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[目的]研究建兰[Cymbidium ensifolium（Linn.） Sw]总基因组DNA的提取方法,并对建兰ISSR-PCR反应体系进行优化,建立更为完善的反应体系。[方法]用改良的CTAB法提取叶片的基因组DNA,用1.0%琼脂糖电泳检测DNA质量;用分光光度计测定其纯度和浓度,DNA纯度以OD260/OD280的比值来估算,浓度估算法为：DNA浓度（ng/μl） =OD260×50×稀释倍数。计算DNA获得率（DNA量/所用叶片量×100%）。对建兰ISSR-PCR反应的4项影响因素（DNA模板、TaqDNA聚合酶、Mg2 ＋和dNTPs）逐个作5水平进行研究,以筛选最优的建兰ISSR-PCR反应体系。[结果]获得高质量的建兰基因组DNA,以及优化了的建兰ISSR-PCR反应体系,即25μl PCR反应体积中,2.5μl 10×PCR buffer,2.5 mmol/LMgCl2,240 ng模板DNA,160μmol/LdNTPs,1.25 UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物,双蒸水15.78μl。最佳扩增程序为：94℃预变性5min,然后进行40个循环：94℃变性30 s,50 ～60℃退火（退火温度随引物不同而定） 30 s,72℃延伸50 s,72℃延伸7 min。[结论]建立了建兰ISSR-PCR反应体系最适合的条件,为进一步利用ISSR分子标记技术进行建兰遗传多样性研究提供了基础。 相似文献
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蕙兰ISSR-PCR反应体系的建立和优化（英文） 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]以蕙兰（Cymbidium faberi Rolfe）基因组DNA为模板,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素进行筛选和优化,建立适合蕙兰的ISSR-PCR的最佳反应体系。[方法]利用改良的CTAB法提取蕙兰基因组DNA,并对影响ISSR-PCR扩增结果的因素进行优化。[结果]获得了高质量的蕙兰基因组DNA并建立了最适的蕙兰ISSR-PCR体系（25μl）,即2.5μl10×PCRbuffer,2.0mmol/LMgCl2,60ng模板DNA,160μmol/LdNTPs,1.25UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物,双蒸水15.85μl;最佳扩增程序为：94℃预变性5min;94℃变性30s,复性温度比引物的Tm值低2～3℃,30s,72℃延伸50s,40个循环;72℃延伸7min。[结论]该优化体系的建立可为今后利用ISSR标记技术进行蕙兰遗传多样性研究提供依据。 相似文献
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微量元素Cu、Fe、Zn、Mn是影响人和动物营养的重要因素。世界上有些组织(如德国DLG、英国ARC、美国NRC)一直致力于研究蛋鸡Cu、Fe、Zn、Mn的需要量。NRC(1994)推荐的蛋鸡产蛋期微量元素需要量为:Cu未定,Fe为45mg/kg,Zn为35mg/kg,Mn为20mg/kg。为了提高动物生产性能,现代养殖通常在动物基础日粮中添加高剂量Cu、Fe、Zn、Mn。Mabe等(2003)报道,在玉米-豆粕型日粮中添加Zn60mg/kg、Mn60mg/kg和Cu10mg/kg,可提高蛋黄中Zn、Mn、Cu的浓度;高剂量的铜可降低鸡肉和鸡蛋中胆固醇浓度(Bakalli和Pesti,1995;Pesti和Bakalli,1998;尹靖东… 相似文献
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[目的]为进一步从分子水平上研究春兰种群的遗传多样性奠定基础。[方法]以春兰基因组DNA为模板,通过单因子试验研究ISSR反应体系中主要成分对扩增结果的影响,以寻找适合春兰ISSR分析的反应体系。[结果]春兰的ISSR反应体系较适宜的扩增条件为:25lμPCR反应体积中,15.78μl双蒸水,2.5μl 1×CR buffer,1.1 UTaqDNA聚合酶,100 ng基因组DNA,2.0 mmol/L MgCl2,150μmol/LdNTPs,2μmol/L引物。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min,然后进行40个循环;94℃变性45 s,复性温度比各引物的TM值略低1~2℃,45 s,72℃延伸75 s,循环结束后72℃延伸7 min,4℃保存。[结论]该优化系统的建立为进行春兰鉴定及种质遗传多样性分析提供了一个标准化程序。 相似文献
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奶牛体温评价指标及测定方法研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
体温是动物重要的基本生理指标,其变化可以灵敏指示机体的健康状况、生理功能和所处环境变化。体温及其变化的准确测定是生产中进行奶牛发情鉴定、疾病诊断和热应激程度评估的重要依据。可用于反映奶牛体温的指标很多,每种指标的测定方法不尽相同,本文总结了血液、鼓膜、腹膜、乳房、牛奶、直肠、阴道、瘤/网胃、体表等部位温度作为奶牛体温评价指标的研究和应用,并结合上述指标的应用现状,阐述了直肠温度、阴道温度、牛奶温度、瘤/网胃温度和体表温度的常见测定方法,以供奶牛生产或相关研究参考。 相似文献
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[目的]为钩距虾脊兰种质资源研究奠定基础。[方法]以钩距虾脊兰为试验材料,、利所改良的CTAB法提取钩距虾脊兰基因组DNA,并对影响ISSR扩增反应的各因素进行优化。[结果]获得了高质量的钩距虾脊兰基因。组DNA;同时,建立了最适的钩距虾脊兰ISSR-PCR体系,即25山PCR反应体积中,2．5μl10×PCRbuffer,2．0mmol／LMgCl2,100ng模板DNA,240μmol／LdNTPs,1．75UTaqDNA聚合酶,0．4μmol／L引物;最佳扩增程序为94℃预变性5min。然后进行40个循环：94℃变性30s,复性温度根据各引物的TM值略低1～2℃,30s,72℃延伸50s,循环结束后72℃延伸7min,4℃保存。[结论]这一优化系统的建立为进一步利用ISSR分子标记技术进行钩距虾脊兰遗传多样性研究提供了基础。 相似文献
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铜、铁、锌、锰添加量对0～3周龄肉鸡生产性能和免疫器官发育的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
将960只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分为16组,每组4个重复,每重复15只;采用D-最优设计,以基础日粮含量为最低水平,以2倍NRC(1994)推荐量为最高水平,按16种方案添加铜、铁、锌、锰,研究不同添加水平对0～3周龄肉鸡生产和免疫器官发育的影响,以确定0～3周龄肉鸡日粮铜、铁、锌、锰的适宜添加水平。结果表明:不同铜、铁、锌、锰添加水平对0～3周龄肉鸡日增重、耗料量、料肉比、死淘率及免疫器官发育均无显著影响(P>0.05),说明基础日粮中的铜、铁、锌、锰含量能够满足0～3周龄肉鸡生长和免疫器官发育的需要。 相似文献
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将19周龄罗曼褐壳蛋鸡525只,随机分为5个处理,每处理7个重复,每重复15只鸡,试验持续14周。处理A为对照组,不添加微量元素;处理B,基础日粮添加Zn 28.7 mg/kg;处理C,基础日粮添加Zn63.7、Mn 30.0和Cu 2.5 mg/kg;处理D,基础日粮添加Zn 98.7、Mn 60.0和Cu 6.5 mg/kg;处理E,基础日粮添加Zn 17.0、Mn 14.7、Cu 2.0和Fe 30.0 mg/kg。研究微量元素添加量对微量元素表观利用率和鸡蛋品质的影响。结果表明,排泄物中微量元素含量随日粮含量升高而显著升高,Zn、Cu、Fe的表观利用率各处理间差异不显著(P>0.05);日粮Mn含量显著影响Mn利用率(P<0.05)。日粮Zn、Mn、Cu、Fe含量显著影响蛋黄胆固醇浓度和去壳全蛋Zn、Mn、Cu、Fe含量(P<0.05)。蛋黄颜色各处理间差异均不显著(P>0.05)。综合考虑,基础日粮添加Zn 28.8 mg/kg可显著改善鸡蛋品质。 相似文献
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高n-3多不饱和脂肪酸鸡蛋的开发研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
n-3系列多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)包括琢-亚麻酸(ALA,C18:3n-3)及其长链代谢物二十碳五烯酸(EPA,C20:5n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,C22:6n-3)。众多研究证实n-3PUFA对人体具有重要的保健功能。但分析发现,现代人食物中富含n-6PUFA而缺乏n-3PUFA,n-6:n-3已由过去的1～2:1升至20～25:1[1]。鉴于此,近20年来,对n-3PUFA的研究和对高n-3PUFA产品的开发日益深入,对高n-3PUFA鸡蛋的开发即是其中之一。1高n-3PUFA鸡蛋的开发研究状况多年来,研究者们一直致力于寻找一种可替代食物作为n-3PUFA来源的产品。选用鸡蛋作为其来源是因为鸡… 相似文献