转KAP6.1-GFP-蜘蛛拖丝蛋白基因核心序列4S 绵羊成纤维细胞株的筛选     

王春生  原璐  宁方勇  吴治昊  朴善花  安铁洙 《中国农业科学》2011,44(12):2561-2566

 【目的】通过体细胞核移植为获得皮肤特异表达蜘蛛拖丝蛋白的绵羊奠定基础。【方法】将pcDNA3.1和带有角蛋白结合蛋白启动子质粒pGM-T-KAP6.1分别用Bgl Ⅱ和Hin d Ⅲ双酶切后连接,再与蜘蛛拖丝蛋白基因核心序列4S连接,最后通过酶切与pIRES2-EGFP质粒连接后构建真核表达载体pIRES2-EGFP-4S;将此载体线性化后,采用脂质体法转染绵羊皮肤成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因阳性细胞。【结果】筛选得到转pIRES2-EGFP-4S的阳性细胞。对阳性细胞经体外培养后的检测显示：（1）细胞形态（长梭形）、细胞生长曲线（呈S形）、群体倍增时间（随培养时间增加逐渐缩短）和细胞接种率（细胞贴壁率及存活率在24 h内逐渐升高,并达到最高值125%）等均具有正常绵羊成纤维细胞的生物学特征;（2）阳性细胞经冷冻复苏后具有与新鲜阳性细胞相似的生物学特征;（3）PCR检测结果显示,pIRES2-EGFP-4S在阳性细胞的基因组中整合。【结论】获得具有在绵羊皮肤特异表达,且便于检测的转蜘蛛拖丝蛋白4S的绵羊成纤维细胞株。  相似文献   

鹌鹑MC3R基因多态性与体重关系的研究     

付晶  宁方勇  潘宝丽  杨建  白秀娟 《中国家禽》2010,32(22)

以MC3R基因为候选基因,根据鸡的MC3R基因序列(GenBank登录号:AB017137)在编码区设计2对引物,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测该基因在蛋用鹌鹑群体中的单核苷酸多态性(SNPs),同时对候选基因与鹌鹑体重的相关性进行分析。结果表明,鹌鹑MC3R基因在所测序列的27(G→A)和138(C→T)碱基处发生了2个突变,检测到AA、BB、CC、AB、AC、BC6种基因型;A等位基因频率为0.347,B等位基因频率为0.218,C等位基因频率为0.435。方差分析结果显示,MC3R基因型显著影响公、母鹌鹑的体重。因此推测MC3R基因可以作为影响和控制鹌鹑体重的候选基因。  相似文献   

中国林蛙产油率估测方法的探讨   总被引：5，自引：0，他引：5  

王春生  白秀娟  宁方勇 《经济动物学报》2004,8(3):161-162

为了解决林蛙输卵管难以直接度量的问题 ,并为中国林蛙的产油率、育种选择等方面的工作提供一种较直观的估测方法 ,通过屠宰试验测定了相关数据 ,并对其左右输卵管的重量进行了显著性比较 ,结果表明 ,林蛙左右输卵管的重量无显著差异 (P >0 0 5 ) ;林蛙左右输卵管重量之和与体重间存在着极显著的正相关 (r=0 78) ,并建立了回归方程 (y =2 19+41 84x)。  相似文献   

北极狐GH基因cDNA的克隆及序列分析     

杜智恒  杨春山  宁方勇  白秀娟 《黑龙江畜牧兽医》2010,(4)

  相似文献   

鹌鹑MC3R基因的SNPs及其与生长和屠体性状的目关研究     

付晶  宁方勇  魏来  白秀娟 《中国家禽》2011,33(20)

以法国沙维玛特肉用鹌鹑为试验材料,对MC3R基因进行PCR扩增,采用PCR-SSCP技术结合测序分析了MC3R基因在该鹌鹑群体中的多态性.结果表明:该鹌鹑群体中存在3个突变位点,分别是T46C、G73A和T62A,检测到了AA、BB、CC、AB、AC、BC 6种基因型,A等位基因频率为0.429,B等位基因频率为0.335,C等位基因频率为0.236.经过基因型与体重的关联分析得知:各基因型对2、3、5周龄的体重影响显著(P＜0.05)；与屠体性状相关分析结果显示,各基因型对宰前活重、全净膛重影响显著(P＜0.5),对半净膛重影响极显著(P＜0.01),但对其相应的产率无影响(P＞0.5).因此推测MC3R基因可能为影响鹌鹑体重和屠体性状的主效基因或与主效基因相连锁.  相似文献   

生长激素STH对体外培养猪COCs卵丘细胞影响的研究     

王星  罗光彬  白秀娟  石娇  姜午旗  宁方勇 《黑龙江畜牧兽医》2009,(6)

试验研究了生长激素（somatotropin,STH）对猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的卵丘细胞扩展、凋亡、凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。结果表明,STH能够促进卵丘细胞扩展,抑制卵丘细胞凋亡,抑制凋亡相关基因Bax在卵丘细胞上的表达。  相似文献   

中国特禽业存在的问题及对策     

宁方勇  白秀娟 《黑龙江畜牧兽医》2005,(9):2-4

20世纪80年代以来,随着人民生活水平的不断提高,国内外市场对特禽野味需求量呈上升趋势,加之政府的政策性导向,特禽养殖热潮在各地应运而生,并已取得一定的生产效果和经济效益.然而特禽业生产作为养殖业的一个独立分支,在其蓬勃发展的同时又暴露出许多问题,如果这些问题不能够及时得以解决,势必会影响到特禽业的健康发展.  相似文献   

黑龙江省毛皮动物养殖业发展趋势及问题     

宁方勇  白秀娟  杜智恒 《饲料博览》2020,(1):16-19

黑龙江省是我国开展毛皮动物养殖最早的省份之一,养殖历史悠久,养殖氛围浓厚,出产的毛皮动物皮张质量优良,地理和气候条件优越。在毛皮动物养殖处于行业调整的“拐点期”,虽然黑龙江省毛皮动物养殖受限于疾病频发,养殖人员老龄化严重等行业问题困扰,但黑龙江省毛皮动物养殖行业整体发展平稳,行业科技含量不断提高,毛皮动物养殖大省地位逐渐形成,将是黑龙江省毛皮动物养殖今后发展的主要趋势,黑龙江省毛皮动物养殖,在我国毛皮动物产业发展中将占有越来越重要的地位,发挥越来越重要的作用。  相似文献   

鹌鹑黑素皮质素受体-4基因的克隆与序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

付晶  宁方勇  杜智恒  杨春山  白秀娟 《中国畜牧杂志》2011,47(5)

黑素皮质素受体-4(MC4R)是G蛋白偶联受体超家族的一个成员,在人、鼠和鸡的体重、能量稳态和采食量的调控中具有重要作用。实验根据GenBank中鸡MC4R基因全序列设计9对引物,对北京白羽蛋用鹌鹑和法国沙维玛特肉用鹌鹑MC4R基因序列进行PCR扩增及克隆测序,获得的序列长度分别为2154bp和2152bp。结果表明:所测的两段序列经GenBank中的Blast分析与鸡MC4R基因同源性均为97%;在MC4R基因核苷酸水平上,北京白羽蛋用鹌鹑与法国沙维玛特肉用鹌鹑的同源性为99.11%;在MC4R)基因氨基酸水平上两品种鹌鹑同源性也很高。  相似文献   

重复交配对雌性金州黑色标准水貂繁殖性能的影响     

宁方勇  王春生  李昊  张秋婷  朴善花  安铁洙 《经济动物学报》2011,15(1):6-9

为建立完善的金州黑色标准水貂交配体系,选择性成熟的雌性和雄性金州黑色标准水貂,采用同一雄性的2次交配("1+1"、"1+7"或"1+8")、同一雄性3次交配("1+7+1'或"1+8+1")、不同雄性2次交配("A1+B7"或"A1+B8")和不同雄性3次交配("A1+A7+B1'、"A1+B7+B1"或"A1+B7+...  相似文献