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为构建gE基因缺失的牛Ⅰ型疱疹病毒(BHV1),本研究在BHV1全基因组感染性细菌人工染色体克隆pBHV1-ZJ的基础上,利用Red E/T重组技术,分别构建了gE基因缺失、gE和gN双基因缺失的pBHV1突变体,通过转染获得了重组病毒rBHV1-△gE,而双基因缺失突变体pBHV1-△gN-△gE则未能观察到细胞病变。病毒噬斑大小和生长曲线试验表明,在感染细胞内和培养基中,rBHV1-△gE滴度与亲本毒株BHV1无明显差异,而rBHV1-△gN显著降低;重组病毒rBHV1-△gE和前期构建的rBHV1-△gN形成的噬斑均显著小于亲本病毒,其大小分别为亲本病毒的18%和64%。rBHV1-△gE和rBHV1-△gN的构建将有助于阐明gE与gN协同作用机制和为研制BHV1新型基因标记疫苗奠定基础。 相似文献
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在构建鸭瘟病毒疫苗株细菌人工染色体感染性克隆pDEV-vac的基础上,通过两步Red E/T重组,构建了gI基因缺失的pDEV-ΔgI突变体克隆,并转染鸡胚成纤维细胞获得了重组病毒rDEV-ΔgI。病毒生长曲线显示,rDEV-ΔgI的滴度从12 h到60 h稳步增加,在此期间gI基因缺失毒株病毒滴度较亲本毒株稍有降低,但病毒滴度于72 h接近并超过对照毒株。蚀斑面积测定发现rDEV-ΔgI较亲本毒rDEV-BAC增加约60%。动物实验表明,rDEV-ΔgI注射组对强毒攻击的保护率较对照组下降40%。研究表明:gI为DEV的非必需基因,且gI基因与病毒扩散、免疫保护能力等相关。 相似文献
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根据经典和新型水禽呼肠孤病毒σA基因的保守序列设计一对PCR引物,通过优化病毒RNA提取方法和PCR条件,建立了番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法。该方法可自1株经典型或4株新型水禽呼肠孤病毒特异性扩增出436 bp条带,其最低病毒检出量为3.6 TCID50,而对鸭甲肝病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、坦布苏病毒、番鸭细小病毒、产蛋下降综合征病毒和H9N2亚型禽流感病毒扩增均为阴性。对2011~2012采集的224份(番鸭74、鹅68、鸭82)疑似临床病料进行检测,结果 56份为阳性,番鸭、鸭和鹅阳性率分别为59.5%(44/74),11.0%(9/82)和4.4%(3/68),表明水禽呼肠孤病毒主要在番鸭中流行。 相似文献
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随着生活水平的提高,人们对肉类的需求以追求风味、野味、回归自然成为时尚。以往舍内平养的快大型肉鸡在市场上销路变差,取而代之的家鸡(俗称土鸡)倍受欢迎。这几年,我区果园养鸡发展较快,饲养量已占养鸡总数的60%左右。果园养鸡省工省料、管理粗放,肉质近似家鸡,深受消费者青睐。它解决了鸡活动场地,提供部分食物和果园中的虫子;鸡粪又为果园提供良好的有机肥,减少果园虫害,两者结合,得益相彰。笔者经近几年的观察认为,果园养鸡应该提倡,但需注意几个问题:l)选择适合的场地果园养鸡应选择向阳、平坦、高燥、取水方便、… 相似文献
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近几年 ,由于养鸡效益普遍下滑 ,饲养量锐减 ,而养鸭呈上升趋势 ,形势尚好。我区1999年蛋鸭饲养量达300万羽 ,番鸭达450余万羽。尤其是缙云县 ,从事养鸭业的人数占全县人口的1/4 ,遍及全国26个省、市、自治区 ,饲养鸭1500万羽。1998、1999年两年产值达20亿元 ,被列为“中国麻鸭之乡”称号。随着饲养量增加 ,集约化程度的提高 ,鸭病发生率也逐年增多 ,局部地区鸭瘟频频发生 ,该病已成为危害养鸭生产的头号大敌。笔者经长期观察 ,认为鸭瘟免疫注射中应注意以下几个问题。1)勤换注射针头。目前专业户养鸭规模少… 相似文献
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我市近几年利用荒滩、荒地、农闲田推广塑料大棚饲养肉鸡取得成功。仅丽水市水阁办事处(原莲都区水阁镇)从1995年的5个大棚开始试养,发展到2001年底的80个大棚,养鸡从不足20万羽到120万羽。目前这一技术已在莲都、缙云、松阳、青田等县普遍推广,户饲养规模由原来的300~500羽扩大到目前的5000~6000羽,高的达万羽。笔者认为,塑料大棚养鸡具有投资省、取材容易、管理方便、收效快等优点,解决了制约规模养殖的场地问题,特别是在经济欠发达地区具有一定的推广价值。现将主要情况作一介绍。1棚址选择棚… 相似文献
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根据缙云麻鸭的产业现状与发展需要,采用父系半同胞家系选育方法,辅以生化遗传标记育种技术,对缙云麻鸭进行了四个世代的提纯复壮,选育了缙云麻鸭Ⅰ系、Ⅱ系、青壳系三个纯系。经测定,各纯系母鸭平均见蛋日龄为82d,500日龄羽均产蛋量达到329.83枚、总蛋重21.65kg,蛋料比1∶2.86,分别比选育前提高10.38%、15.15%、13.64%,经统计分析差异显著(P>0.05);青壳系鸭青壳蛋比例核心群达95%以上,商品代达85%以上。 相似文献
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