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山羊c-Myc原癌基因克隆、原核表达和GST-Myc融合蛋白纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究的目的是通过分子克隆、原核表达和蛋白纯化技术获得山羊GST-Sox2融合蛋白.用RT-PCR方法从山羊(Capra hircus)肠组织克隆了c-Myc基因,通过TA克隆,构建了pMD18-T-Myc质粒.DNA测序证明,山羊c-Myc全长cDNA约1320 bp,该序列包含一个完整的开放阅读框,编码439个氨基酸,经分析该序列与绵羊(Ovis aries)的c-Myc序列同源性为99.2%.将该cDNA片段亚克隆至pGEX-KG载体,构建了重组质粒pGEX-KG-Myc.经酶切鉴定和测序,将重组质粒导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,由IPTG诱导表达,以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和纯化GST-Myc融合蛋白.SDS-PAGE分析表明,纯化的GST-Myc融合蛋白约75 kD,与预期值相符,且呈现清晰的单一条带.Western blot检测证实,该融合蛋白能够被GST抗体所识别.本实验克隆了山羊c-Myc基因,获得了高纯度的GST-Myc融合蛋白,为其多克隆或单克隆抗体的制备提供了基础资料,为山羊iPS细胞(induced pluripotent stem cells)检测创造了条件. 相似文献
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2012年甬优12最高单产在浙江突破1 000 kg/667 m2。本文对此评议,认为意义无法估量,不但表明浙江省水稻育种及栽培取得了重大突破,而且更主要的是将极大提高浙江乃至我国南方稻区的粮食生产能力,为确保粮食安全,也为让出更多耕地用于发展经济和维护生态安全开启了全新的篇章。产量突破主要是因种栽培的结果,需大力提升对栽培研究的支持力度。偏粳型超大穗将是超高产的主要方向,要改变目前育种力量分配以选育籼型品种为主的局面。包括土、秧、密、肥、水、保等各方面的配套栽培技术已初步集成,但推广工作任重道远,思想认识转变、农田质量改善、不同基因类型品种选育、栽培理论研究及技术到位等方面均有大量工作要做。 相似文献
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在农机行政执法过程中如何正确运用《行政处罚法》?笔者结合农机法规和工作实践谈谈处罚的具体程序。1处罚的决定(1)简易程序。违法事实确凿并有法定依据 ,对机手个人或个体生产、销售、维修网点业主 ,处以50元以下罚款 ,对集体和国有生产、销售、维修企业等法人处以1000元以下罚款或警告行政处罚的 ,适用本程序。①执法人员(监理员应着制服)应有2人以上 ,向当事人出示执法证件。②告知当事人处罚决定的事实、理由、依据 ,听取当事人的意见 ,并核实。③填写《行政处罚(当场)决定书》。④告知当事人 ,如对处罚不服 ,可在60… 相似文献
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2003年冬季以来,湖北省襄樊市一直晴热少雨,气侯干燥,气温偏高,是连续出现的第3个“暖冬”。由于长期干旱少雨,加之温度偏高,使土壤失墒加快,旱情发展迅猛,危害逐步加剧。据统计,目前全市农作物受旱面积达12.67万hm^2,占夏收面积的46%,其中,旱情严重的占一半。而旱情正好发生在小麦灌浆、油菜结籽、茶叶采摘、育苗下种 相似文献
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