出分子质量为16.5 ku的重...  相似文献   

人工诱导稀有鮈鲫雄核发育条件研究          下载免费PDF全文

王大贺  刘永嘉  李伟  刘少贞  刘青 《水生态学杂志》2023,44(1):117-124

为了探究单性群体选育途径，定向生产具备特定生长和繁殖性状的苗种，满足繁殖育种需要，进行濒危鱼类保护，以稀有鮈鲫（Gobicypris rarus）为试验对象，采用紫外线-热休克雄核发育技术诱导二倍体的方法，人工诱导稀有鮈鲫超雄个体产生。试验设置14组，1号为空白对照组，2~8号紫外线总辐射剂量分别为60、90、120、150、180、210、230 mJ/cm2，9～14号紫外线-热休克组的总辐射剂量分别为60、90、120、150、180、210 mJ/cm2。处理水温均为(38.5±0.5)℃，热休克2 min。结果表明：(1) 在紫外线总辐射剂量60~230 mJ/cm2时，随着照射剂量的不断增加，紫外线辐照组、紫外线-热休克组的受精率﹑孵化率均有下降趋势；(2)紫外线和热休克处理对受精卵造成一定的损伤，成活率大幅度降低的时间点主要集中在囊胚晚期、肌肉效应期以及出膜前期，少数胚胎由于活力差，存在难以正常脱膜孵化现象；(3)经紫外线或紫外线-热休克处理的受精卵，发育速度稍慢于正常受精卵，且均存在畸形发育卵。通过紫外线-热休克雄核发育技术获得的稀有鮈鲫畸形个体较少，可能为超雄正常形态的个体则更少。研究显示，紫外线和热休克相结合处理鱼类染色体的技术，有望成为人工诱导稀有鮈鲫雄核发育的有效方法。  相似文献   

中国新记录种卡西双壁藻的形态特征与生境调查          下载免费PDF全文

吕绪聪  张曼  董静  高云霓  王盼盼  刘青娟  李学军 《水生态学杂志》2023,44(1):125-130

为探究内蒙古乌梁素海固着硅藻的生物多样性，评价水生态系统健康状态，2020年7月开展了藻类采集与调查工作。调查过程中发现了双壁藻属的一个中国新记录种——卡西双壁藻（Diploneis calcilacustris）；描述了该种的形态特征，分析了乌梁素海水体理化性质和固着硅藻的群落组成。结果表明，卡西双壁藻壳面椭圆形到长椭圆形，两端略呈钝圆形；中央区小，圆形至椭圆形；孔隙粗糙，纵向纹理狭窄；线纹末端有1~2个小孔，与线纹紧密相连，10 μm内有线纹10~12条、孔纹13~15个；壳缝远缝端弯向一侧，近缝端壳缝略扩张。乌梁素海生境指标中，化学需氧量（41.0 mg/L）、总氮（3.2 mg/L）和总磷（0.4 mg/L）含量较高，均属于地表水Ⅴ类标准；根据综合营养指数法评价，TLI(Σ)=72.1>70，乌梁素海为重度富营养化水体。固着硅藻群落结构特征表明，该种所在群落共有固着硅藻89种，其中菱形藻属种类最多，占20.22%，其次为舟形藻，占11.23%；卡西双壁藻为偶见种，丰度占比仅0.4%。该种的发现丰富了中国硅藻种类多样性，可为该属种类的世界地理分布提供新资料。  相似文献   

百香果的高产栽培技术及应用实践研究     

蒋仁娇  黄志强  李伯松  刘青  陈秀龙 《河北农机》2023,(4):112-114

随着人们生活水平的进一步提升，百香果也被越来越多的大众所熟知，而这种水果本身就具备了较高的营养价值，并且香气袭人口感香甜，因广东河源地区的种植面积不断扩大，成为推进广东河源地区乡村振兴的特色产业之一。为提升百香果栽培技术水平，促进广东河源地区百香果产业发展，本文主要针对百香果的高产栽培技术以及其应用实践问题进行了深入的探究，以广东省河源市青州镇地区百香果种植情况为案例进行了探究，从百香果的自然生长环境、选择良种、种苗繁殖技术、土地选择、栽培技术、病虫害防治工作、经济效益等方面总结百香果的高产栽培技术要点，望能为百香果种植技术提供一定的参考，进而从整体上提升百香果种植效益，拉动农户的种植经济。  相似文献