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黄萎病菌诱导下陆地棉抗病品种SSH文库的构建 总被引:4,自引:1,他引:3
采用抑制差减杂交技术,构建了陆地棉抗病品种冀棉20经黄萎病菌诱导8 h、12 h、24 h、48 h后的混合SSH文库,文库共包含800个阳性克隆。对质粒的酶切和巢式PCR结果表明,插入片段大小平均为400 bp。随机挑选20个阳性克隆进行测序,利用BLASTn和BLASTx进行序列相似性分析,发现20条EST都可以找到功能已知的同源序列,其中在BLASTn比较结果中,功能已知的有12条,占全部EST的60%;BLASTx的比较结果中有14条功能已知,占全部EST的70%。这些同源序列涉及到10种与抗病防御相关的基因,包括丝氨酸/苏氨酸激酶、谷胱甘肽-S-转移酶、乙醇脱氢酶、细胞色素P450、ACC氧化酶等。将这些序列与GenBank dbEST库进行比对,发现75%的EST都可以找到同源性较高的序列,它们都来自于植物在生物与非生物胁迫条件下特异表达的cDNA文库,这些胁迫包括病原菌诱导、低温处理、紫外线照射、热激处理、盐处理、氧胁迫、水杨酸诱导等。 相似文献
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以抑制性消减杂交(SSH)文库序列为基础,采用生物信息学和RT-PCR方法从陆地棉中克隆出精氨酸脱羧酶基因,命名为GhADC1,GenBank登录号为KC851856.该基因全长2954 bp,其中5’非翻译区477 bp,具有多个参与胁迫响应的顺式作用元件和一个编码8个氨基酸的微型编码序列(uORF);主编码区(mORF)2181bp,共编码726个氨基酸,其中N端具有叶绿体定位信号肽.推测的GhADC1蛋白具有PLP结合位点及Orn/Dap/Arg脱羧酶的信号位点,属于典型的Ⅲ型PLP依赖型精氨酸脱羧酶家族成员.荧光定量RT-PCR结果表明,正常条件下,GhADC1在叶片中表达量高于茎和根部组织,且在抗黄萎病品种冀棉20中的表达水平高于耐病品种中521;黄萎病菌胁迫能够快速诱导抗病品种根部GhADC1表达,而在耐病品种中未见明显差异,推测在抗病品种中GhADC1可能参与根部对黄萎病菌胁迫的早期应答. 相似文献
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<正> 1 前言关于成猪或性成熟前小猪卵巢的形态学情况,Sisson 等(1950)、Getty(1975)和张立教等(1984)、(1965)都有过不同程度的描述,但是对于初生仔猪卵巢的形态学观察却未见报道,本文针对这一问题进行研究和探讨,为猪的解剖、繁殖在教学和科研上提供依据。 相似文献
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利用系统聚类法进行杏矮化砧木预选的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用系统聚类分析法,依据一年生杏嫁接苗株高、茎粗、主干电阻率、POD活性及ABA含量5项指标,对参试砧木进行预选,初步选出了17株对杏具有矮化效应的砧木,表明利用系统聚类法,依据综合指标,有可能实现具有矮化效尖的单株的选择。 相似文献
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用快速冷冻方法,冷冻小鼠的2-细胞胚、4-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚和囊胚,低温保护液分别含有0.5,1.5,2.5,4mol/L丙二醇,含10%的犊牛血清和0.25mol/L蔗糖,对于8-细胞以前的小鼠胚胎,快速冷冻保存时丙二醇的浓度在2.5mol/L和4mol/L时效果较好,随着小鼠早期胚胎(囊胚以前)的发育,抗低温冷冻的能力加强。 相似文献
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为了深入研究棉花精氨酸酶基因对非生物胁迫的响应以及生理功能,利用电子克隆和RT-PCR技术从棉花中获得了精氨酸酶ORF序列Gh ARG1,盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA和MeJA处理棉花幼苗,并原核表达棉花精氨酸酶基因。生物信息学分析表明,其ORF序列长度为1 023 bp,编码340个氨基酸,具有典型的精氨酸酶保守结构域。q RT-PCR技术分析表明,在叶片中该基因转录水平上受盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA处理的诱导,而对MeJA下调其表达。将Gh ARG1完整的编码序列融合到原核表达载体p Cold-TF中,经过IPTG诱导及SDS-PAGE检测表明,Gh ARG1编码产物的分子量约为37 ku,与预期相符。p Cold-Gh ARG1重组菌粗酶液中精氨酸酶活性是对照菌的6倍。研究表明,棉花内源性精氨酸酶基因Gh ARG1可能通过ABA、SA信号途径参与棉花对盐渍和干旱胁迫的响应,且其克隆表达产物具有精氨酸酶活性,为开展其生理功能研究奠定了基础。 相似文献
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用乳胶加洋红颜料对32例初生仔猪的腹主动脉进行灌注,然后测量其小肠、大肠的长度、口径以及动脉分枝数目,利用微机处理得出,小肠的一级分枝与终末分枝、小肠长度与一级分枝、小肠长度与末分枝有相关性,但小肠直径与动脉分枝无相关性。大肠的长度与终末枝、大肠的直径与终末枝有相关性。 相似文献