河北猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3(cz)株N基因变异分析及原核表达     

陈赛娟  刘涛  曹洪战  张斌  付新城  张丽青  孙继国 《河北农业大学学报》2008,31(5)

为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征提供理论数据。应用RT-PCR方法特异性扩增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,将扩增片段克隆入pMD-T载体后测序,应用DNAstar分析软件对序列进行分析,并与GenBank中发表的PRRSV毒株序列进行比较。结果显示:HB-3(cz)株与高热病毒株JXA1、HUB2等及传统河北分离株HB-1(sh)氨基酸同源性高达97.6%,属美洲型毒株。将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,重组质粒pGEX-N转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达,经Western-blot-ting分析表明:表达的融合蛋白分子量约为39.5 kDa,能与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV血清学诊断方法的建立奠定了基础。  相似文献   

河北地区猪圆环病毒二型ORF2基因片段的克隆与原核表达   总被引：3，自引：1，他引：2  

张秀珊  曹洪战  张丽青  刘涛  陈赛娟  孙继国 《华北农学报》2008,23(4)

以PCV2 PK-15细胞毒提取的DNA为模板,用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600 bp片段;对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化,经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-32a-ORF2,转入大肠埃希氏菌B121(DE3)中,以IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳和Western-Blotting分析.结果表明.重组表达质粒在大肠中所表达的融合蛋白相对分子量为40 kDa,Western-blotting分析表明该蛋白具有PCV2抗原性.  相似文献   

绵羊肺炎支原体及其防制技术     

张莉  孙继国 《今日畜牧兽医》2003,(6)

绵羊非进行性肺炎(CNP)是羔羊中最为流行的疾病之一,在夏末和秋冬季最为常见。它是一种由绵羊肺炎支原体所引起,以咳嗽、喘气、渐进性消瘦以及肺间质增生性炎症为特征的慢性呼吸道疾病。该病不只感染绵羊也可以引起山羊发病,流行广,而且很难根除,本文通过对保定、邢台、邯郸、廊坊等地的患病羊群的病原分离,根据我省的具体情况从其流行病学及微生物特性方面做一些简要的探讨。  相似文献   

强效氨丙啉等抗球虫药对鸡柔嫩艾美耳球虫病的疗效观察     

沈瑞洲  杨芷云  葛印怀  王宗仪  李茂祥  孙继国  张勤  丁长安  束乾山 《上海畜牧兽医通讯》1984,(6)

引言随着世界性养鸡业的发展,鸡球虫病危害逐步加重。当前对付鸡球虫病均采用化学治疗。国外抗球虫药的研制进展快、种类多、数量大、更新快。由于鸡球虫易产生耐药性,美国食品药品管理局(FDA)对上千种抗球虫药汉批准使用20多种。近年来国外最大进展是研制和应用聚乙醚类抗生素型抗球虫药,如莫能菌素、盐霉素、拉萨洛素经应  相似文献   

脑心肌炎病毒感染神经细胞的基因表达谱分析     

李丽敏  邹云婧  郝雪飘  赵兴华  李睿文  孙继国  袁万哲 《畜牧兽医学报》2019,(8)

脑心肌炎病毒(EMCV)可感染人和多种动物。为了探索EMCV对N2a细胞转录组的影响,揭示基因表达与致病性之间的关联,本研究用EMCV BD2毒株感染N2a细胞,收集感染后7 h的细胞样本,提取总RNA,使用NimbleGen杂交体系将标记好的ds-cDNA与小鼠基因表达谱芯片杂交,对芯片进行扫描,获得差异表达基因数据;应用生物信息学方法对筛查出的差异表达基因数据进行分析,筛选差异表达的免疫相关基因及信号通路;利用real-time FQ-PCR方法,对微阵列数据结果进行验证。结果表明,EMCV感染N2a细胞后共有21 143个差异表达基因;通路分析表明,差异表达的主要信号通路包括PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、细胞因子间相互作用、趋化因子信号通路、TCR/RLR信号通路和细胞凋亡通路等;Real-time FQ-PCR检测的10个差异表达基因的变化情况与通过微阵列分析预测的变化一致。  相似文献   

河北省部分地区规模化养殖场羊口蹄疫3ABC抗体检测     

安琪  杨路达  赵兴华  张铁  胡满  王建昌  张若曦  李睿文  李丽敏  孙继国  袁万哲 《中国动物检疫》2018,35(12):14-17

为初步了解河北省规模化养殖场羊口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体水平,2018年5月在11个场点采集羊血清354份,用口蹄疫3ABC单抗阻断ELISA试剂盒进行抗体检测。结果显示:从不同市区分析,秦皇岛市抗体阳性率最高,为15.65%,其次是保定市、邢台市,分别为11.11%、2.86%;从不同饲养阶段分析,种羊的抗体阳性率明显偏高,为16.82%,羔羊、育成羊分别为6.53%、10.75%;从不同性别分析,母羊阳性率偏高,为11.7%,公羊为8.33%;从不同品种分析,绵羊阳性率高于山羊,分别为12.75%、4.67%。虽然我国目前使用的灭活疫苗可能会导致产生一定的非结构蛋白抗体,但上述结果能够说明河北省存在口蹄疫自然感染羊只。这提示河北省的口蹄疫防治和净化任务仍然繁重,要根除和消灭本病,可选用非结构蛋白纯化程度高的疫苗进行免疫,同时加强3ABC抗体监测和引种检疫,隔离并淘汰阳性动物。  相似文献   

新城疫病毒地方分离株HN基因的克隆及遗传变异分析     

李杰峰  谢春伏  曹贺  孙继国  刘虹  李庆锁 《动物医学进展》2009,30(3)

对河北省保定地区两个NDV分离株用RT-PCR技术扩增其HN基因片断,产物经转化、克隆和测序,参照国内外已发表新城疫代表株绘制NDV系统发育进化树并分析其遗传关系,结果表明,两个分离株HN基因在遗传上同源性高达99.7%,两个分离株HN基因核苷酸序列与国内外报道的相关序列同源性为82.8%～93.2%,推导氨基酸序列同源性为90.0%～96.0%,由系统发育树可见,与现今流行于国内的Ⅶ型病毒株有密切联系.  相似文献   

高免鸡蛋卵黄囊抗体的提取与纯化     

吴周良  王正秀  孙继国 《河北畜牧兽医》2005,21(7):3-4

本文用辛酸一硫酸铵盐析法从经过鸡新城疫和鸡传染性法氏囊高免的卵黄中提取二联抗-IgG．提取液首先用琼脂凝胶沉淀试验检测鸡传染性法氏囊抗体和鸡新城疫抗体，并通过血液凝集试验和血液凝集抑制试验测定鸡新城疫抗体的血凝抑制滴度。结果表明，所提取的二联抗体对鸡新城疫和鸡传染性法氏囊抗原具有明显的特异性。  相似文献   

绵羊肺炎支原体的分离与鉴定     

王雪敏陈溥言  石玉祥孙继国 《中国动物检疫》2005,22(12):39-40

绵羊肺炎支原体是引起绵羊、山羊．特别是羔羊增生性间质性肺炎的病原体．主要危害5～10周龄羔羊．临床上主要表现为咳嗽、流鼻液、呼吸困难等症状。患病羊只消瘦、生长发育迟缓．最后衰竭死亡．死亡率高达30％～50％。病理变化以肺脏的心叶、尖叶、中间叶的间质增生和实质变性为主．此外还引起羊只消瘦、贫血。病程可长达数月至数年．致使出栏率、毛质、毛量下降，并造成饲料和人力的大量浪费．是危害养羊业的主要疫病之一．笔者从疑似该病的绵羊场分离到了1株分离物．初步鉴定为绵羊肺炎支原体。  相似文献   

绵羊肺炎支原体Y98和丝状支原体丝状亚种PG3抗原的分析     

裴艳涛  孙继国  蒋瑞萍  赵宝华 《中国兽医学报》2008,28(2):133-136

用SDS-PAGE和双向电泳方法,对绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体丝状亚种标准株PG3的全菌可溶性抗原进行分析.结果表明,用SDS-PAGE分析Y98有9条蛋白带,PG3有11条蛋白带,其中有2条相同蛋白带;用双向电泳分析Y98全菌可溶性抗原多肽斑点有288±9,主多肽斑点有47个,相对分子质量范围在27 000120 000;pI范围为4.436-7.164,PG3全菌可溶性抗原多肤斑点有243±11个,主多肽斑点有36个,相对分子质量范围在27 000～120 000,而pI范围为4.213-7.987,二者有21个相同多肽点,但其多肽含量略有差异.  相似文献