百合种球标准化生产     

刁义维  吴沙沙  郑丽娜  邢大洲  焦雪辉  吴锦娣  张英杰  王舒藜  吕英民 《农业工程技术:农产品加工》2010,(8):86-90

百合观赏价值极高,市场需求量日益增长,然而中国百合商品种球绝大多数依赖进口,暂无统一的生产标准。针对此现象,文章详细论述了百合种球的品种选择、栽培设施、病毒检测及脱除、无毒籽球生产和商品种球生产等内容,提出一套百合种球标准化生产体系,为中国百合种球国产化提供一定的参考。  相似文献   

家畜布鲁氏菌BP26基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立     

臧金凤  尚佑军  陈妍  吴锦艳  王光祥  张志东  刘湘涛  孙继国 《河北农业大学学报》2016,(3)

利用原核表达的布鲁氏菌BP26蛋白作为标准抗原蛋白,建立布鲁氏菌病抗体检测方法。本试验从布鲁氏菌S2疫苗株通过PCR扩增获得BP26基因,构建融合表达质粒pET-28a-BP26后并转化BL21宿主菌,IPTG诱导表达,应用Western blot鉴定表达产物,并以纯化的重组蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,建立布鲁氏菌病抗体ELISA检测方法。结果表明,通过反应条件优化确定抗原的适宜包被浓度为5μg/mL,血清适宜稀释度为1∶20,二抗的适宜工作浓度为1∶20 000;通过敏感性试验结果表明,当血清稀释至1∶1 280时,仍检测为阳性;通过批间、批内重复性试验,变异系数均小于10%,表明本检测方法具有较高的重复性。用该方法对100份临床样本进行检测,并与试管凝集试验(SAT)进行相符性验证,符合率为94%,为布鲁氏菌病临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。  相似文献   

羊传染性脓疱病毒耐热冻干保护剂筛选及冻干曲线优化     

王光祥  尚佑军  王艳华  宋成怡  吴锦艳  陈妍  田宏  刘湘涛  张志东 《中国兽医学报》2018,(2):266-271

采用冻干试验筛选出保护剂基础配方,再通过Plackett-Burman设计法筛选主要保护剂基质,然后通过Box-Behnken响应面分析法对羊传染性脓疱病毒(ORFV)耐热保护剂配方进一步优化,用冻干试验进一步验证筛选出1种针对ORFV保护效果最好的耐热冻干保护剂作为疫苗用候选配方。同时,依据前期试验获得的活疫苗冻干曲线,通过进一步优化,获得疫苗最佳冻干曲线。利用该冻干工艺冻干的疫苗,保护剂的保护率可达95.3%,且疫苗各项指标均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》要求。经37℃保存7,15,30d病毒滴度分别下降0.46,0.70,1.00;2~8℃保存3,6,12,24个月病毒滴度分别下降0.10,0.10,0.40,0.60,证明此配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。本试验解决了ORFV细胞弱毒疫苗仅能在低温条件下保存和运输的瓶颈技术问题,使疫苗的储存、运输更为方便。  相似文献   

PPRV受体信号转导淋巴细胞激活分子V区功能蛋白的表达及活性分析     

王耀杰  吴锦艳  陈妍  王光祥  尚佑军  赵兴绪  张勇 《中国兽医学报》2018,(7)

信号转导淋巴细胞激活分子(SLAM)是小反刍兽疫病毒(PPRV)感染宿主的主要细胞受体,其N端V结构域的表达活化可以启动PPRV的入侵感染。本试验选用Slam/V结构域作为功能靶标进行表达,并分析其活性。分离山羊外周血淋巴细胞,提取其基因组RNA,应用RT-PCR方法扩增山羊SLAM/V基因,构建原核表达载体pGEX-6P-1/Slam/V。将获得的重组质粒pGEX-6P-1/Slam/V转化BL21(DE3)感受态细胞,通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和验证。结果显示,IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L、37℃,诱导14h时,靶标蛋白表达量最高,融合蛋白相对分子质量约为39 800,且主要以包涵体形式存在。经山羊抗人SLAM蛋白多克隆抗体识别鉴定,证实其具有良好的免疫反应活性。本试验为建立稳定表达山羊SLAM/V功能区的阳性细胞克隆及PPRV侵染路径研究奠定了基础。  相似文献   

基于人工智能技术的智慧烟草农业发展探究     

施旭  高松  刘帅  马石全  黄坤  潘元宏  郭建  宋文峰  张铁怀  官群荣  肖长东  吴锦慧  龙宝安  普恩平  史晓慧  吴思 《浙江农业科学》2024,(4):942-948

在新一轮科技革命和产业变革的历史背景下,发展智慧烟草农业是现代烟草农业的内在要求,也是实现我国农业现代化发展的必然趋势和正确选择。人工智能作为智慧烟草农业发展的关键技术,在烟草农业领域有着巨大的潜力。因此,文章结合智慧烟草农业发展内涵,选取育苗、种植、烘烤、分级四个烟叶生产关键环节概述了人工智能技术,特别是目标检测技术、图像识别技术、智能控制技术的应用现状。在此基础上,分析人工智能技术发展的制约因素,并从产业应用角度展望了未来发展趋势,以期为烟草农业智慧化发展提供思路。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒兰州分离株ORF3基因的克隆及杆状病毒载体的构建   总被引：1，自引：1，他引：0  

赵娜  田宏  祁燕蓉  满自萍  吴锦艳  尚佑军  何生虎  刘湘涛 《西北农业学报》2009,18(3):1-5

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF3序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃Lanzhou株的ORF3基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF3,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF3转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF3.成功构建了PRRSV Lanzhou株ORF3基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建   总被引：4，自引：1，他引：3  

赵娜  田宏  吴锦艳  满自萍  尚佑军  何生虎  刘湘涛 《华北农学报》2009,24(1)

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF5转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF5;并成功构建了PRRSV LZH株ORF5基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.  相似文献   

南安市水土流失现状及防治对策     

陈永宝吴锦春  郭志民陈志伟黄伟煌  李凤琳黄印运 《亚热带水土保持》1999,11(1):30-33

本根据最新水土流失定量遥感监测结果,阐述了南安市水土流失现状、分布特征、变化趋势以及潜在危险,分析了水土流失成因及其危害,提出了新形势下的水土流失防治对策。  相似文献   

扬名牌之帆 圆强省之梦     

吴锦 《农村经济与科技》2000,11(8):18-19

<正> 当前,我省农业发展面临买方市场和加入WTO的挑战,尽快提高我省农业综合竞争力、实现农业大省向农业强省跨越的任务迫在眉睫。从湖北实际情况看,许多农产品档次不高,名声不响,块头不大,市场竞争力不强,必须强化品牌意识,强力推进农产品精品名牌战略。  相似文献   

多拉菌素和伊维菌素对牛、羊寄生虫的驱虫效果研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

樊天喜  马萍萍  吴锦艳  尚佑军  刘湘涛 《甘肃畜牧兽医》2016,(19):100-103

目的:研究多拉菌素、伊维菌素对高寒阴湿地区放牧牛、羊寄生虫的驱治效果。对甘肃省张家川回族自治县林缘区7个试验点的42头牛、280只羊为研究对象。方法:按多拉菌素给牛0.3 mg/kg体重、羊0.2 mg/kg体重,伊维菌素给牛、羊均以0.02 m L/kg体重通过皮下或肌肉注射给药,以全身蠕虫剖检法及EPG来判定驱虫率。结果:发现相对于空白对照组来说,用药后多拉菌素组、伊维菌素组驱虫效果明显。结论:多拉菌素、伊维菌素对高寒阴湿地区牛、羊寄生虫均有较好的驱治效果,其中多拉菌素驱治效果最优。  相似文献