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为了确定百合荧光SSR-PCR反应的最佳体系,对反应体系和程序中的模板DNA、酶量和退火温度进行了优化筛选。结果表明,适用于百合的荧光SSR-PCR反应体系为:总体系为20μl,10×PCR buffer(Mg~(2+))2μl,2.5 mM dNTP 1μl,正、反引物各0.5μl,模板DNA 40 ng,Taq酶1 U,用ddH_2O补足。反应程序为:94℃预变性5 min,94℃(30 s)/58℃(45 s)/72℃(45 s)35个循环,最后72℃延伸10 min。利用优化后的反应体系对百合SSR引物进行筛选,从50对引物中筛选出6对多态性高的SSR引物,并通过合成荧光标记引物对77个百合品(野生)种进行复选,验证了6对引物的稳定性。该研究为百合的遗传多样性分析、分子标记辅助育种等方面的进一步研究提供了技术支持。 相似文献
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为了建立东方百合茎尖组培脱毒体系,筛选出茎尖直接再生小鳞茎适宜培养基配方,指导百合种球脱毒生产。试验采用正交设计,以东方百合杂种系品种西伯利亚茎尖为试验材料,对培养基激素种类和糖浓度组合对茎尖接种成活率和小鳞茎诱导率的影响进行了探讨。结果表明,处理J5培养基(MS+6-BA 1 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L),西伯利亚茎尖成活率为70%,小鳞茎诱导率为85.51%,显著高于其它处理,为试验条件下的最佳培养基配方。 相似文献
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本研究从百合小鳞茎发育不同阶段蛋白质组数据中,筛选出调控鳞茎发育的上调表达基因LdGASA1,对其进行克隆、生物信息学分析及表达分析。序列分析显示LdGASA1基因全长725 bp,编码区CDS序列为336 bp,编码111个氨基酸。结构域分析显示,LdGASA1第52至第111个氨基酸含有一个典型的GASA保守结构域。其理化性质分析显示,编码蛋白质理论等电点(pI)为9.1,不稳定系数为35.14,属于稳定的疏水性蛋白,亚细胞定位预测该蛋白最可能定位在细胞质中,其二级结构主要为无规则卷曲(65.86%)和α-螺旋(22.52%),另外含有少量延伸链(12.60)和β-折叠(9.01%)。通过RT-qPCR分析发现LdGASA1基因在小鳞茎出现前表达量相对较低,主要在小鳞茎形态建成和发育阶段表达,且在小鳞茎形态基本建成(35 d)时表达量达到最高。本研究结果为探索GASA基因调控百合生长发育的机制打下基础。 相似文献
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以31份百合品种(野生)为试材,采用人工蚜虫接种及蚜量比值法,研究了不同百合品种(野生)对蚜虫虫口数量的影响,以期获得抗蚜虫的百合种质。结果表明:不同百合品种(野生)对蚜虫的抗性表现出明显差异,蚜虫接种15d时各品种(野生)虫口数量差异甚大,0~237头不等。31份百合品种(野生)根据蚜量比值法可分为5级,7个品种(野生)为高感品种(野生);4个品种为感虫品种;2个品种(野生)为中抗品种(野生);5个品种(野生)为抗虫品种(野生);13个品种(野生)为高抗品种(野生)。 相似文献