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41.
[目的]通过建立的荧光定量PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的检测,探究双黄连水煎液在体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响.[方法]建立非洲绿猴胚胎肾细胞与猪繁殖与呼吸综合征病毒共感染模型,并应用CCK8法筛选双黄连水煎液的最大安全质量浓度.根据DNA序列数据库公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒-N蛋白参考序列,设计特异性引物,构建猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因质粒,建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因的荧光定量PCR方法,研究最大安全质量浓度下的双黄连水煎液对猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的影响.[结果]双黄连水煎液对非洲绿猴胚胎肾细胞的最大安全质量浓度为6.25 mg/mL,在此安全质量浓度下对猪繁殖与呼吸综合征病毒具有良好的阻断吸附和抑制复制作用,作用效果呈时间和剂量依赖性,而对猪繁殖与呼吸综合征病毒的直接杀灭作用效果不显著.[结论]成功建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的荧光定量PCR方法,通过此方法检测到双黄连水煎液在6.25 mg/mL时具有抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用.  相似文献   
42.
旨在研究猪睾丸支持细胞(ST)暴露于环境雌激素双酚A(BPA)不同时间后的基因表达谱变化。本研究将猪ST细胞设为C、B两组,每组设置3个重复,C组为空白对照组,B组细胞暴露于50μmol·L-1浓度的BPA。BPA暴露6、24 h后,收集C6、B6、C24、B24组细胞总RNA样品,构建测序文库,通过双端150 bp测序方法进行高通量转录组测序。对组装数据进行功能注释、差异基因分析以及GO和KEGG富集分析。通过Real-time PCR方法对关键差异基因表达进行验证。BPA暴露24 h后差异基因数量(6 928个)较BPA暴露6 h差异基因数量(3 940个)明显增加。编码分泌型磷蛋白1的SPP1基因在BPA暴露6 h后表达增加,但在BPA暴露24 h后表达降低。管腔结合蛋白编码基因BIP、泛素B编码基因UBB、泛素C编码基因UBC、鸟氨酸脱羧酶1编码基因ODC1表达量在BPA暴露6和24 h后均显著上调。富集分析结果表明,BPA暴露6 h后,TNF信号通路富集差异倍数最高,...  相似文献   
43.
通过点眼将IBDV感染4周龄SPF鸡,采用相对荧光定量PCR技术检测SPF鸡腔上囊单核细胞(BBMC)和外周血单核细胞(PBMC)在感染后不同阶段TLR3/4/15 mRNA表达动态变化,探讨IBDV感染对免疫反应的影响.结果显示,感染后1 d BBMC中TLR3、15的mRNA表达水平高于对照组,差异显著(P≤0.05);在感染后5 d TLR3、4显著高于对照组(P≤0.05);在感染后15 d TLR3/4/15的mRNA表达水平恢复到正常水平.PBMC中,感染后1 d TLR3、4mRNA表达水平均显著高于对照组(P≤0.05),TLR15极显著高于对照组(P≤0.01);而在感染后5d和15 d,TLR3/4均显著高于对照组(P≤0.05).以上结果表明,IBDV感染早期上调了腔上囊和外周血单核细胞的TLR3/4/15的mRNA表达水平,增强了机体的固有免疫反应.  相似文献   
44.
本试验旨在探究凝结芽孢杆菌BC-HYI对蛋雏鸡的促生长作用。将288只1日龄、初始体重(约为0.55 kg)相近的蛋雏鸡随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只。4组分别为空白组(生理盐水1 mL)以及益生菌低、中、高剂量组(凝结芽孢杆菌BC-HYI浓度分别为106、107、108CFU/mL,各1 mL),各组连续灌服28 d。在第1、2、3、4周进行取血,并采集蛋雏鸡十二指肠、空肠、回肠以及空肠黏膜。结果表明:与空白组相比,高剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI在第4周极显著提高蛋雏鸡的平均日增重(ADG)(P<0.01),极显著降低料重比(F/G)(P<0.01);中剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI显著提高蛋雏鸡十二指肠、空肠、回肠的绒隐比(P<0.05);各剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI显著降低血清中二胺氧化酶(DAO)活性和D-乳酸(D-Lac)含量(P<0.05),高剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI极显著降低血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P<0.01);中、高剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI极显著提高第4周空肠黏膜黏液蛋白2(MUC2)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的mRNA相对表达量(P<0.01);中剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI显著提高空肠黏膜中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和白细胞介素-10(IL-10)含量(P<0.05);3个剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI对空肠Toll样受体4(TLR4)信号通路的抑制作用不显著(P>0.05)。综上所述,凝结芽孢杆菌BC-HYI通过降低肠道黏膜通透性,提高肠道黏膜屏障的保护作用及吸收功能,降低蛋雏鸡料重比,提升其生长性能。  相似文献   
45.
本试验旨在探究凝结芽孢杆菌BC-HYI调节脂多糖(LPS)损伤蛋雏鸡肠道作用。选取1日龄京红蛋雏鸡180只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复6只,重复之间体重接近。空白对照组(CON组)和模型组(LPS组)饲喂基础饲粮,连续灌服生理盐水;3个益生菌组饲喂基础饲粮,同时分别连续灌服低、中、高剂量的凝结芽孢杆菌BC-HYI (浓度分别为106、107、108CFU/mL),连续灌服28 d,28 d后灌服LPS,灌服浓度为2 mg/kg,灌服剂量为200μL/只,试验周期为6 h,分别记为LOW+LPS、MID+LPS、HIGH+LPS组。6 h后采血,剖检、收集蛋雏鸡十二指肠、空肠、回肠肠道组织及空肠黏膜。结果表明:与空白对照组相比,LPS灌服后,蛋雏鸡十二指肠、空肠、回肠的绒隐比以及空肠黏膜黏液蛋白2(MUC2)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),血清二胺氧化酶(DAO)活性及D-乳酸(D-Lac)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和白细胞介素-10(IL-10)的含量,空肠黏膜Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB (NF-κB)的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著提高(P<0.05)。与LPS组相比,中、高剂量凝结芽孢杆菌BC-HYI极显著上调十二指肠、空肠、回肠绒隐比(P<0.01),极显著下调空肠黏膜TLR4和NF-κB的mRNA相对表达量和蛋白表达量(P<0.01),显著下调蛋雏鸡血清DAO活性及D-Lac和TNF-α含量(P<0.05);凝结芽孢杆菌BC-HYI显著提高空肠黏膜MUC2、Occludin和ZO-1的mRNA相对表达量(P<0.05);凝结芽孢杆菌BC-HYI对空肠黏膜SIgA和IL-10含量无显著影响(P>0.05)。综上所述,凝结芽孢杆菌BC-HYI对LPS损伤有缓解作用,能降低肠道通透性,下调TLR4/NF-κB信号通路中TLR4和NF-κB的mRNA相对表达量和蛋白表达量,从而改善LPS灌服后的肠道损伤,提高蛋雏鸡肠道健康。  相似文献   
46.
目的:探讨不同炮制方法对黄芪制品中黄芪甲苷含量的影响。方法:将同一产地和批次的黄芪通过不同的方法炮制为炒黄芪、盐黄芪和酒黄芪,分析不同黄芪炮制品中黄芪甲苷含量的变化。结果:与生黄芪比较,炒黄芪和盐黄芪中黄芪甲苷含量分别降低18.27%和15.05%,而酒黄芪中黄芪甲苷含量则增加9.14%。结论:不同炮制方法对黄芪甲苷的含量有一定影响。  相似文献   
47.
2株猪源益生性肠球菌对酸和胆盐及热的耐受性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
为了筛选动物肠道中的有益优势菌,研究了2株分离自猪肠道的益生性屎肠球菌(E1,E7)的耐受特性。本试验设pH 2,2.5,3,4的4个处理组,以pH 7为对照组;设胆盐浓度分别为0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1%的5个处理组,以不含胆盐的培养液为对照组;温度设50,80,90℃,以37℃为对照,分别作用5,10,15,20 min,经该3种方法处理后各取100μL培养液用细菌稀释计数法测定活菌数。结果表明:E1,E7都有较强的耐酸能力,在pH 2时,作用2 h后仍能检测到活菌。胆盐浓度达到0.4%时,E1,E7仍有一定的耐受能力,随胆盐浓度升高至0.6%时,活菌数由108.2CFU/mL降到102.5CFU/mL。2菌株在不同温度下经不同作用时间处理后呈不同的生长态势。  相似文献   
48.
致病性嗜水气单胞菌对31种抗菌药物的敏感试验   总被引:5,自引:0,他引:5  
对从北京某渔场分离的 4株致病性嗜水气单胞菌与南京株J - 1所做的对 31种抗菌药物的敏感性试验结果表明:除仅作用于革兰氏阳性菌的青霉素和氯林可无抑制作用外,对头孢唑啉、羧苄青霉素、氨苄青霉素、苯唑青霉素、磺胺等 5种广谱抗菌药物出现全部耐药;对头孢氨苄、先锋霉素呈现 3株耐药;对复方磺胺 2株耐药;对哌拉西林、妥布霉素呈现 1株耐药;其余 19种抗生素未产生耐药性,但有的已呈现中度敏感。说明在水产养殖中频繁使用抗生素,已产生了耐药性,随着抗生素的广泛作用,将会产生更多的耐药菌株,值得注意  相似文献   
49.
山东某鸡场送检的40日龄发病鸡法氏囊经处理,离心取上清液,以绒毛尿囊膜途径接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株病毒株.该毒株能使鸡胚于接种后72~84h内死亡,经琼脂扩散、血凝试验及动物回归试验,排除其他病原混合感染的可能,鉴定该分离毒株为鸡传染性法氏囊病毒(IBDV).  相似文献   
50.
使用适应鸡胚成纤维细胞的IBDV血清Ⅰ型来制备IBD琼扩抗原 .将此细胞毒经PEG沉淀 ,取沉淀透析、灭活即为IBD琼扩抗原 .经琼扩试验和对流免疫电泳试验 ,表明所制抗原和高免血清的特异性、效价、敏感性及 2 0份待检鸡血清的检测结果与标准抗原和标准血清的基本一致 .且此制备方法简单、快速、安全 ,值得推广  相似文献   
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