鸡源豚鼠气单胞菌的分离鉴定及药敏试验     

赵桂新  张闫  白和平  陶勇  刘畅  张志强  吴同垒  史秋梅 《黑龙江畜牧兽医》2023,(10):96-101+140

2021年7月份，河北省昌黎县某蛋鸡场130日龄左右海兰褐蛋鸡发病，主要临床症状为眼睑肿胀且有干酪样渗出物，肛门粘有绿色稀便，剖检可见腿部肌肉组织溶解和腹腔积液。为了查明感染的病原，试验采集病鸡的眼睑干酪样渗出物、气管黏液、腹腔积液及腿部深层肌肉病变组织，进行细菌的分离纯化、形态学观察、革兰氏染色镜检、生化鉴定、16S rRNA基因PCR鉴定，确定感染病原菌种类；对分离纯化的病原菌采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗生素敏感性试验，采用牛津杯法进行22种中草药敏感性试验，同时对22种中草药提取液进行体外最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定；对分离纯化的病原菌进行毒力基因检测，应用Balb/c小鼠进行致病性试验。结果表明：经培养，在绵羊血琼脂培养基上可见边缘整齐、光滑、湿润、呈β溶血的灰色菌落，革兰氏染色可见散在或成对存在的革兰氏阴性短杆菌，与豚鼠气单胞菌形态特征相似，将分离菌株命名为TSQDBJ-1;其生化特性与豚鼠气单胞菌符合率达99%,核苷酸相似性达99.7%;分离菌携带丝氨酸蛋白酶(Ahp)、细胞毒性肠毒素(Act)两种毒力基因；对头孢曲松、乙酰甲喹、头孢噻...  相似文献   

gltS基因缺失对禽致病性大肠杆菌生物学特性的影响     

王利丽  张春晓  张闫  孙欣艺  侯冠欣  陶勇  赵奇  张志强  史秋梅 《中国预防兽医学报》2023,(7):690-697

为研究谷氨酸转运蛋白GltS编码基因对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响，本研究利用λ-Red同源重组方法构建APEC CE129(WT)株gltS基因缺失株CE129ΔgltS(KO)和基因回补株CE129ΔgltS/gltS (RS)，并均经PCR及测序鉴定，结果显示，gltS基因缺失株及回补株均正确构建。通过连续10 h测定各菌株OD600nm值绘制WT、KO、RS菌株的生长曲线，利用梅里埃自动生化鉴定系统测定3株菌的生化特性；利用K-B纸片法检测3株菌对8类16种药物的敏感性；利用半固体培养基检测3株菌的运动能力。结果显示，3株菌的生长特性、生化特性、药敏特性和运动能力均无明显差异。利用细菌平板计数法计算检测WT与KO菌株的体外竞争指数(CI)，分析KO菌株是否致弱。利用结晶紫染色法测定3株菌的生物被膜(BF)的形成能力，并利用刚果红琼脂板及含荧光增白剂的琼脂板分别检测菌株BF中curli菌毛及纤维素的形成情况。结果显示，WT与KO菌株的体外CI为0.32，表明KO菌株轻度致弱。BF形成能力检测结果显示，相对于WT、RS菌株，KO菌株BF的形成能力极显著降低(P<...  相似文献   

肠炎沙门菌ArgG基因缺失株的构建及生物学特性分析     

白和平  张鹿  陈钰斌  刘畅  张志强  史秋梅  吴同垒 《中国兽医学报》2023,(2):323-328

为研究ArgG基因对肠炎沙门菌的致病作用和生物学特性的影响，本试验利用λ-Red重组法构建肠炎沙门菌ArgG基因缺失株，并从生化特性、生长特性、生物被膜形成能力、运动能力、体外应激、巨噬细胞存活能力等方面进行研究。结果显示，与野生型菌株相比，ArgG基因缺失株生化特性、运动能力无明显变化，在LB培养基中生长速度变化不明显，但在M9培养基中缺失株不生长；ArgG基因缺失株生物被膜形成能力下降约60%,抗酸、碱应激能力分别下降约12%和10%左右，巨噬细胞内的存活能力和其对小鼠的毒力降低。本研究成功构建了肠炎沙门菌ArgG基因缺失株，并证明ArgG基因与营养代谢、抗应激能力和毒力密切相关，为肠炎沙门菌的基因缺失苗的研究提供理论依据。  相似文献   

牛源铜绿假单胞菌的分离鉴定及中草药抑杀效果比较分析     

白和平  彭树德  刘亦潇  吴同垒  张志强  张艳英  史秋梅 《中国奶牛》2023,(6):26-30

为查明养殖场引起牛只呼吸道疾病的病原菌,采集患病牛鼻拭子,采用实验室方法进行细菌的分离鉴定;通过细菌毒力基因的检测、致病性试验、药敏试验分析分离菌生物学特性;并明确22种中草药对其抑杀效果。结果表明,分离菌为两端钝圆革兰氏阴性短杆菌,16SrRNA基因序列与GeneBank铜绿假单胞菌比对相似序列达到100%,表明分离菌株为铜绿假单胞菌;菌株携带Exo S、Exo Y毒力基因,8h内可致小鼠死亡。药敏试验结果显示,该菌对环丙沙星极为敏感,对阿米卡星、新霉素、复方新诺明等9种药物中度敏感;中草药药敏试验结果显示,乌梅、五倍子、五味子对分离菌具有较好的抑菌作用,其MIC分别为31.25mg/mL和62.50mg/mL,对病原菌的生长繁殖具有较好抑制作用。本研究为该病的防控提供参考。  相似文献   

貉源志贺菌分离鉴定、致病性及耐药性分析     

张召兴  贾青辉  张艳英  高桂生  史秋梅 《中国预防兽医学报》2023,(1):25-31

为鉴定引起河北地区貉腹泻的志贺菌并分析其相关生物学特性，本研究对2017年～2019年采自河北地区养殖场中患腹泻病貉的肛拭子、粪便及病料样品共计193份进行细菌分离，并经生化特性及PCR鉴定。将分离的志贺菌以0.25 m L/只(108cfu/mL)感染小鼠分析分离菌对小鼠的致病性。采用玻板凝集试验、PCR分别检测分离志贺菌的血清型及相关毒力基因。通过K-B药敏纸片法和PCR分别检测分离菌的耐药性及相关耐药基因，采用SPSS18软件中的Fisher确切概率法分析分离菌耐药表型与耐药基因之间的相关性。结果显示，从193份腹泻病貉样品中共分离到83株志贺菌，其中65株对小鼠具有致病性，且以致小鼠死亡4只(30.1%)、5只(22.9%)的菌株为主；65株致病性志贺菌分属于9种血清型，以福氏志贺菌2a (23.1%,15/65)、3a (20.0%,13/65)和1b (18.5%,12/65)型为主要流行的血清型；65株致病性志贺菌毒力基因ipaH、ipa BCD、ial、sen、Sat、Set1A、Set1B、sigA检出率均在50.8%以上，其他毒力基因检出率在38.5%～40%，未检...  相似文献