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磷酸丝氨酸转氨酶(Phosphoserine aminotransferase,SerB)是L-丝氨酸生物合成中的关键酶,应用PCR技术从大肠杆菌JM109(E.Coli JM109)中扩增出磷酸丝氨酸转氨酶基因,将其与表达载体pEC 7连接.通过电转化方法,将重组质粒转入黄色短杆菌(Brevibacterium flavum C-11,BfC-11)中,经酶活检测和摇瓶发酵培养,含有重组表达质粒的BfC-11B的磷酸丝氨酸转氨酶的活力和L-丝氨酸产率均比原宿主菌BfC-11有所提高,为构建L-丝氨酸高产基因工程菌的研究奠定了基础. 相似文献
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【目的】对新疆天然胡杨林中昆虫病原线虫(EPNs)进行分离、鉴定并测试其杀虫活性,为胡杨林害虫生物防治提供新的选择。为新疆天然胡杨林中EPNs资源挖掘和基于EPNs的胡杨林害虫生物防治提供资源储备和奠定研究基础。【方法】利用经典方法,诱导及富集EPNs、分子生物学与形态学相结合鉴定,以及不同剂量杀虫测试分析其种属及生物学特性。【结果】在新疆天然胡杨林中存在EPNs,采集地检出率达25%。线虫18S rDNA系统发育树分析其在进化关系上与Steinernema litorale strain Pak.S.P.7 进化关系最近,获得基因登录号No: MK416208;形态学表明其与Steinernema litorale模式株大部分特征值基本吻合,主要区别在于第1代雄虫:体长略长(1 461.01 μm)、排泄孔至头部距离短(86.98 μm)、交合刺短(69.49 μm)、D%(60.45)与SW%158.21 值小于模式株;侵染期幼虫:体长(885.88 μm)和尾长(74.81 μm)短、E%(83.88)值大。共生细菌16S rDNA系统发育树分析与Xenorhabdus bovienii strain Zakharovo 的进化距离最近。杀虫分析表明,在160IJs/Gm (Galleria mellonella) 及其以上处理组36 h之内校正致死率达到100%;对黄粉虫60 h内40IJs/Tm (Tenebrio molitor) 及以上剂量校正致死率超过50%,160IJs/Tm及以上试验组校正致死率超过75%。【结论】在新疆天然胡杨林中发现有EPNs的分布,Steinernema litorale 在采集地是优势种,同时其具有较强的杀虫能力。 相似文献
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口蹄疫病毒3D蛋白对DNA疫苗免疫效果的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
将携带O型FMDV China99株P1-2A、部分2B及3C蛋白酶编码基因的真核表达质粒与在毕赤酵母中表达的纯化FMDV China99株3D蛋白同时经肌肉注射方法接种豚鼠。以MTT法检测豚鼠脾淋巴细胞经植物血凝素(PHA)刺激后的增殖活性,以间接ELISA方法检测血清FMDV特异抗体变化,并以微量中和试验检测中和抗体水平。结果表明,FMDDNA疫苗与3D蛋白共同免疫豚鼠后,抗体水平没有明显提高,攻毒后的保护率为25%。 相似文献
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【目的】研究棉花根际溶磷菌WJP-7发酵培养基优化及防病增产效果。【方法】采用实验室筛选的高效溶磷菌株P.taiwanensis WJP-7为出发菌株,在优化的假单胞菌发酵培养基上增殖培养。【结果】利用正交试验优化摇瓶发酵培养基,培养基配方为蛋白胨20 g/L,MgCl2 15 g/L,K2SO4 1.4 g/L。使活菌数达到3.6×109CFU/mL。摇瓶增菌发酵最优培养基发酵验证试验结果最高活菌数为3.60×109CFU/mL。菌株WJP-7水剂处理对花期黄萎病防治效果为44.57%,絮期防治效果为50.53%。施用WJP-7水剂对棉田土壤除全氮含量增加不显著,对其它养分和pH值均有显著影响(P<0.05)。菌剂增产率为14.35%和19.51%,【结论】优化了台湾假单胞菌WJP-7摇瓶发酵培养基,菌株WJP-7水剂处理对棉花黄萎病防治效果为50.53%,对棉田土壤除全氮含量不显著外,对其它养分和pH值均显著影响(P<0.05),具有明显的增产效果。 相似文献
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【目的】 采用响应面法对红枣黑斑病的拮抗细菌JK1培养基进行优化,提高其发酵产物中芽孢的浓度。为该菌应用提供数据。【方法】单因素实验确定培养基碳氮源物质,Plackett-Burman试验分析发酵培养基中对JK1发酵影响最重要的主要因素;运用最陡爬坡法对主要因素进行试验,获得主要因素的最适范围。通过响应面分析得到主要因素的最优水平。【结果】优化后的培养基组成为:麦芽浸粉 25.00 g/L、葡萄糖 0.57 g/L、大豆蛋白胨 12.5 g/L、NaCl 2.7 g/L、K2HPO4 0.25 g/L 、MgSO4 0.625 g/L。【结论】在最优发酵培养基培养下,多粘类芽孢杆菌的芽孢数提高了3.4倍,达到4.92×109CFU/mL。 相似文献
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目的是从新疆葡萄酒产地筛选适合当地生境的野生酵母菌种资源。采用可培养方法,分离符合条件的酵母菌株,对其生理生化、分子生物学及生长耐受性等各方面进行更细致研究。从酿酒葡萄鲜果、种植土壤及白兰地发酵基质中筛选到酵母菌36株,随后通过WL琼脂培养基初筛,获得符合产酒精特征的菌株10株。对这10株酵母菌进行生长发酵能力的复筛检测,编号为B5、B6、B9的三株菌经过48h的发酵,酒精发酵能力较好。进而结合生理生化及分子测序鉴定,分离的三株菌均属于酿酒酵母。在对供试菌株进行耐受性检测中,B5的酒精耐受性最高可达16%、B6、B9为14%;B5、B9最高可耐受2.0 mol/L KCl,B6最高可耐受2.25 mol/L KCl,同时,三株菌均能耐受50%的葡萄糖浓度,具有较广泛的酸碱适应性,热致死温度都为61℃~64℃之间,耐受10d饥饿后,仍能良好生长。获得3株有良好应用潜能的野生酿酒酵母菌株,为保护该区微生物资源及开发工业菌株具有重要意义。 相似文献
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在2010年上半年,猪O型口蹄疫不断发生,作为国内几个生产厂家的猪口蹄疫现用疫苗种毒的提供者,我组进行了猪源流行毒对该种毒灭活疫苗免疫猪的攻毒保护试验及观察。结果如下:1)、猪源流行毒致猪发病速度慢。猪源流行毒接种猪后,致猪发病的时间在3~5天,而疫苗株致猪发病时间是接种后2~3天;2)、该疫苗毒株能有效抵抗猪源流行毒的攻击,PD50大于6;3)、免疫保护和ELISA抗体水平没有线性相关性;4)、免疫保护与140S抗原量有相关性。 相似文献
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[目的]对戊糖片球菌摇瓶种子培养基进行优化,为高效、优质的微生态制剂产品研制奠定基础.[方法]通过单因素试验和正交试验,对戊糖片球菌摇瓶种子培养基进行优化研究.[结果]获得最优的种子培养基配方为:葡萄糖3.5;、酵母粉1.0;、牛肉膏1.0;、乙酸钠0.6;、磷酸氢二钾0.2;、柠檬酸氢二铵0.2;、硫酸镁0.04;、硫酸锰0.009;、吐温80 1.5 mL、碳酸钙1.0;.培养周期为18 h.[结论]戊糖片球菌在优化的培养基培养下活菌数达到8.6×109 CFU/mL. 相似文献
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以新鲜的青绿饲料作物、牧草等为原料,通过厌氧微生物的发酵制成的青贮饲料,能达到长期保存原料营养特性的目的,在反刍动物的饲养中得到了广泛的应用.在青贮饲料中添加纤维素酶制剂能有效的提高其营养价值,已成为当前动物营养学研究中的一个热点.随着分子生物学技术的不断发展,构建产纤维素酶的基因工程菌引起了人们更多的关注,这样不仅能提高青贮饲料的营养价值,有效地消除抗营养因子,而且具有很高的实用性和经济性.就青贮饲料的特点、纤维素酶的组成和纤维素酶在青贮饲料中的作用,及纤维素酶基因的克隆研究作一综述. 相似文献