蚕蛹的菌相分析     

朱元银  巩晟  任洪林  卢士英 《中国畜牧兽医》2011,38(1):238-240

食用蚕蛹中毒可能与蚕蛹污染、变质、蛋白质变性、产生毒素等有关，其中各种微生物污染及其毒素在此类中毒事件中扮演着重要的角色。针对长春市售蚕蛹的菌相进行了调查分析，为保证蚕蛹的食用安全提供参考依据。  相似文献   

大田软海绵酸致病性及检测方法研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

孟宪梅  卢士英  林超  柳增善 《中国畜牧兽医》2011,38(2):152-156

大田软海绵酸（okadaic acid,OA）属于海洋腹泻性贝毒,是一类常见的赤潮藻毒素,富集于多种海洋软体动物的消化腺内,食用被污染的海产品后会发生腹泻性中毒,中毒症状极易与细菌性胃肠炎混淆,且OA具有长期的致癌效应。作者就大田软海绵酸的结构性质、致病性及检测方法进行综述,以使公众进一步了解OA检测的公共卫生意义。  相似文献   

梅花鹿朊蛋白核心片段的基因克隆与高效表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘东  卢士英  李岩松  李兆辉  王光明  张媛媛  周玉  宋杰  柳增善  任洪林 《中国畜牧兽医》2012,39(3):78-80

本试验根据梅花鹿朊蛋白基因序列设计引物,利用PCR的方法从梅花鹿基因组DNA中扩增朊病毒蛋白酶抵抗区域PrP^res,将该片段分别与表达载体pET-Trx和pET-His连接,构建重组表达载体pET-Trx-PrP^res和pET-His-PrP^res。分别将两个重组表达载体转入E.coli BL21(DE3) plys宿主菌中,37 ℃诱导4 h,经SDS-PAGE分析,Trx-PrP^res和His-PrP^res表达量分别为38.2%和30.1%。  相似文献   

小鼠CD40胞外段的原核表达及多克隆抗体的制备     

曹旗  潘悦  郑宇  王菡  任洪林  胡盼  李岩松  周玉  柳增善  卢士英 《湖北农业科学》2020,59(6):130-134

为了探讨CD40抗体与CD40结合对B细胞应答小分子半抗原的增强作用,利用TRIzol法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,并反转录成cDNA;根据CD40的胞外段CDS设计引物,通过PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1-CD40表达载体,进行原核表达及多克隆抗体制备。结果表明,成功扩增了522 bp的目的基因,表达并纯化获得了45 ku的CD40重组蛋白,多克隆抗体抗体不但可与重组蛋白结合,与小鼠脾脏天然CD40蛋白也可以特异性结合。说明CD40重组蛋白表达成功,且制备的抗体有望模拟CD40L为B细胞活化提供第二信号。  相似文献   

拟态弧菌OmpK基因的克隆及原核表达     

李研东  李菲  卢士英  任洪林  周玉  朱元银  宫彬彬  柳增善 《中国畜牧兽医》2009,(6)

克隆拟态弧菌(Vibrio mimicus)OmpK(outer membrane protein K)基因并进行相关序列的分析.根据已发表的拟态弧菌OmpK基因序列设计合成引物,以拟态弧菌CGMCC 1.1969标准株的基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得801bp片段并测序,序列已提交至GenBank(GenBank登录号为FJ462707).拟态弧菌OmpK序列比对结果显示,溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、河弧菌OmpK基因序列的同源性均大于78%.该基因编码1个含267个氨基酸残基的蛋白质,预测分子质量为29.6 ku.利用基因工程方法将该基因片段定向克隆至表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达,表达后的OmpK蛋白分子质量约为28 ku.  相似文献   

适配子筛选中随机寡核苷酸文库的构建和PCR条件的优化简     

田瑞云  卢士英  李琳  吴宗澄  任洪林  周玉  李岩松  胡盼  柳增善  王光明 《中国畜牧兽医》2014,41(1):61-65

本试验旨在构建用于核酸适配子筛选的随机寡核苷酸文库并对筛选过程中的PCR条件进行优化。利用Primer Premier 5.0构建了随机寡核苷酸文库并据文库两端固定序列设计引物,对对称PCR和间接不对称PCR中的上、下游引物的比例、模板量、退火温度、循环数等条件进行优化并验证其重复性,得到了对称PCR和间接不对称PCR的最佳反应条件,获得较理想的dsDNA和ssDNA并具有良好的重复性。本试验成功构建了寡核苷酸文库,优化了PCR条件,为适配子筛选和后续试验奠定了一定的基础。  相似文献   

产纤维素酶的牛源纤维化微小菌分离鉴定及生物学特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

章沙沙  赵强  卢士英  徐健峰  孙晓丽  柳增善 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2020,41(5):29-35,51

  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒流行株Nsp2基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

闫东明  卢士英  任洪林  周玉  宫彬彬  郑鑫  杜运升  王光明  柳增善 《中国畜牧兽医》2010,37(9)

采用RT-PCR方法,从吉林省部分地区猪场的病料中扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的Nsp2基因并测序.应用DNAStar 7.0、ClustaⅨ 1.83、MEGA 4.0软件对测序结果进行分析,并与NCBI上已登录的PRRSV代表毒株的Nsp2基因进行序列比对,结果显示,得到的Nsp2基因与VR-2332、CH-1a等代表毒株的一致性为62.0%～87.5%,与国内高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB2等的一致性为97.8%～98.9%;氨基酸序列比对结果显示与VR-2332、CH-1a等代表毒株的一致性为34.4%～59.0%,与国内高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB2等的一致性为95.1%～98.4%.因此,引起吉林省部分地区猪场发生猪繁殖与呼吸综合征的PRRSV与国内流行的高致病性PRRSV毒株亲缘关系较近.  相似文献   

乳品中大肠杆菌PMA-qPCR活菌检测方法的建立     

盖冬雪  任洪林  卢士英  胡盼  孟宪梅  刘熙  宋德刚  金雯  张嵩  常江  刘艳艳  柳增善 《中国畜牧兽医》2016,43(2):493-498

本试验旨在建立一种乳品中大肠杆菌PMA-qPCR活菌检测方法.优化qPCR检测方法,探究菌浓度为1×10⁸ CFU/mL的大肠杆菌活菌悬液、热致死菌悬液细胞数来确定不同的PMA剂量、暗孵育时间、曝光时间对死菌抑制效果的影响,确定最佳PMA处理方案.结果表明,qPCR检测可特异性扩增大肠杆菌,1×10⁸ CFU/mL的大肠杆菌经90 ℃水浴30 s全部致死后,采用10 μg/mL的 PMA暗孵育15 min后冰上曝光10 min为最佳处理方案,这种处理方案可最大程度抑制死细胞信号,而对活细胞几乎没有影响,样品中微生物初始浓度不低于1×10⁸ CFU/mL时较稳定,得到标准曲线回归方程y=-3.356x+47.413,R²=0.9989,最低检测限为10³ CFU/mL,加标样本检测结果与实际相符.该方法为利用PMA-qPCR检测食品中的活大肠杆菌杆菌奠定了基础.  相似文献   

抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备、纯化及其特性     

于光  卢士英  李岩松  周玉  任洪林  谭建华  柳增善 《中国兽医学报》2006,26(6):639-641

用大田软海绵酸与人IgG的偶联物OA-IgG作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规细胞融合技术将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0融合,用间接竞争ELISA方法对融合细胞所分泌抗体的特异性进行筛选。经过3次克隆,获得1株可稳定分泌抗OA的杂交瘤细胞株3C5,其染色体数为50±2,所分泌抗体属IgG1亚类,相对分子质量是159390,抗体亲和常数为9.8×108L/mol,滴度达2.56×106。  相似文献